DNA純化去雜質實驗
這周我們來討論一項常用的技術,即使常用但仍引起部分人核酸分離焦慮癥。那就是基因組DNA的純化去雜質。場景是這樣的:你有一份采自南太平洋中部一個偏僻小島上首次發現的古老蘭花品種根際土壤樣品。你使用了非PowerSoil Kit法提取其中的微生物DNA。最終DNA含有太多雜質,無法PCR擴增。因此需要去除腐植酸等PCR抑制因子。你需要所有的核酸分子通過全基因組鳥槍測序……怎么辦?你致電MO BIO說了你的大概情況,而我們推薦了使用PowerClean Kit。PowerClean是不帶研磨珠套管的迷你版PowerSoil Kit。樣品經過了IRT處理,重新洗脫得到干凈的DNA。等等…分光光度計讀數發生變化了!純化前顯示有300ng/μl的DNA,現在卻只有30ng/μl。有比這更可怕的噩夢嗎?你的DNA大量丟失了!先別急。可以告訴你,你的DNA現在是安全并且干凈的。使用實驗室常規方法純化DNA前后到底發生什么事,下面向你解釋......閱讀全文
DNA純化去雜質實驗
這周我們來討論一項常用的技術,即使常用但仍引起部分人核酸分離焦慮癥。那就是基因組DNA的純化去雜質。場景是這樣的:你有一份采自南太平洋中部一個偏僻小島上首次發現的古老蘭花品種根際土壤樣品。你使用了非PowerSoil Kit法提取其中的微生物DNA。最終DNA含有太多雜質,無法PCR擴增。因此需要去
純化DNA實驗
從哺乳動物細胞或組織分離DNA 基因組DNA的快速純化 純化質粒(堿裂解法) ? ? ? ? ? ? 實驗材料 細胞
純化DNA實驗
實驗材料 細胞試劑、試劑盒 TBS抽提緩沖液儀器、耗材 離心管實驗步驟 1. 根據樣品類型,從下列方法中選一個作為步驟 1 進行操作。(1) 細胞樣品① 單層培養的細胞以用冰預冷的 TBS 將單層細胞洗滌 2 次,用刮棒把細胞刮入約 0.5 ml 的 TBS 中,將細胞懸液轉移到冰浴的離心管中,
純化DNA實驗
從哺乳動物細胞或組織分離DNA 基因組DNA的快速純化 純化質粒(堿裂解法) ? ? ? ? ? ? 實驗材料 細胞
DNA純化實驗
PCR清潔試劑盒純化法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 硅膠膜可在高鹽條件下結合DNA,又可在低鹽條件下與DNA分離。用于清潔目的的含DNA溶液中的引物、單核苷酸、酶、礦物油
DNA純化實驗
實驗方法原理 硅膠膜可在高鹽條件下結合DNA,又可在低鹽條件下與DNA分離。用于清潔目的的含DNA溶液中的引物、單核苷酸、酶、礦物油、鹽離子等雜質因為沒有與DNA相似的特性,所以被分離開來。實驗材料?PCR產物試劑、試劑盒?PCR清潔試劑盒儀器、耗材?96孔DNA制備板96孔深孔板96孔V型底板實驗
純化DNA實驗_基因組DNA的快速純化
試劑、試劑盒尾部緩沖液蛋白酶 K儀器、耗材離心管玻璃棒實驗步驟第 1 天1. 大約 1.5 cm 長的尾部活檢樣品放在一個 1.5 ml 盛有 0.7 ml 尾部緩沖液的小離心管中,加 35 ul 10 mg/ml 蛋白酶 K,在 55℃ 振搖溫育過夜。尾部緩沖液(配 25 ml)50 mmol/L
DNA純化實驗——DNA凝膠回收試劑盒純化法
DNA純化可用于:(1)獲得高純度的DNA;(2)濃縮DNA;(3)測序、遺傳信息分析等分子生物學應用。實驗方法原理本試劑盒適合從各種瓊脂糖凝膠中提取多至 8 μg DNA(70 bp-10 Kb),回收率為 60-85%。瓊脂糖凝膠在溫和的緩沖液(DE-A 溶液)中溶解,其中的保護劑能防止線狀 D
純化DNA實驗_純化質粒(堿裂解法)
實驗材料大腸桿菌試劑、試劑盒LB葡萄糖緩沖液乙酸鉀儀器、耗材離心管實驗步驟1. 單個大腸桿菌克隆接種到 2 ml 含適當抗生素的 LB 中。37℃ 劇烈振蕩孵育 5~8 小時。或者可以培養過夜使飽和。2. 倒 1.5 ml 培養液到已作標記的微量離心管中。把剩下的培養液存放在 4℃。3. 在微量離心
質粒DNA的去磷酸化實驗
實驗方法原理 去除 5' 端的磷酸基可防止質粒 DNA 的自身連接和環化。在體外連接反應中,DNA 連接酶可在鄰近的兩個分子間形成磷酸二酯鍵。但只有當一個分子的 5' 端帶有磷酸基另一分子的 3' 端帶有羥基時,這一反應才能完成。實驗材料 小牛腸堿性磷酸酶(CIP) 或