細胞培養中支原體污染的檢測方法
細胞培養中最令人頭疼的問題之一是支原體的污染。在人們日常生活工作環境中,支原體無處不在,它可以通過人的毛發、口腔、穿著的衣服、動物的皮毛以及日常的細胞培養的操作環境造成對細胞污染。據說有11%的細胞株均受到不同程度的支原體污染,更有統計細胞培養中支原體感染發生率達到63%,對實驗結果會產生不可預期的影響。而支原體污染的癥狀不如細菌、真菌、霉菌污染比較容易辨認,一般需要借助其他手段,如PCR、熒光染色試劑盒、培養菌落等方法。造成細胞污染的支原體有很多,但主要有四種支原體:口腔支原體、精氨酸支原體、豬鼻支原體和萊氏無膽甾原體。由于支原體體積很小,直徑約在0.2-2.0um之間,可以通過濾膜而直接造成培養基或血清的污染。另外,被支原體污染的細胞培養基液體往往并不渾濁,細胞受損程度并不明顯,形態很少改變,這樣就更增加 了人們對其的防范難度。從形態結構上,支原體形態多變,它多吸附在細胞表面或散于細胞與細胞之間。從其理化或生物學特性上講,所......閱讀全文
細胞培養實驗——懸浮細胞培養
實驗材料凍存 HeLa S3 細胞試劑、試劑盒70% 乙醇完全 MEM-10胰酶/EDTA儀器、耗材旋轉瓶完全培養基-525 cm2 組織培養瓶C02 培養箱Sorvall H-6000A 轉子100 ml 或 200 ml 通氣旋轉瓶和帶濾膜的瓶蓋實驗步驟1. 將含有凍存 HeLa S3 細胞的安
細胞培養技術的細胞培養方式
高等生物是由多細胞構成的整體,在整體條件下要研究單個細胞或某一群細胞在體內(in vivo)的功能活動是十分困難的。但是如果把活細胞拿到體外(in vitro)培養進行觀察和研究,則要方便得多。活細胞離體后要在一定的生理條件下才能存活和進行生理活動,特別是高等動植物細胞要求的生存條件極其嚴格,稍有不
動物細胞培養——細胞培養介紹
實驗方法原理目的細胞培養的評判性檢查。應用檢查常規維持的一致性;在復蘇、傳代、凍存前培養狀況的評估;對新的或實驗性情形反應的評估;確認明顯的污染物。訓練目標熟悉不同類型和不同密度的細胞培養的外觀;數碼或膠片相機的使用;滅菌物品和污染物間的區別,健康的和不健康的培養物間的區別;培養物生長階段的評估。監
細胞培養實驗——貼壁細胞培養
實驗材料凍存細胞試劑、試劑盒70% 乙醇PBS胰酶/EDTA儀器、耗材25 cm2 和 150 cm2 組織培養瓶CO2 培養箱實驗步驟1. 將含有凍存細胞的安瓿放入 37℃ 水浴中解凍。2. 用 70% 乙醇對安瓿的頂端進行消毒,打開安瓿,用吸管將細胞轉移到含有 5 ml 起始培養基的 25 cm
細胞培養
細胞培養是一種常用的實驗室技術,其中原核或真核細胞在受控條件下生長。大規模哺乳動物細胞培養被廣泛用于生物技術中,特別是用于生產疫苗,蛋白質,酶,抗體和激素。細胞培養還用于許多研究**域,特別是在制藥**域,其中將細胞用作研究許多疾病(例如癌癥或心臟病)的模型。細胞用于靶標鑒定和驗證,基于細胞的測定法
小鼠肝細胞培養實驗——細胞培養技術
實驗方法原理直接從生物體內獲取組織細胞進行的首次培養稱為原代細胞培養。原代培養是建立各種細胞系的第一步,是從事培養工作的人員應熟悉和掌握的最基本的技術。根據培養方法不同分為組織塊培養法和單層細胞培養法。實驗材料小鼠試劑、試劑盒DMEMDMEM胰酶PBS儀器、耗材飯盒紗布小剪子小鑷子大鑷子大燒杯平皿研
細胞培養--細胞培養的具體步驟
一、細胞復蘇將凍存細胞從液氮中取出后,在37℃水浴鍋內不斷搖動促進其融化。移入15ml離心管中,加入10ml預熱的DMEM完全培養基,輕輕吹勻,離心,2000rpmX2min,棄上清液。加入10ml DMEM培養基清洗,棄上清液。加入10ml DMEM完全培養基,輕輕吹打,接種于10cm盤中,在含5
巨噬細胞培養常用細胞培養器皿介紹
常用細胞培養器皿有培養瓶、培養板、培養皿等。常準備量是使用量的三倍。器皿應選擇透明度好,無毒,利于細胞粘附和生長的材料,常用一次性聚苯乙烯材料制品或中性硬度玻璃制品。常用的器皿有下面幾種。巨噬細胞1、液體儲存瓶:用于儲存各種配制好的培養液、血清等液體,常用規格有500ml、250ml、100ml等幾
大鼠肝星狀細胞培養實驗——細胞培養技術
大鼠肝星狀細胞原代培養可以:(1)用于細胞保種;(2)用于分子生物學研究;(3)用于基因治療研究。實驗方法原理將小鼠的肝細胞從機體中取出,經胰酶、螯合劑(常用EDTA)處理,分散成單細胞,置合適的培養基中培養,使細胞得以生存、生長和繁殖。實驗材料雄性 SD 大鼠試劑、試劑盒戊巴比妥鈉小牛血清DMEM
細胞培養--細胞培養的一般過程
一、準備工作準備工作對開展細胞培養異常重要,工作量也較大,應給予足夠的重視,準備工作中某一環節的疏忽可導致實驗失敗或無法進行。準備工作的內容包括器皿的清洗、干燥與消毒,培養基與其他試劑的配制、分裝及滅菌,無菌室或超凈臺的清潔與消毒,培養箱及其他儀器的檢查與調試,具體內容可參閱有關文獻。二、取材在無菌