PeproTech細胞因子和重組蛋白溶解必讀（一）
我們知道，的所有細胞因子和蛋白均為凍干粉，這使得運輸非常便捷，只要常溫即可。而且，細胞因子和蛋白凍干粉非常穩定，在-20或-80℃條件下可保存數年。凍干粉在使用前需進行溶解，然后以液體形式加到培養體系或注射入動物體內。溶解步驟非常關鍵，因溶解不好會導致細胞因子或蛋白的失活，這也是很多用戶在實際使用中經常遇到的問題。 那么，應該如何進行正確的溶解呢？ 下面我們以Recombinant Human IL-4 (重組人IL-4，產品編號：200-04)的說明書為例，對細胞因子或蛋白的溶解方法進行詳細的闡述。 拿到重組人IL-4的說明書后，您會發現有一段關于Reconstitution(重懸)的敘述，這段內容含有溶解相關的所有信息。 1. ......閱讀全文
CIK/DCCIK及其在細胞治療上的應用（六）
四、ACTL 全稱“ AAV-DC-CTL靶向性抗腫瘤細胞免疫技術”，簡稱“ACTL?”或“ACTL技術”或“ACTL腫瘤細胞靶向治療”。 "ACTL? Anti-Cancer Cellular Immunotherapy"1. ACTL技術背景 2011年10月3日，加拿大科學家、美國醫學會和美國
重組蛋白和天然蛋白有什么區別
重組蛋白是通過基因工程重組而來的，而天然蛋白提取自動物組織。重組蛋白的活性和純度都比天然蛋白高，而且更易吸收，安全性也更好。
重組蛋白和天然蛋白有什么區別
重組蛋白一般用轉基因動物的乳腺產生，產生的重組蛋白作為生物制藥在醫學中作用顯著。利用基因工程技術，可以使哺乳動物本身變成“批量生產藥物的工廠”。方法是將藥用蛋白基因與乳腺蛋白基因的啟動子等調控組件重組在一起，通過顯微注射等方法，導入哺乳動物（哺乳動物才會泌乳）的受精卵中，然后，將受精卵送入母體內，使
RNA實驗和方案新手必讀（六）
一些樣本來源在其RNA或內含物方面存在著顯著不同，可能導致RNA的分離和分析過程出現問題。當操作這些樣本來源時需要一些特別注意事項。本節將針對大量不同樣本來源的操作進行探討。植物從植物材料中分離RNA會遇到一些特殊困難，常規技術在用于植物樣本之前一般要先經過條件優化。一些植物代謝產物的化學性質與核酸
RNA實驗和方案新手必讀（三）
核糖核酸酶（RNase）是非常穩定、活躍的酶，它們通常不需要輔因子就能發揮功能。由于核糖核酸酶難以失活，并且很小的量就足以破壞RNA分子，因此在沒有事先消除任何可能的核糖核酸酶污染的情況下，不要使用任何塑料或者玻璃器皿。處理RNA時應非常小心，以避免在純化的過程中或者純化之后，將核糖核酸酶無意的引入
RNA實驗和方案新手必讀（七）
在檢測RNA樣本時，需確保比色杯中去除了RNA酶，特別是在使用分光光度測定之后仍需回收這些RNA的情況下。該條件可通過使用0.1?M?NaOH，1mM?EDTA和不含RNase的水的順序洗滌來實現。使用稀釋RNA的緩沖液為分光光度計設定空白對照。???使用分光光度法測定RNA濃度在使用紫外通透的塑料
RNA實驗和方案新手必讀（八）
不同來源的核糖體RNA大小來源rRNA大小(kb)E.?coli16S?23S1.5?2.9S.?cerevisiae18S?26S2.0?3.8小鼠18S?28S1.9?4.7人18S?28S1.9?5.0RNA分析：分析凝膠變性凝膠分析的原理利用RNA在甲醛瓊脂糖凝膠中的電荷遷移效應，可對RNA
RNA實驗和方案新手必讀（五）
起始材料的有效破碎和勻漿對于所有總RNA分離操作來說都是必須的要求。破碎和勻漿是兩個獨立分開的步驟。破碎：對于組織結構、細胞壁和細胞質膜的徹底破碎對于釋放樣本中所有的RNA是絕對必要的。不同樣本需要使用不同的方法以達到徹底的破碎效果。不完全的破碎會導致RNA得率的顯著降低。勻漿：勻漿對于減少破碎后細
RNA實驗和方案新手必讀（四）
溶液（水或者其它溶液）應該使用0.1%的DEPC處理。DEPC是一種強大但非絕對的RNase抑制劑。濃度為0.1%的DEPC經常用于處理玻璃或者塑料耗材，以使其表面的RNase失活，或者制備不含RNase的的溶液和水。DEPC通過共價修飾使RNase失活。在100?ml要處理的溶液中加入0.1?ml
重組人BMP4重組蛋白和天然蛋白有什么區別
重組人BMP4蛋白分為凍干粉和溶液態兩種保存形式，原核細胞表達的重組蛋白為凍干粉狀態，真核細胞表達的重組蛋白為溶液態保存，這樣使得重組蛋白非常穩定，在 -80℃ 條件下可保存數年。凍干粉在使用前需進行溶解，其中溶解的方法非常關鍵，因為溶解不好會降低蛋白的效用。溶液態保存的重組蛋白在凍融稀釋使用過程
抗體和重組蛋白使用保存方法
無論是保存還是運輸，請避免反復凍融。反復凍融，冰晶會破壞抗體和重組蛋白的空間結構，導致蛋白變性形成多聚體和重組蛋白構象改變，從而降低抗體的結合能力，也加快了抗體球蛋白和重組蛋白的降解速度。抗體和重組蛋白保存得當與否，直接決定了抗體和重組蛋白的活性使用效果，如果保存得當，抗體和重組蛋白活性大部分都可以
關于干細胞因子的基因重組的介紹
SCF和其他細胞因子一起誘導干和祖細胞增生、延長其存活期及引起干和祖細胞動員。雖然SCF的受體在祖細胞無顯著不同，但SCF誘導紅系祖細胞增生比粒-單祖細胞強，可能是其他特異性因素影響祖細胞對SCF的反應性。給小鼠應用SCF和粒細胞集落刺激因子(G-CSF)，外周血干細胞和祖細胞第1天即達高峰，6
重組G蛋白偶聯受體的純化實驗（一）
一、引言天然的整合膜蛋白的量并不充足。因此對其的結構測定和功能分析需要:①重組膜蛋白的生產系統;②能分離得到有活性的膜蛋白（而不是沒有功能、折疊錯誤的膜蛋白）的純化策略。表達并純化原核和真核的膜蛋白在文獻中都有報道。讀者可以參考如Grisshammer 和Tate(1995;2003) 及Gri
選擇重組蛋白表達的合適方法（一）
一、引言選 擇 合 適 醜 組 蛋 白 表 達 方 法 對 于 能 否 及 時 獲 取 所 需 數 量 和 質 量 的 重z組蛋白非常關鍵。選 擇 了 錯 誤 的表達宿主可 能 導 致 蛋 白 質錯 誤 折 疊 或 低 量 表 達 . 缺 少 必要的翻譯后 修 飾或不適當的修飾 。選 擇 表
細胞破碎和蛋白質溶解實驗
勻漿法 超聲法 高壓勻漿法 研磨法 （高速）珠磨法 酶溶法 化學滲透法 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 通過固體剪切
細胞破碎和蛋白質溶解實驗
實驗方法原理 通過固體剪切力破碎組織和細胞，釋放蛋白進入溶液。市售的勻漿器主要有四類，刀片式組織破碎勻漿器、內切式組織勻漿器、玻璃勻漿器和用于規模生產的髙壓勻漿器。玻璃勻漿器的勻漿頭（杵）有玻璃制的，也有特夫隆制的，既可以手動也可以電動。由于勻漿過程中蛋白質被蛋白酶降解的可能性較小，所以勻漿是簡便、
DCCIK的制備方法（五）
【步驟簡圖】【推薦試劑】生產商產品名稱產品編號產品規格使用濃度PeproTech重組人 GM-CSF (Animal Free)AF-300-0320ug/50ug/100ug/250ug/500ug1mg50-100ng/mlPeproTech重組人 IFN-g (Animal Free)AF-3
纖維蛋白溶解的溶解機制
（1）纖溶酶原激活途徑：PLG可通過三條途徑被激活為PL，分別為內激活途徑、外激活途徑和外源激活途徑。 （2）纖維蛋白（原）降解機制：PL不僅降解纖維蛋白，而且可以降解纖維蛋白原。PL降解纖維蛋白原產生X片段、Y片段及D、E片段。降解纖維蛋白則產生x'、Y'、D-D、E'
你知道重組細胞因子的要求有哪些么
細胞因子(cytokine，CK)是免疫原、絲裂原或其他刺激劑誘導多種細胞產生的低分子量可溶性蛋白質，具有調節固有免疫和適應性免疫、血細胞生成、細胞生長、APSC多能細胞以及損傷組織修復等多種功能。細胞因子可被分為白細胞介素、干擾素、腫瘤壞死因子超家族、集落刺激因子、趨化因子、生長因子等。? 下
人用重組DNA蛋白制品提取和純化
制品的提取、純化主要依賴于各種蛋白質分離技術。采用的分離純化方法或技術，應能適用于規模化生產并保持穩定。應對純化工藝中可能殘存的有害物質進行嚴格檢測，這些組分包括固定相或者流動相中的化學試劑、各類親和色譜柱的脫落抗體或配基以及可能對目標制品關鍵質量屬性造成影響的各種物質等。 采用細胞培養或酵母
細胞因子溶解操作方法及注意事項
1．離心：高速離心 (10, 000 rpm) 20-30 秒，或低速離心 (2, 000 rpm) 5 分鐘。2．溶解（Reconstitution）：用去離子水或其它緩沖液（根據說明書要求進行選擇）溶解至說明書要求的濃度 (一般為 0.1-1.0 mg/mL，如10ug的產品，需用10uL-10
纖維蛋白溶解系統的纖維蛋白溶解機制
（1）纖溶酶原激活途徑：PLG可通過三條途徑被激活為PL，分別為內激活途徑、外激活途徑和外源激活途徑。（2）纖維蛋白（原）降解機制：PL不僅降解纖維蛋白，而且可以降解纖維蛋白原。PL降解纖維蛋白原產生X片段、Y片段及D、E片段。降解纖維蛋白則產生x'、Y'、D-D、E'片段。
纖維蛋白溶解系統的組成和功能
? 纖維蛋白溶解系統（簡稱纖溶系統），是指纖溶酶原被特異牲激活物轉化為纖溶酶（PL），纖溶酶降解纖維蛋白的過程。這一系統的主要功能是將沉積在血管內外的纖維蛋白溶解而保持血管暢通，防止血栓形成或使已形成的血栓溶解，血流復通。1）纖溶酶原：在組織型纖溶酶原激活物和尿激酶型纖溶酶原激活物的作用下，激活成纖
基因重組和DNA重組區別
基因重組是由于不同DNA鏈的斷裂和連接而產生DNA片段的交換和重新組合，形成新DNA分子的過程。 在人類的生殖細胞中發現的46條染色體發生在生物體內基因的交換或重新組合。基因重組是生物遺傳變異的一種機制，包括同源重組、位點特異重組、轉座作用和異常重組四大類。DNA重組指DNA分子內或分子間發生的遺傳
immunofluorescence－of－general－cell－by－Peprotech
實驗概要The following protocol provides a method of immunofluorescence of general cell by Peprotech.實驗步驟Please refer to the antibody Product Information S
immunofluorescence－of－general－PBMC－by－Peprotech
實驗概要The following protocol provides a method of immunofluorescence of general PBMC by Peprotech.實驗步驟The following protocol used human PBMC that were
包涵體蛋白溶解后的重折疊實驗（一）
一、常規操作方案下面這個典型流程對許多蛋白質都有很好的效果。本 操 作 方 案 是 根 據 N g u y e n 等(1993)首先開發的方案改編而成，并用于冷泉港蛋白質純化與鑒定課程的不溶性重組蛋白純化部分（Burgess and K n u t h ， 1996)。其他類似的流程也
纖維蛋白溶解系統的溶解機制
（1）纖溶酶原激活途徑：PLG可通過三條途徑被激活為PL，分別為內激活途徑、外激活途徑和外源激活途徑。 （2）纖維蛋白（原）降解機制：PL不僅降解纖維蛋白，而且可以降解纖維蛋白原。PL降解纖維蛋白原產生X片段、Y片段及D、E片段。降解纖維蛋白則產生x'、Y'、D-D、E'
纖維蛋白溶解
是指由于某些原因，纖溶酶原被激活為纖溶酶或纖溶酶抑制物減少引起高纖溶酶血癥，繼后降解纖維蛋白原水解其他血漿凝血因子，造成以低纖維蛋白原血癥為主的低凝狀態，臨床表現為各種部位的嚴重出血。 簡稱纖溶。作用于纖維蛋白原或纖維蛋白，能將其多肽鏈的賴氨酸結合部位切斷使之溶解的現象。由此產生的分解產物為F
重組蛋白質的途徑和應用介紹
其獲得途徑可以分為體外方法和體內方法。兩種方法的前提都是應用基因重組技術，獲得連接有可以翻譯成目的蛋白的基因片段的重組載體，之后將其轉入可以表達目的蛋白的宿主細胞從而表達特定的重組蛋白分子。當前主要應用的重組蛋白的表達載體包括原核細胞如大腸桿菌、真核細胞如酵母、昆蟲細胞以及CHO細胞等，重組蛋白的產