重組細胞因子溶解小帖士
1.離心(Centrifuge):高速離心 (10, 000 rpm) 20-30 秒,或低速離心 (2, 000 rpm) 5 分鐘。 2.溶解(Reconstitution):用去離子水或其它緩沖液(根據說明書要求進行選擇)溶解至說明書要求的濃度 (一般為 0.1-1.0 mg/ml)。溶解時不可振蕩,避免因化學鍵的斷裂造成蛋白失活,可加入適當的溶劑輕搖并靜置一段時間,待細胞因子完全溶解后使用。溶劑的選擇:1)要求用去離子水溶解的產品,務必不可用鹽溶液,避免過高的鹽濃度造成蛋白不可逆的析出;2) 要求用鹽溶液溶解的產品,請依照說明書上的濃度,同樣也是為了避免過高的鹽濃度。 3.分裝和貯存(Aliquot and Storage):蛋白溶解后可根據自己的實驗需要進一步稀釋成工作液,稀釋可用RPMI 1640、DMEM 或PBS 等溶液。工作液在4℃可保存1 周,如需長期保存,最好在稀釋液中加入10%的FCS(小牛或胎牛血清......閱讀全文
細胞重組的介紹
細胞重組由不同細胞的核體與胞質體在融合因子介導下并合形成完整細胞的技術.對研究真核細胞的核、質關系及基因轉移等問題具有重要意義。應用化學物質(如細胞松弛素B或秋水仙堿)并結合機械力(如離心力等),把細胞的核與胞質部分分開。分離出來的核,帶有少量胞質,并圍有質膜,稱“核體”或“小細胞”。有些核體能
細胞重組-無需插入基因
無需插入基因也可實現人體細胞重組??? 美新發現為細胞重組研究開辟了全新思路 美國研究人員發現了一種打開人體成纖維細胞(皮膚細胞)中的干細胞基因的新方法,從而避免了插入額外基因或利用病毒所帶來的健康風險。這一成果開辟了細胞重組的新途徑,未來通過誘使患者自身細胞修復和再生受損組織,該方法將可用于
細胞化學詞匯RNA重組
中文名稱:RNA重組英文名稱:RNA recombination定 義:RNA分子內或分子間發生的共價重新組合。應用學科:遺傳學(一級學科),分子遺傳學(二級學科)
重組細胞因子溶解
1.離心(Centrifuge):高速離心 (10, 000 rpm) 20-30 秒,或低速離心 (2, 000 rpm) 5 分鐘。2.溶解(Reconstitution):用去離子水或其它緩沖液(根據說明書要求進行選擇)溶解至說明書要求的濃度 (一般為 0.1-1.0 mg/ml)。溶解時不可
細胞重組的技術方法
轉移 核體與胞質體在仙臺病毒或聚乙二醇的作用下能合并成為完整細胞,稱“重組細胞”。目前不僅能使大鼠核體與小鼠胞質體合并成為重組細胞,并能使人的核體與小鼠胞質體形成重組細胞。若將胞質與完整的細胞融合,構成含有一個親本核和兩個親本胞質的雜種細胞,稱“胞質雜種”。這樣,就可把一個親本細胞的胞質基因(
體細胞重組的概念
淋巴細胞在發育,成熟的過程中,抗原受體基因首先在DNA水平上進行重排,形成可表達BCR和TCR的功能性基因,然后才能得以表達TCR和BCR,這一過程稱為體細胞重組。
細胞化學詞匯DNA重組
中文名稱:DNA重組外文名稱:DNA recombination類?????? 型:同源重組、位點重組和轉座重組作?????? 用:是基因工程中的關鍵步驟本???????質:兩個不同姐妹染色體間遺傳物質的交換應?????? 用:疫苗開發等
體細胞重組的概念
淋巴細胞在發育,成熟的過程中,抗原受體基因首先在DNA水平上進行重排,形成可表達BCR和TCR的功能性基因,然后才能得以表達TCR和BCR,這一過程稱為體細胞重組。
什么是細胞重組結?
中文名稱重組結英文名稱recombination nodule定 義減數分裂前期Ⅰ的粗線期階段,聯會復合體上形成的球形或橢圓形結構。直徑約90 nm,內含蛋白質等,與染色體交叉、交換有關。應用學科細胞生物學(一級學科),細胞周期與細胞分裂(二級學科)
《細胞》:單細胞測序助力基因重組圖譜
來自斯坦福大學醫學院等處的研究人員發表了題為“Genome-wide Single-Cell Analysis of Recombination Activity and De Novo Mutation Rates in Human Sperm”的文章,首次公布了來自一個成人男子91個
重組細胞因子的要求
1. 真實性:重組蛋白產品一致經過N末端氨基酸序列分析;必要時應用SDS-PAGE, RP-HPLC和質譜(MS)檢測其真實性。2. 純度:應用SDS-PAGE和RP-HPLC方法分析產品純度。3.?生物活性:進行相應的體外(in vitro)或體內(in vivo)活性檢測。4. 蛋白含量:通過紫
重組細胞因子的狀態
市場上主流的重組蛋白產品,多在不含載體蛋白或其他添加物(如BSA、HAS、蔗糖等)的條件下,以低鹽的形式做凍干處理,因此微量(多以微克計量)的細胞因子在凍干過程中會沉積于管內,形成很薄或不可見的蛋白層,所以建議在收到試劑后,務必于開蓋前先離心20-30秒,使可能附于管蓋或管壁的蛋白成分聚集于凍干館的
細胞化學詞匯重組活化基因
中文名稱:重組活化基因英文名稱:recombination activating gene;RAG定 義:參與激活V(D)J DNA重組作用的基因。在V(D)J重組中重組活化基因的產物可調節依賴于重組信號序列的切割作用。應用學科:生物化學與分子生物學(一級學科),核酸與基因(二級學科)
體細胞重組定位法介紹
原理相同于基因純合化的定位方法。由于體細胞交換發生得較少,所以常用?X射線處理雜合體使之發生更多的體細胞交換。
細胞因子重組要求及狀態
重組細胞因子要求:1. 真實性:重組蛋白產品一致經過N末端氨基酸序列分析;必要時應用SDS-PAGE, RP-HPLC和質譜(MS)檢測其真實性。2. 純度:應用SDS-PAGE和RP-HPLC方法分析產品純度。3.?生物活性:進行相應的體外(in vitro)或體內(in vivo)活性檢測。4.
細胞因子重組要求及狀態
重組細胞因子要求: 1. 真實性:重組蛋白產品一致經過N末端氨基酸序列分析;必要時應用SDS-PAGE, RP-HPLC和質譜(MS)檢測其真實性。 2. 純度:應用SDS-PAGE和RP-HPLC方法分析產品純度。 3. 生物活性:進行相應的體外(in vitro)或體內(in vivo
細胞因子重組要求及狀態
重組細胞因子要求: 1. 真實性:重組蛋白產品一致經過N末端氨基酸序列分析;必要時應用SDS-PAGE, RP-HPLC和質譜(MS)檢測其真實性。 2. 純度:應用SDS-PAGE和RP-HPLC方法分析產品純度。 3. 生物活性:進行相應的體外(in vitro)或體內(in vivo
雜交瘤細胞和重組抗體
在過去的二十五年里,利用雜交瘤細胞生產了成千上萬的鼠單克隆抗體。人們用同樣的技術從轉基因鼠中克隆人類的抗體,并設計了全長型抗體和重組片段,它們可以被用于多種診斷和治療。而且如果他們能在哺乳動物細胞,牛奶及植物中表達,就可以大量獲得。?一個世紀以前,Paul Ehrlich提出了著名的側鏈理論來解
皮膚+芯片,首次實現活體內細胞重組
最新一期《自然·納米技術》報道了再生醫學的重大突破,美國俄亥俄州立大學研究人員開發出一種組織納米轉染(TNT)新技術,首次實現活體內細胞重組,有望在身體內生成任何用于治療目的的細胞類型,幫助修復受損組織或恢復老化的器官、血管及神經細胞等組織。 俄亥俄州立大學再生醫學和細胞療法中心主任錢丹·塞
細胞因子的重組要求及狀態
重組細胞因子要求: 1. 真實性:重組蛋白產品一致經過N末端氨基酸序列分析;必要時應用SDS-PAGE, RP-HPLC和質譜(MS)檢測其真實性。 2. 純度:應用SDS-PAGE和RP-HPLC方法分析產品純度。 3. 生物活性:進行相應的體外(in vitro)或體內(in vivo
基因重組皰疹病毒專殺癌細胞
意大利博洛尼亞大學研究人員日前通過生物基因技術,重組出一種專門殺死惡性腫瘤細胞而不傷害健康細胞的皰疹病毒。動物實驗證實,用這種病毒治癌有一定效果。 據意大利《共和國報》報道,這種皰疹病毒在經過部分基因重組后,可“辨認”惡性腫瘤細胞內一種名為HER-2的致癌基因,直接定位并殺死腫瘤細胞,避免
重組細胞因子的凍干狀態
重組細胞因子的凍干狀態與市場上已有的其他蛋白產品不同,PeproTech細胞因子不含carrier protein或其他添加物(如BSA、HAS、蔗糖等),而是以低鹽的形式做凍干處理,因此微量的細胞因子在凍干過程中會沉積于管內,形成很薄或不可見的蛋白層。PeproTech的質控過程確保每管裝
日本干細胞研究機構面臨重組
RIKEN所長Ryoji Noyori 圖片來源:DENNIS NORMILE/SCIENCE 日本神戶理化研究所(RIKEN)發育生物學中心(CDB)的一個研究小組近日報道稱,他們無法復制今年早些時候發表在《自然》雜志上的制造干細胞的簡單方法。“只有一些中期結果,沒有最終結論。”RIKEN
重組細胞因子分類及應用概述
一、細胞因子的概念??? 細胞因子(cytokine)是由機體多種細胞分泌的小分子蛋白質,通過結合細胞表面的相應受體發揮以調節免疫應答為主的生物學作用。細胞因子具有非常廣泛的生物學活性,包括促進靶細胞的增殖和分化,增強抗感染和細胞殺傷效應,促進或抑制其它細胞因子和膜表面分子的表達,促進炎癥過程,影響
重組細胞因子溶解小帖士
1.離心(Centrifuge):高速離心 (10, 000 rpm) 20-30 秒,或低速離心 (2, 000 rpm) 5 分鐘。 2.溶解(Reconstitution):用去離子水或其它緩沖液(根據說明書要求進行選擇)溶解至說明書要求的濃度 (一般為 0.1-1.0 mg/ml)。溶解時不
重組人粒細胞巨噬細胞集落刺激因子
重組人粒細胞巨噬細胞集落刺激因子可刺激粒細胞、單核細胞增殖,刺激T淋巴細胞的生長。誘導正常人骨髓細胞形成粒細胞集落形成單位(CFU-G)、巨噬細胞集落形成單位(CFU-M)和粒細胞-巨噬細胞集落形成單位(CFU-GM),使集落的大小和數目均增加,能促進早期多能前體細胞增殖并分化,并可與紅細胞生成
tcr重組細胞免疫療法都用于什么病
治療性傳播疾病TCR為所有T細胞表面的特征性標志,以非共價鍵與CD3結合,形成TCR—CD3復合物。TCR的作用是識別抗原。顧名思義,TCR 基因重組免疫激活療法是采用T細胞治療疾病中的基因治療方法。
細胞因子的重組要求及狀態介紹
重組細胞因子要求: 1. 真實性:重組蛋白產品一致經過N末端氨基酸序列分析;必要時應用SDS-PAGE, RP-HPLC和質譜(MS)檢測其真實性。 2. 純度:應用SDS-PAGE和RP-HPLC方法分析產品純度。 3. 生物活性:進行相應的體外(in vitro)或體內(in vivo
重組DNA分子導入原核細胞及PCR檢測
一、目的與意義 學習使用大腸桿菌感受態細胞導入外源DNA,使學生掌握DNA分子進入細胞的原理和實驗操作技術;?掌握PCR法快速鑒定重組載體的基本操作。 二、實驗原理 轉化是指將質粒DNA或構建的重組子導入細胞的過程。細菌細胞在低溫,低滲(CaCl2溶液)中膨脹成球形。轉化混合物中的DNA形成了抗DN
重組CHO細胞分離及蛋白收獲技術介紹
簡介:現今,通過哺乳動物細胞培養,新一代生物制藥得到了前所未有的發展。本文主要介紹通過中空纖維微孔過濾,以分離哺乳動物分泌蛋白的過程。起始濃度為2×105 cell/ml,細胞外蛋白產物是一種與白介素-2相似的10kD淋巴因子,是一種潛在的腫瘤治療藥物。該應用需要去除細胞和顆粒,而不裂解細胞,同時達