細菌人工染色體的應用
實驗方法原理 細菌人工染色體（bacterial artificial chromosome, RAC ) 是以大腸桿菌致育因子 (fertility, F)為基礎的合成載體。實驗材料 限制性內切核酸酶大腸桿菌培養物電轉感受態大腸桿菌細胞試劑、試劑盒 LB 冷凍緩沖液儀器、耗材 脈沖場凝膠電泳儀LB 瓊脂平板LB 培養基電穿孔儀實驗步驟 一、材料1. 緩沖液與溶液LB 冷凍緩沖液2. 酶與緩沖液限制性內切核酸酶3. 凝膠脈沖場凝膠電泳儀4. 培養基含 12.5 μg/ml 氯霉素的 LB 瓊脂平板含 12.5 μg/ml 氯霉素的 LB 培養基5. 專用設備電穿孔儀6. 載體與菌株BAC DNA 或 BAC 分離物轉化的大腸桿菌培養物冷凍的電轉感受態大腸桿菌細胞二、方法1. 制備新鮮的 BAC 轉化子。(1) 如果 BAC 是以 DNA 的形式提供的① 用電穿孔法將 BAC DNA 導入大腸桿菌（DH10B 菌株）中。② 從每批......閱讀全文
細菌人工染色體的應用
實驗方法原理 細菌人工染色體（bacterial artificial chromosome, RAC ) 是以大腸桿菌致育因子 (fertility, F)為基礎的合成載體。實驗材料 限制性內切核酸酶大腸桿菌培養物電轉感受態大腸桿菌細胞試劑、試劑盒 LB 冷凍緩沖液儀器、耗材 脈沖場凝膠電泳儀LB
細菌人工染色體的應用
細菌人工染色體（bacterial artificial chromosome, RAC ) 是以大腸桿菌致育因子 (fertility, F)為基礎的合成載體。本實驗來源「分子克隆實驗指南第三版」黃培堂等譯。實驗方法原理細菌人工染色體（bacterial artificial chromosome
細菌人工染色體的應用
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 細菌人工染色體（bacterial artificial chromosome, RAC ) 是以大腸桿菌致育因子 (fertility, F)為基礎的合成載體。 實驗材料
細菌人工染色體
The Construction of Bacterial Artificial Chromosome (BAC) Libraries (complete manuscript)?(Clemson University Genomics Institute)??Construction of BAC
細菌人工染色體的概念
細菌人工染色體（Bacterial artificial chromosome，BAC）是指一種以F質粒（F-plasmid）為基礎建構而成的細菌染色體克隆載體，常用來克隆150kb左右大小的DNA片段，最多可保存300kb個堿基對。
細菌人工染色體的特點
細菌人工染色體（Bacterial artificial chromosome，BAC）是指一種以F質粒（F-plasmid）為基礎建構而成的細菌染色體克隆載體，常用來克隆150kb左右大小的DNA片段，最多可保存300kb個堿基對。
酵母人工染色體的應用
實驗方法原理 直到 20 世紀 80 年代中期，尚無技術可用于基因組 DNA 黏性大片段的分離、擴增和分析。在此之前，如果要對某一 DNA 片段進行詳細的物理和功能研究，該 DNA 的長度應能夠裝入 λ 噬菌體顆粒或黏粒載體。實驗材料 釀酒酵母試劑、試劑盒 甘油儀器、耗材 脈沖場凝膠電泳儀選擇性培養
酵母人工染色體的應用
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 直到 20 世紀 80 年代中期，尚無技術可用于基因組 DNA 黏性大片段的分離、擴增和分析。在此之前，如果要對某一 DNA 片段進行詳細的物理和功能研究，該 DNA 的長度應能夠裝入 λ 噬菌體顆粒或黏粒載體。
酵母人工染色體的應用
直到 20 世紀 80 年代中期，尚無技術可用于基因組 DNA 黏性大片段的分離、擴增和分析。在此之前，如果要對某一 DNA 片段進行詳細的物理和功能研究，該 DNA 的長度應能夠裝入 λ 噬菌體顆粒或黏粒載體。本實驗來源「分子克隆實驗指南第三版」黃培堂等譯。實驗方法原理直到 20 世紀 80 年代
酵母人工染色體
·?????????Easy YAC Preparation Method?(Andrew Davies,Shaw lab)·?????????Screening YAC libraries?(Donis Keller Lab)This is a method for screening YAC l
人工培養細菌的意義
（一）在醫學中的應用 1.細菌的鑒定和研究：對細菌進行鑒定，研究其形態、生理、抗原結構、致病性、遺傳與變異等生物學性狀，均需人工培養細菌才能實現。 2.細菌性疾病的診斷和治療：細菌感染引起的疾病，常須從患者體內分離出病原菌才能確診。同時對分離出的病原菌作藥物敏感試驗，幫助臨床選擇有效的藥物進行
人工微型染色體的概念
中文名稱人工微型染色體英文名稱artificial minichromosome定 義將真核細胞的DNA復制起點、著絲粒和端粒三種關鍵性DNA序列互相搭配，人工組裝成的小染色體。應用學科細胞生物學（一級學科），細胞培養與細胞工程（二級學科）
酵母人工染色體的簡介
酵母人工染色體（Yeast artificial chromosomes,簡稱YAC）,是一種能夠克隆長達400Kb的DNA片段的載體,含有酵母細胞中必需的端粒、著絲點和復制起始序列,是細胞內具有遺傳性質的物體,易被堿性染料染成深色,所以叫染色體（染色質）。其本質是脫氧核苷酸,是細胞核內由核蛋白
細菌的人工培養
人工制備營養充足的培養基并提供適宜的溫度、氣體、pH等培養條件，即能使細菌 ?在體外環境迅速生長繁殖。細菌培養對臨床上病原菌的分離鑒定、制備抗生素、制備疫苗等生物制品都是必不可少的。 一、培養基的制備原則： 1、必須有充足的營養。 2、合適的酸堿度。 3、絕對無菌。 二、培養基的制備 培
酵母人工染色體的工作原理
YAC 載體主要是用來構建大片段 DNA 文庫，特別用來構建高等真核生物的基因組文庫，并不用作常規的基因克隆。圖3-26是 pYAC4 的遺傳結構圖，當用BamHⅠ切割成線狀后，就形成了一個微型酵母染色體，包含染色體復制的必要順式元件，如自主復制序列、著絲粒和位于兩端的端粒。這些元件在酵母菌中可以驅
酵母人工染色體的標記方法
YAC 載體的選擇標記主要采用營養缺陷型基因，如色氨酸、亮氨酸和組氨酸合成缺陷型基因 trp 1、 leu 2和 his 3、尿嘧啶合成缺陷型基因 ura3 等，以及赭石突變抑制基因 sup4 。與 YAC 載體配套工作的宿主酵母菌（如AB1380）的胸腺嘧啶合成基因帶有一個赭石突變ade 2-1。
酵母人工染色體的工作原理
YAC 載體主要是用來構建大片段 DNA 文庫，特別用來構建高等真核生物的基因組文庫，并不用作常規的基因克隆。當用BamHⅠ切割成線狀后，就形成了一個微型酵母染色體，包含染色體復制的必要順式元件，如自主復制序列、著絲粒和位于兩端的端粒。這些元件在酵母菌中可以驅動染色體的復制和分配，從而決定這個微型染
用于分子細胞遺傳學的人工細菌染色體資源庫實驗
試劑、試劑盒TB 培養基RNase 溶液DNA 提取試劑盒苯酚瓊脂糖細胞培養基Hank 平衡鹽溶液胸腺嘧啶秋水仙胺低滲溶液儀器、耗材熒光顯微鏡冷CCD照相系統相差顯微鏡玻片電熱板分光光度計水浴搖床恒溫培養箱冰凍載玻片實驗步驟展開
酵母人工染色體的概念和本質
酵母人工染色體（Yeast artificial chromosomes，簡稱YAC），是一種能夠克隆長達400Kb的DNA片段的載體，含有酵母細胞中必需的端粒、著絲點和復制起始序列，是細胞內具有遺傳性質的物體，易被堿性染料染成深色，所以叫染色體（染色質）。其本質是脫氧核苷酸，是細胞核內由核蛋白組成
哺乳動物人工染色體的定義
中文名稱哺乳動物人工染色體英文名稱mammalian artificial chromosome;MAC定 義包含哺乳動物或人類大片段DNA或染色體的具有復制起點、端粒和著絲粒功能元件的人工染色體，導入細胞以單拷貝存在，但不整合到基因組中。應用學科細胞生物學（一級學科），細胞培養與細胞工程（二級學
關于人工染色體克隆載體的介紹
人工染色體克隆載體實際上是一種穿梭克隆載體,含有質粒克隆載體所必備的第一受體(大腸桿菌)源質粒復制起始位點,還含有第二受體(如酵母菌)染色體DNA著絲點、端粒和復制起始位點的序列,以及合適的選擇標記基因。這樣的克隆載體在第一受體細胞內可以按質粒復制形式進行高拷貝復制,在體外與目的DNA片段重組后
簡述酵母人工染色體的工作原理
YAC 載體主要是用來構建大片段 DNA 文庫,特別用來構建高等真核生物的基因組文庫,并不用作常規的基因克隆。圖3-26是 pYAC4 的遺傳結構圖,當用BamHⅠ切割成線狀后,就形成了一個微型酵母染色體,包含染色體復制的必要順式元件,如自主復制序列、著絲粒和位于兩端的端粒。這些元件在酵母菌中可
酵母人工染色體標記基因的介紹
在 YAC載體中最常用的是 pYAC4 。由于酵母的染色體是線狀的,因此其在工作狀態也是線狀的。但是,為了方便制備YAC載體, YAC 載體以環狀的方式存在,并增加了普通大腸桿菌質粒載體的復制元件和選擇標記,以便保存和增殖。 1、復制元件 YAC 載體的復制元件是其核心組成成分,其在酵母中復
酵母人工染色體的結構特征和本質
酵母人工染色體（Yeast artificial chromosomes，簡稱YAC），是一種能夠克隆長達400Kb的DNA片段的載體，含有酵母細胞中必需的端粒、著絲點和復制起始序列，是細胞內具有遺傳性質的物體，易被堿性染料染成深色，所以叫染色體（染色質）。其本質是脫氧核苷酸，是細胞核內由核蛋白組成
細菌的人工培養程序及常用的人工培養方法
? 細菌的人工培養程序為：?????????? ?標本（估計菌量少的標本，先增菌培養）??????? →根據培養目的，接種于適當的培養基??????? →適宜的培養環境，35℃~37℃，18~24h??????? →觀察細菌的生長情況，選擇可疑菌落進行分離、鑒定。??????? 根據對氣體的需求，細
細菌的人工培養程序及常用的人工培養方法
細菌的人工培養程序為：標本（估計菌量少的標本，先增菌培養） →根據培養目的，接種于適當的培養基 →適宜的培養環境，35℃~37℃，18~24h →觀察細菌的生長情況，選擇可疑菌落進行分離、鑒定。根據對氣體的需求，細菌的人工培養方法可分
染色體畸變的應用
染色體結構或數目的改變，可自發產生或誘發產生。染色體畸變一般指染色體的 較大范圍的結構改變，在光學顯微鏡下可以識別。原核生物中的染色體結構改變雖然在光學顯微鏡下不能分辨，可是在電子顯微鏡下卻能看到和真核生物相似的畸變雜合體圖像。染色體畸變的研究可以用來揭示染色體結構改變的規律和機制；可以用來繪制細胞
真黃金打造的人工雜種細菌
經過特殊處理的熱醋穆爾氏菌（Moorella thermoacetica，M. thermoacetica）通過人工光合作用能更有效地生產太陽能燃料。 在化學學院教授Peidong Yang的領導下，M. thermoacetica作為第一個進行人工光合作用的非光敏細菌首次登場。 細菌膜表面
細菌的人工培養――培養基
培養基是人工配制的適合于細菌生長繁殖的營養基質。培養基按其理化性狀可分為液體、半固體和固體三大類。液體培養基可供細菌增菌及鑒定使用；在液體培養基中加入0.2%～0.5%的瓊脂即成為半固體培養基，可用于細菌動力的觀察及保存菌種；如瓊脂量為2%～3%時，即為固體培養基，可供細菌的分離培養、保存菌種等使
P1人工染色體的定義
中文名稱P1人工染色體英文名稱P1 artificial chromosome;PAC定 義利用P1噬菌體基因組元件所構建的大片段DNA克隆系統。應用學科生物化學與分子生物學（一級學科），方法與技術（二級學科）