隨機引物法(在融化瓊脂糖存在下利用隨機寡核苷酸延伸進行DNA的放射標記)實驗方法原理 此法系可用于從低熔點瓊脂糖凝膠中回收 DNA 的放射性標記 ( Feinberg 和 Vogelstein 1983,1984)。實驗材料 大腸桿菌 DNA 聚合酶Ⅰ Klenow 片段模板 DNA試劑、試劑盒 醋酸氨牛血清白蛋白乙醇溴化乙啶NA 終止 貯存緩沖液隨機引物緩沖液儀器、耗材 堿性瓊脂糖凝膠或變性聚丙烯酰胺凝膠沸水浴Sephadex G-50 離心柱實驗步驟 一、材料1. 緩沖液和溶液醋酸氨(10 mol/L)牛血清白蛋白(10 mg/ml)乙醇溴化乙啶(10 mg/ml)或 SYBR Gold 染液NA 終止/貯存緩沖液(50 mmol/L Tris-Cl (pH 7.5),50 mmol/L NaCl,5 mmol/L EDTA (pH8.0),0.5% (m/V) SDS)5X 隨機引物緩沖液(250 mmol/L Tri......閱讀全文
M13 噬菌體衣殼蛋白改造在改良噬菌體展示技術中的應用實驗實驗材料 羧芐青霉素氯霉素大腸桿菌 CJ236試劑、試劑盒 生理磷酸緩沖液超純甘油PBS-T 緩沖液PBS-T-BSA 緩沖液儀器、耗材 2YT 培養基SOC 培養基實驗步驟 下述方法描述了 P8 庫的設計(見 12.3.1)、構建(見
本章描述了改進融合蛋白在 M13 噬菌體顆粒表面展示水平的一個方法。向 M13 衣殼錨定蛋白引入突變后,蛋白質展示水平約能增加兩個數量級。本實驗來源「現代蛋白質工程實驗指南」〔德〕K.M.阿恩特、K.M.米勒編著。實驗材料羧芐青霉素氯霉素大腸桿菌 CJ236試劑、試劑盒生理磷酸緩沖液超純甘油PBS-