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    植物組織pcr

    直接PCR(Direct PCR)使用未純化的樣本進行PCR擴增,無需核酸純化步驟,為DNA擴增帶來前所未有的便捷。如果您研究領域涉及基因分型、轉基因、質粒檢測、基因敲除分析、DNA來源鑒定、物種鑒定、SNP分析等,請看完下面的介紹吧。 直接PCR需要的試劑 樣本裂解液 樣本裂解液可自己配置,也可購置。不同品牌裂解液組份的差異,使得裂解能力各有不同,進而裂解時間稍有差異。比如動物組織樣本制備,一般推薦30min或過夜裂解,也有極少數裂解液可以將樣本制備時間縮短為5min。 PCR master mix 建議使用熱啟動DNA聚合酶,增強特異性擴增,擴增能力也更強。 清除或抑制樣本中影響DNA擴增的組份 對于較難處理的樣本,如植物和血液,含有較多的可以影響DNA聚合酶結構和活性的抑制劑組份,造成PCR擴增難以進行。針對這類樣本,處理樣本時需要加入可以清除或抑制樣本中影響DNA擴增的組份。 德國MACHE......閱讀全文

    激光顯微切割系統應用于腫瘤組織的切片研究

    胰腺導管腺癌(PDAC)是第四大癌癥相關死因的癌癥,診斷后具有5年存活率的病人僅有3%。造成如此之差預后的原因,主要是因為局部的高復發率和對治療的多因素的抵抗。在胰腺癌中,85%的病人診斷后處在惡性程度很高的階段,主要的特征是浸潤近端的淋巴結和血管結構,也伴隨轉移到肝和腹膜。吉西他濱作為首選藥能夠產

    利用高通量組織研磨儀提取植物DNA樣品詳細操作步驟

       DNA一直是生物學中重要研究對象,通過它的遺傳特性也能為農業育種提供巨大幫助,今天小編就針對植物DNA的提取為大家做下介紹,其中著重講一講樣品的研磨步驟:   一、樣品研磨   1) 取1g的樣品放入2ml樣品管中; &nb

    科研中的“新星”技術——MicroRNA熒光定量PCR

    Micro RNA簡介微小RNA(microRNA,簡稱miRNA)是生物體內源長度約為20-23個核苷酸的非編碼單鏈小分子RNA,通過與靶mRNA的互補配對而在轉錄后水平上對基因的表達進行負調控,導致mRNA的降解或翻譯抑制。是由具有發夾結構的約70-90個堿基大小的單鏈RNA前體經過Dicer酶

    小分子RNA

    RNA一度被認為僅僅是DNA和蛋白質之間的“過渡”,但越來越多的證據清楚的表明,RNA在生命的進程中扮演的角色遠比我們早前設想的更為重要。RNA 干擾(RNA interference)的發現使得人們對RNA調控基因表達的功能有了全新的認識,更因為可以簡化/替代基因敲除而成為研究基因功能的有力工具,

    2020年全球核酸提取儀市場情況及新品匯總

      分析測試百科網訊 2020年是不平凡的一年,新冠疫情的爆發導致全球活動受到阻礙。疫情不僅對人們的生活帶來嚴重影響,同時也對分析檢測行業帶來了新的機遇。在全球新冠診斷標準中,核酸檢測是公認的金標準,不僅檢測速度快,準確率也能達到相關要求。  在核酸檢測過程中,核酸提取作為其樣品前處理過程,對最終分

    RACE-PCR克隆基因的幾點建議

    摘 要:  RACE是一種快速克隆cDNA末端的方法,目前, 該方法被廣泛應用于未知堿基序列基因的克隆,尤其是SMART RACE技術更為人們所青睞。本文總結了我們實驗室用SMART RACE技術克隆基因的一些心得體會,希望對用RACE方法克隆基因的同行有些幫助。關鍵詞: RACE; RN

    體外DNA重組技術-1

    在體外將兩個或多個來源相同或不相同的DNA片段連接成新的重組DNA分子,再轉到特定宿主細胞中進行自主復制并表達。這是分子生物學中的基本技術。DNA重組技術的基本程序包括:(1)獲得外源DNA:外源DNA是進行DNA重組的目的DNA片段,一般采用 DNA聚合酶鏈式反應(PCR)或逆轉錄-DNA聚合酶鏈

    TLP基因的表達模式分析

    實驗概要本實驗對水稻、擬南芥及楊樹的TLP基因表達模式進行了分析,為進一步研明植物中TLP基因的功能奠定基礎。實驗步驟1. 水稻TLP基因的RT-PCR分析   1) 植物材料選取水稻的根、莖、葉、花和種子的新鮮組織用于RNA的提取。水稻材料采集后,用液氮速凍,以保證RNA不被降

    植物miRNA及piRNA的逆轉錄

    miRNA在植物的發育、抗病、和應激反應中發揮著重要作用。一般認為,這些小的非編碼RNA通過靶向mRNA剪切,在后轉錄水平調節植物的基因表達。這些基因表達中的靶向變化由數百個成熟miRNA的差異表達所調控,每個成熟miRNA結合在靶mRNA的特定序列上。因此,對植物的成熟miRNA調控和表達進行分析

    植物染色質免疫沉淀試劑盒的使用說明

    EpiQuik?植物染色質免疫沉淀試劑盒包括全套的試劑,允許試驗者有效地在體內研究蛋白-DNA相互關系。整個過程可以在6小時內完成,產品效果遠遠優于任何競爭對手的試劑盒。EpiQuik?植物染色質免疫沉淀試劑盒適用于將特異性免疫沉淀與定性和定量PCR、ChIP-Seq、ChIP-on-chip結合使

    動物、植物、微生物中提取高質量的基因組DNA(一)

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    如何準確檢測植物病原體?

    植物病原體包括真菌,細菌,線蟲和病毒,所有可導致疾病癥狀并顯著降低生產力,質量甚至導致植物死亡的生物。病原菌可以多種方式引入并傳播到宿主植物中。細菌和真菌孢子可以通過風,雨傳遞,也可以通過雨水從土壤中轉移到植物組織中。當昆蟲以被感染的宿主植物為食,再以未感染的植物為食并進食時,它們可以作為病原體感染

    了解振動型球磨機的原理

    樣品類型 硬性、中硬性、軟性、彈性及纖維性樣品 zui大進樣尺寸 不過8 mm zui終出料粒度 約5 μm 樣品量 0.2-50 ml 振動頻率 200-2000 r/

    數字PCR應用及前景

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    你想要知道的數字PCR應用及前景

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    數字PCR應用及前景

    一. PCR的發展歷史 PCR技術自問世以來,在遺傳病、病原體、癌基因等分子診斷領域和法醫鑒定等方面發揮了巨大作用。第一代 PCR在進行擴增后通過凝膠電泳進行定性分析。 隨著生物分子熒光技術的發展,1992年實時熒光定量PCR(Quantitative Real-time PCR

    OsAGAP在擬南芥中的功能分析

    實驗概要本實驗對水稻小G蛋白ArfGTPase激活蛋白OsA GAP在擬南芥中的功能進行了分析,首先構建了OsAGAP在擬南芥中的正義表達載體,利用農桿菌介導的真空抽濾法轉化擬南芥,篩選擬南芥陽性苗,然后用組織PCR和 Southern雜交做了檢測。實驗材料1. 所用擬南芥((Arabidopsis

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    鑒定轉基因植物的第一步就是要確定被轉基因已經穩定的整合到了染色體上。第二步任務就是評估有多少個轉基因拷貝,以及每個轉基因的表達水平如何。一般經過上游表達載體的設計構建以及下游轉化體系的建立、轉化品系的篩選鑒定等一系列步驟后,即獲得 T 0 代轉基因植物。在轉化過程中,外源 DNA 隨機插入植物

    基因組DNA的提取

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    美國學者Eric S. Lander于1996年正式提出單核苷酸多態性(SNP)為第三代分子標記以后,SNP已經廣泛應用于經濟性狀關聯分析、生物遺傳連鎖圖譜構建、人類致病基因篩選、致病風險診斷及預測、個體化藥物篩選等生物、醫學研究領域。在經濟作物育種領域,檢測SNP可實現對所需性狀的早期選擇。這

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    基因芯片技術及其研究現狀和應用前景

      摘要:基因芯片技術是90年代中期以來快速發展起來的分子生物學高新技術,是各學科交叉綜合的嶄新科學。其原理是采用光導原位合成或顯微印刷等方法,將大量DNA探針片段有序地固化予支持物的表面,然后與已標記的生物樣品中DNA分子雜交,再對雜交信號進行檢測分析,就可得出該樣品的遺傳信息。基因芯片技術目前國

    基因芯片的制備、應用與前景

     摘要:基因芯片技術是90年代中期以來快速發展起來的分子生物學高新技術,是各學科交叉綜合的嶄新科學。其原理是采用光導原位合成或顯微印刷等方法,將大量DNA探針片段有序地固化予支持物的表面,然后與已標記的生物樣品中DNA分子雜交,再對雜交信號進行檢測分析,就可得出該樣品的遺傳信息。基因芯片技術目前國內

    基因芯片技術及其研究現狀和應用前景

      生物芯片技術是隨著"人類基因組計劃"(human genome project, HGP)的進展而發展起來的,它是90年代中期以來影響最深遠的重大科技進展之一,它融微電子學、生物學、物理學、化學、計算機科學為一體的高度交叉的新技術,具有重大的基礎研究價值,又具有

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    一種無酚/無氯仿組織研磨從熱帶木本植物中提取核酸的方法概述:木本熱帶植物中含有大量復雜的有機化合物,這些有機化合物會抑制提取RNA或DNA所需的化學程序,從而不利于后續研究及應用,如RNA測序和基因表達分析。為了克服這個問題,研究人員必須使用CTAB / PVP緩沖液的提取方案,而不能使用市售的

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    TRIzol法同時提取RNA、DNA、蛋白質

    TRIzol試劑適用于從細胞和組織中快速分離RNA。TRIzol試劑有多組分分離作用,與其他方法如硫氰酸胍/酚法、酚/SDS法、鹽酸胍法、硫氰酸胍法等相比,最大特點是可同時分離一個樣品的RNA\DNA\蛋白質.TRIzol使樣品勻漿化,細胞裂解,溶解細胞內含物,同時因含有RNase抑制劑可保持RNA

    TRIzol法同時提取RNA、DNA、蛋白質

    TRIzol試劑適用于從細胞和組織中快速分離RNA。TRIzol試劑有多組分分離作用,與其他方法如硫氰酸胍/酚法、酚/SDS法、鹽酸胍法、硫氰酸胍法等相比,最大特點是可同時分離一個樣品的RNA\DNA\蛋白質.TRIzol使樣品勻漿化,細胞裂解,溶解細胞內含物,同時因含有RNase抑制劑可保持RNA

    TRIZOL提取注意事項

    警告: 有毒物接觸皮膚或者不慎吞服。會導致灼傷。一旦接觸皮膚后立即以大量的洗滌劑和清水清洗。若感不適,看醫生并尋求苯酚和其他成分(JTSRN 80100437-5000p)的正確治療方案。)  TRIZOL在室溫下能穩定保存12個月。盡管如此,為達到最佳效果,我們建議保存在2—8°C的環境

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