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    小量細菌克隆的雜交法篩選實驗

    實驗方法原理 主瓊脂板上和覆蓋于另一塊瓊脂板表面的硝酸纖維濾膜或尼龍膜上的細菌克隆可以被定位, 經過一段時間,已經在濾膜上生長的克隆可以被原位裂解以備雜交之用。同時,主瓊脂板可置于 4℃ 保存,直到篩選的結果出來為止。實驗材料 E.coli試劑、試劑盒 LB 或 SOB 瓊脂板儀器、耗材 硝酸纖維素膜注射器針頭防水黑色墨汁木制牙簽或接種環實驗步驟 一、材料1. 培養基含有適當抗菌素的 LB 或 SOB 瓊脂板。含有氯霉素的 LB 或 SOB 瓊脂板。2. 專用設備(1) 硝酸纖維素膜(Millipore HAWP,或類似產品)或尼龍膜。濾膜不必是無去污劑污染或無菌。(2) 注射器(3cc ),針頭(18 號)和防水黑色墨汁(India 墨汁)以上材料用于標記濾膜在主瓊脂板上的方向。(3) 木制牙簽或接種環。3. 載體和菌種E.coli,用于重組質粒轉化。E.coli,用于非重組質粒轉化(如 pUC,作為陰性對照)。二、方法1. ......閱讀全文

    小量細菌克隆的雜交法篩選實驗

    實驗方法原理 主瓊脂板上和覆蓋于另一塊瓊脂板表面的硝酸纖維濾膜或尼龍膜上的細菌克隆可以被定位, 經過一段時間,已經在濾膜上生長的克隆可以被原位裂解以備雜交之用。同時,主瓊脂板可置于 4℃ 保存,直到篩選的結果出來為止。實驗材料 E.coli試劑、試劑盒 LB 或 SOB 瓊脂板儀器、耗材 硝酸纖維素

    小量細菌克隆的雜交法篩選實驗

    ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 主瓊脂板上和覆蓋于另一塊瓊脂板表面的硝酸纖維濾膜或尼龍膜上的細菌克隆可以被定位, 經過一段時間,已經在濾膜上生長的克隆可以被原位裂解以備雜交之用。同時,主瓊脂板可置于 4℃ 保存,直到篩選的結果出來為止。

    小量細菌克隆的雜交法篩選實驗步驟

    小量細菌克隆的雜交法篩選實驗步驟,一、材料1. 培養基含有適當抗菌素的 LB 或 SOB 瓊脂板。含有氯霉素的 LB 或 SOB 瓊脂板。2. 專用設備(1) 硝酸纖維素膜(Millipore HAWP,或類似產品)或尼龍膜。濾膜不必是無去污劑污染或無菌。(2) 注射器(3cc ),針頭(18 號)

    大量細菌克隆的雜交方法篩選實驗

    這一方法由 Hanahan 和 Meselson (1980, 1983)報道,主要用來處理由質粒 cDNA 文庫轉化的細菌。將轉化菌的混合物或者一份擴增的 cDNA 文庫直接置于不含洗滌劑的硝酸纖維素膜或尼龍膜上,復制膜用膜-膜接觸的方法制備。本實驗來源「分子克隆實驗指南第三版」黃培堂等譯。實驗方

    大量細菌克隆的雜交方法篩選實驗

    ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 這一方法由 Hanahan 和 Meselson (1980, 1983)報道,主要用來處理由質粒 cDNA 文庫轉化的細菌。將轉化菌的混合物或者一份擴增的 cDNA 文庫直接置于不含洗滌劑的硝酸纖維素膜或尼龍膜上,復制

    大量細菌克隆的雜交方法篩選實驗

    實驗方法原理 這一方法由 Hanahan 和 Meselson (1980, 1983)報道,主要用來處理由質粒 cDNA 文庫轉化的細菌。將轉化菌的混合物或者一份擴增的 cDNA 文庫直接置于不含洗滌劑的硝酸纖維素膜或尼龍膜上,復制膜用膜-膜接觸的方法制備。采用這一方法,每塊 150

    中等量細胞克隆的雜交法篩選實驗

    ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 這一方法適用于任何大小的細菌克隆,但小的克隆可以給出最清楚的結果。小克隆可以產生尖銳的雜交信號,而且在克隆從瓊脂板轉到膜的過程中不會彌散。操作中 采用能夠包含 2500 克隆的 90 mm 板效果最好。在保證

    中等量細胞克隆的雜交法篩選實驗

    這一方法適用于任何大小的細菌克隆,但小的克隆可以給出最清楚的結果。小克隆可以產生尖銳的雜交信號,而且在克隆從瓊脂板轉到膜的過程中不會彌散。操作中采用能夠包含 2500 克隆的 90 mm 板效果最好。在保證沒有氣泡的情況下,用更大的濾膜很難正好覆蓋于 150 mm 板。本實驗來源「分子克隆實驗指南第

    中等量細胞克隆的雜交法篩選實驗

    實驗方法原理 這一方法適用于任何大小的細菌克隆,但小的克隆可以給出最清楚的結果。小克隆可以產生尖銳的雜交信號,而且在克隆從瓊脂板轉到膜的過程中不會彌散。操作中 采用能夠包含 2500 克隆的 90 mm 板效果最好。在保證沒有氣泡的情況下,用更大的濾膜很難正好覆蓋于 150 mm 板。實驗材料

    細菌質粒 DNA 的小量制備實驗

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