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    RNA蛋白復合物中寡核苷酸靶向的RNaseH切割保護實驗

    實驗方法原理 寡核苷酸靶向的 RNase Ⅱ 酶解實驗是分析 RNA 蛋合復合物(RNP,核糖核蛋白顆粒)的方法,無論是對于粗提物還是提純后的樣品,對分析 RNP 的結構域的結構都非常有效。實驗材料 蛋白酶 KAMV 反轉錄酶試劑、試劑盒 緩沖液DNase ⅠDNase Ⅰ 緩沖液酚氯仿溶液乙酸鈉RNasinE.coli RNase HTBE 緩沖液過硫酸銨溶液尿素凝膠點樣緩沖液轉移緩沖液SSPE 緩沖液核苷酸溶液瓊脂糖丙烯酰胺RNP 凝膠點樣緩沖液儀器、耗材 變性聚丙烯酰胺凝膠電泳電轉移設備尼龍膜實驗步驟 一、材料與設備所有的緩沖液和溶液必須無 RNA 酶污染。1. RNP 制備和 DEAE 層析(1) 緩沖液 D : 20 mmol/L HEPES ( pH 8.0 ),100 mmol/L KCl,0.2 mmol/L EDTA。20% 甘油,高壓滅菌。在使用前加 DTT 至 1 mmol/L。加苯甲磺酰氟(PMSF)至 ......閱讀全文

    RNA-蛋白復合物中寡核苷酸靶向的RNaseH切割保護實驗

                實驗方法原理 寡核苷酸靶向的 RNase Ⅱ 酶解實驗是分析 RNA 蛋合復合物(RNP,核糖核蛋白顆粒)的方法,無論是對于粗提物還是提純后的樣品,對分析 RNP 的結構域的結構都非

    RNA-蛋白復合物中寡核苷酸靶向的RNaseH切割保護實驗

    實驗方法原理 寡核苷酸靶向的 RNase Ⅱ 酶解實驗是分析 RNA 蛋合復合物(RNP,核糖核蛋白顆粒)的方法,無論是對于粗提物還是提純后的樣品,對分析 RNP 的結構域的結構都非常有效。實驗材料 蛋白酶 KAMV 反轉錄酶試劑、試劑盒 緩沖液DNase ⅠDNase Ⅰ 緩沖液酚氯仿溶液乙酸鈉R

    簡并寡核苷酸誘變實驗

    小段DNA序列中產生大量突變             實驗材料 大腸桿菌

    簡并寡核苷酸誘變實驗

    實驗材料 大腸桿菌試劑、試劑盒 DNA聚合酶dNTP甘油NaClEDTASDS無水乙醇儀器、耗材 水浴鍋離心機分光光度計實驗步驟 1.  設計寡核苷酸,其3‘端含有由8個核苷酸組成的回文結構,且包含某一限制性內切酶的識別位點;如果可能的話,5’端也應有一含某個限制性內切酶位點的序列。中間區

    寡核苷酸介導的誘變實驗

    基本方案             實驗材料 大腸桿菌

    寡核苷酸介導的誘變實驗

    實驗材料 大腸桿菌試劑、試劑盒 PEGTEATP寡核苷酸誘變引物T4多核苷酸激酶EDTASSC儀器、耗材 水浴鍋電泳儀培養箱實驗步驟 1.  將一個單鏈噬菌體產生的噬斑轉移至含有1 ml 滅菌TY培養基的1.5 ml 微量離心管中,60℃溫育5 min,以殺滅細菌細胞,劇烈振蕩以釋放瓊脂中

    寡核苷酸探針在溶液中的雜交實驗

    試劑、試劑盒 寡核苷酸雜交液寡核苷酸預雜交液SSC 或 SSPETEAC1 洗滌液TMAC1或 TEAClTMAC1 洗滌液核酸和寡核苷酸放射性標記的寡核苷酸探針儀器、耗材 雜交裝置振蕩培養器實驗步驟 材料溶液和緩沖液稀釋貯存液至適當濃度。寡核苷酸雜交液6XSSC(或 6XSSPE)0.05mol/

    寡核苷酸探針在溶液中的雜交實驗

                試劑、試劑盒 寡核苷酸雜交液 寡核苷酸預雜交液 SSC 或 SSPE TEAC1 洗滌液 TMAC1

    簡并寡核苷酸基因混編實驗

    簡并寡核苷酸基因混編             實驗材料 pBSII KS 質粒

    簡并寡核苷酸基因混編實驗

    實驗材料 pBSII KS 質粒大腸桿菌 DH5α試劑、試劑盒 Pfx 聚合酶堿性磷酸酶通用緩沖液覆蓋液剛果紅溶液脫色液樺木木聚糖底物溶液PAHBAH 儲液實驗步驟 我們以 DNA 重組 D.thermophilum Rt46B.1 木聚糖酶基因( xynB) 及其 5 個相關的木聚糖酶基因為例

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