細胞的來源多樣,培養方法也各不相同,凡是來源于胚胎、組織器官及外周血,經特殊分離方法制備而來的原初培養的細胞稱之為原代細胞。原代細胞經分散接種之手段稱為傳代。凡能經傳代方式進行再次培養的細胞稱為傳代細胞。若能穩定生長傳至10~20代以上的細胞可確立為細胞系。若有條件能開展單細胞克隆、純化,經大量擴增后所形成的生物學特性穩定的克隆化細胞群,稱之為細胞株或克隆細胞。此過程稱為細胞的純化或細胞克隆。這些基本技術是從事細胞培養工作的基礎,只有熟悉和掌握了基本技術,才可能更快捷地學習和掌握其他方法,本章重點敘述常用的基本技術。 原代細胞的取材人和動物細胞的取材是原代細胞培養成功的首要條件,是進行細胞培養的第一步,若取材不當,將會直接影響細胞的體外培養,現將取材的基本要求和注意事項敘述如下:一、取材的基本要求 (1)取材要注意新鮮和保鮮 新鮮組織易于培養成功,取材時應盡量在4~6h內能制作成細胞,盡快入箱培養,若不能即時培養,應將......閱讀全文
實驗概要細胞培養是指從體內組織取出細胞摹擬體內出現環境,在無菌、適當溫度及酸堿度和一定營養條件下,使期生長繁殖,并維持其結構和功能的一種培養技術。細胞培養的培養物為單個細胞或細胞群。主要設備細胞培養設施和基本條件 1、實驗室設計 細胞培養是一種無菌操作技術,要求工作環境和條件必須保證無微生物污染
現代生物技術一般認為包括基因工程技術、細胞工程技術、酶工程技術和發酵工程技術,而這些技術的發展幾乎都與細胞培養有密切關系,特別是在醫藥領域的發展,細胞培養更具有特殊的作用和價值。比如基因工程藥物或疫苗在研究生產過程中很多是通過細胞培養來實現的。基因工程乙肝疫苗很多是以CHO細胞作為載體;細胞工程中更
細胞的來源多樣,培養方法也各不相同,凡是來源于胚胎、組織器官及外周血,經特殊分離方法制備而來的原初培養的細胞稱之為原代細胞。原代細胞經分散接種之手段稱為傳代。凡能經傳代方式進行再次培養的細胞稱為傳代細胞。若能穩定生長傳至10~20代以上的細胞可確立為細胞系。若有條件能開展單細胞克隆、純化,經大量擴增
體內組織細胞在體外培養時,所需培養環境基本相似,但由于物種、個體遺傳背景及所處發育階段等的不同,各自要求條件有一定差別,所采取的培養技術措施亦不盡相同,現介紹個別組織細胞培養的要點如下:一、上皮細胞培養上皮細胞包括腺上皮是很多器官如肝、胰、乳腺等的功能成分,又由于癌起源于上皮組織,故上皮細胞培養特別
一、細胞培養基本概念細胞培養是指從體內組織取出細胞摹擬體內出現環境,在無菌、適當溫度及酸堿度和一定營養條件下,使期生長繁殖,并維持其結構和功能的一種培養技術。 細胞培養 的培養物為單個細胞或細胞群。在醫學遺傳學研究中應用最廣泛的是外周血淋巴細胞、皮膚或纖維細胞和各種能在體外長期生長的細胞系。外周血淋
原代細胞的培養與建系 細胞的來源多樣,培養方法也各不相同,凡是來源于胚胎、組織器官及外周血,經特殊分離
第一章 細胞培養的基本原理與技術現代生物技術一般認為包括基因工程技術、細胞工程技術、酶工程技術和發酵工程技術,而這些技術的發展幾乎都與細胞培養有密切關系,特別是在醫藥領域的發展,細胞培養更具有特殊的作用和價值。比如基因工程藥物或疫苗在研究生產過程中很多是通過細胞培養來實現的。基因工程乙肝疫苗很多是以
原代培養:即第一次培養,是指將培養物放置在體外生長環境中持續培養,中途不分割培養物的培養過程。有幾方面含義: ●培養物一經接種到培養器皿(瓶)中就不在分割,任其生長繁殖; ●原代培養中的“代”并非細胞的“代”數,因為培養過程中細胞經多次分裂已經產生多代子細胞; ●原代培養過程
(一)細胞培養實驗室的設置 組織細胞培養技術與其他一般實驗室工作的主要區別在于要求保持無菌操作,避免微生物及其他有害因素的影響。目前,超凈工作臺的廣泛使用,很大程度上方便了組織細胞培養工作,并使一些常規實驗室有可能用于進行細胞培養。 &n
A 原代細胞分離技術 取人或動物體內(或胚胎)的組織,將其剪碎至1mm3的組織塊,再采用的如下方法進行分離培養: 一、懸浮細胞的分離方法 1、將血液、羊水、胸水或腹水等懸液直接轉至離心管中,1000rpm/分鐘離心5分鐘。 2、去掉上清,離心沉淀用無鈣、鎂的PBS
(一)細胞培養實驗室的設置 組織細胞培養技術與其他一般實驗室工作的主要區別在于要求保持無菌操作,避免微生物及其他有害因素的影響。目前超凈工作臺的廣泛使用,很大程度上方便了組織細胞培養工作,并使一些常規實驗室有可能用于進行細胞培養。 細胞培養實驗室應能進行六方面的工作:無菌操作、孵
對于大部分科研人員來說,研究中一般用到均是現成的細胞系/株,我們只需要:進行細胞傳代和保種。然而,這些細胞系常常由于體外長期培養,而丟失原有生物學特性,對藥物處理的反應差距越來越大。因此,原代細胞的地位日漸凸顯,Paper中若有了原代細胞的數據都會添色不少。然而,就小編親生經歷,原代細胞分離著實
要想達到細胞培養用水的水質要求,純水機的配置非常關鍵,帶有消毒模塊的純水水箱、終端過濾器、取水水質的實時監測等配置都關系著產水水質是否達標。純水的儲存對保持純水的質量是至關重要的,由于周圍環境和空氣中的二氧化碳更容易使水污染改變其pH,所以儲存水的容器要盡量密封,避免和外界過多接觸,抑制微生物生長。
2 結果2.1 體外培養的胎兒臍動脈血管平滑肌細胞的形態觀察 實驗中觀察到臍動脈組織塊貼壁后5~7d可見有細胞以垂直方向從組織塊周圍游走出來(見圖1),但并不是所有的組織塊周圍都有細胞游出,離組織塊較遠的區域也可以看到細胞,此為平滑肌細胞的漂移性生長特性(見圖2),細胞形態多樣,大小不一,多為長梭形
終端濾器可用于去除純水中特定類型的污染物,滿足不同實驗的應用需求。對于細胞體外培養可以選用RephiBio Filter 純水終端過濾器,安裝在樂楓超純水系統的出水口,可有效去除水中的熱原(內毒素)、核酸酶、細菌等雜質,制備符合細胞培養用水要求的超純水(無熱原、無DNase、無RNase、無菌)。&
(二)人類淋巴母細胞建株方法1、4ml肝素抗凝血于離心管中,加入2ml RPMI 1640。 2、混勻后沿管壁緩慢加到預置有4ml淋巴細胞分離液的液面上靜置30min。 3、1500rpm,15min,吸取白細胞層(第二層)于另一離心管中。 4、加RPMI 1640 5ml洗滌白細胞兩次。
清華大學醫學中心細胞治療研究所所長張明徽沒有想到,他研制的NKT細胞免疫治療新技術的第一個志愿者是他學生的父親,并且療效出人意料。 “2010年,我的學生的父親到了肝癌晚期,在北京腫瘤醫院手術后仍然有殘留癌沒法清除干凈,一個月后又出現了明顯的肺部轉移病灶,也沒有有效的后續治療方法可用,這種情況
體內組織細胞在體外培養時,所需培養環境基本相似,但由于物種、個體遺傳背景及所處發育階段等的不同,各自要求條件有一定差別,所采取的培養技術措施亦不盡相同,現介紹個別組織細胞培養的要點如下:一、上皮細胞培養上皮細胞包括腺上皮是很多器官如肝、胰、乳腺等的功能成分,又由于癌起源于上皮組織,故上皮細胞培養特別
細胞培養實驗室組建的基本要求: 1、細胞培養是一種無菌操作技術,要求工作環境和條件必須保證無微生物污染和不受其它有害因素的影響。 2、細胞培養室和設計原則是防止微生物污染和有害因素影響,要求工作環境清潔、空氣清新,干燥和無煙塵。 3、細胞培養室的設計原則一般是無菌操作區設在室內
細胞培養實驗室組建的基本要求: 1、細胞培養是一種無菌操作技術,要求工作環境和條件必須保證無微生物污染和不受其它有害因素的影響。 2、細胞培養室和設計原則是防止微生物污染和有害因素影響,要求工作環境清潔、空氣清新,干燥和無煙塵。 3、細胞培養室的設計原則一般是無菌操作區設在室內
細胞培養實驗室組建的基本要求: 1、細胞培養是一種無菌操作技術,要求工作環境和條件必須保證無微生物污染和不受其它有害因素的影響。 2、細胞培養室和設計原則是防止微生物污染和有害因素影響,要求工作環境清潔、空氣清新,干燥和無煙塵。 3、細胞培養室的設計原則一般是無菌操作區設在室內
細胞培養實驗室組建的基本要求:1、細胞培養是一種無菌操作技術,要求工作環境和條件必須保證無微生物污染和不受其它有害因素的影響。2、細胞培養室和設計原則是防止微生物污染和有害因素影響,要求工作環境清潔、空氣清新,干燥和無煙塵。3、細胞培養室的設計原則一般是無菌操作區設在室內較少走動的內側,常規操作和封
細胞培養技術細胞周期的測定一、原理細胞周期指細胞一個世代所經歷的時間。從一次細胞分裂結束到下一次分裂結束為一個周期。細胞周期反應了細胞增殖速度。 單個細胞的周期測定可采用縮時攝影的方法,但它不能代表細胞群體的周期,故現多采用其他方法測群體周期。 測定細胞周期的方法很多,有同位素標記法、細胞計數法
細胞培養實驗室組建的基本要求:1、細胞培養是一種無菌操作技術,要求工作環境和條件必須保證無微生物污染和不受其它有害因素的影響。2、細胞培養室和設計原則是防止微生物污染和有害因素影響,要求工作環境清潔、空氣清新,干燥和無煙塵。3、細胞培養室的設計原則一般是無菌操作區設在室內較少走動的內側,常規操作和封
細胞培養實驗室組建的基本要求:1、細胞培養是一種無菌操作技術,要求工作環境和條件必須保證無微生物污染和不受其它有害因素的影響。2、細胞培養室和設計原則是防止微生物污染和有害因素影響,要求工作環境清潔、空氣清新,干燥和無煙塵。3、細胞培養室的設計原則一般是無菌操作區設在室內較少走動的內側,常規操作和封
三、原代細胞的培養方法原代細胞的培養也叫初代培養 是從供體取得組織細胞在體外進行的首次培養,是建立細胞系的第一步,是一項基本技術。原代細胞因剛從組織中分離開,生物學特性未發生很大變化,仍保留原來的遺傳特性,也最接近和反映體內生長特性,適宜用于藥物敏感性試驗、細胞分化等實驗研究。原代細胞往往有多種細胞
電鏡樣品取材方法 1 動物及人體組織的取材 動物組織的取材,應在麻醉(1%戊巴比妥鈉按5ml/kg體重腹腔注射)或斷頭急性處死,解剖出所需器官,用解剖剪刀剪取一小塊組織,放在干凈的紙板上,滴一滴冷卻的固定液,用新的、無油污鋒利的(雙面)刀片將材料切成大約1㎜寬,2~3㎜長的小塊,從中挑選損傷小的小條
各種已被命名和經過細胞生物學鑒定的細胞系或細胞株,都是一些形態比較均一、生長增殖比較穩定的和生物性狀清楚的細胞群。因此凡符合上述情況的細胞群也可給以相應的名稱,即文獻中常稱之為已鑒定的細胞(Certified Cells)。已鑒定的細胞可用于各種實驗研究和生產生物制品。當前世界上已建的各種細胞系(株
一、概念1、細胞系(Cell Line):原代培養舞經首次傳代成功即成細胞系,由原先存在于原代培養物中的細胞世系(Lineage of Cells)所組成。2、細胞株(Cell Strain):通過選擇法或克隆形成法從原代培養物或細胞系中獲得具有特殊性質或標志物稱為細胞株。細胞株的特殊性質或標志
實驗方法原理 原代培養是指由體內取出組織或細胞進行的首次培養,也叫初代培養。原代培養離體時間短,遺傳性狀和體內細胞相似,適于做細胞形態、功能和分化等研究。較為嚴格地說是指成功傳代之前