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實驗材料 蛋白質試劑、試劑盒 CM培養基儀器、耗材 水浴鍋培養箱電轉儀實驗步驟 一、lacZ激活試驗 1. 采用標準的亞克隆技術，將編碼目的蛋白質的DNA插入pEG202的多接頭中，構建一個符合讀框的融合蛋白。2. 將下列組合的質粒，分別按“乙酸鋰轉化法”轉化酵母菌EGY48。（1）pBait+pSH18-34（實驗組）（2）pSH17-4+pSH18-34（激活陽性對照組）（3）pRFHM1+pSH18-34（激活陰性對照組）3. 將轉化混合物涂布于Glc/CM-Ura-His 省卻成分培養基平板，于30℃培養過夜，選擇含兩種質粒的酵母菌。4. 將上步獲得的三種轉化子（實驗組，陽性對照和陰性對照組）分別各挑至少5或6個單菌落，并將毎個克隆劃在一個Glc/CM-Ura-His 省卻成分培養基的主平板上。 5. 將一塊尼龍膜輕輕地放在含酵母......閱讀全文
每一個領域的發展都是基于技術的進步和革新，蛋白質組學亦然。蛋白質的可變性和多樣性等特殊性質導致了蛋白質研究技術遠遠比核酸技術要復雜和困難得多，但正是這些特性參與和影響著整個生命過程。在開始實驗之前，先看看這篇技術簡介吧。一 蛋白質與DNA相互作用在許多的細胞生命活動中，例如DNA復制、mR
這一經典的蛋白相互作用研究方法接近于體內環境，那些瞬時、不穩定的兩兩相互作用也可以被檢測到，并且與內源蛋白的表達無關[6]。鑒于這些優點并結合簡便高效的Gateway表達載體構建方法[7]，在大規模的蛋白質－蛋白質相互作用研究中酵母雙雜交系統得到了最為廣泛的應用。Rain 等[8]用該法繪
現代分子生物學和免疫學的進展加深了我們對許多疾病的了解，并且導致了免疫新策略的產生，免疫學檢測方法可分為體液免疫和細胞免疫測定。本文盤點了與免疫學有關的分子生物學實驗技術匯總。 一、GST pull-down實驗 GST是指谷胱甘肽巰基轉移酶，GST pull-down實驗是一個行之有效的驗
檢測原理：酵母雙雜交系統（Yeast two-hybrid assay）是用于體內研究蛋白相互作用的一種非常便利的工具，常用的如GAL4為基礎的系統，使用酵母轉錄因子GAL4來檢測轉錄激活后的蛋白相互作用。某些轉錄因子（如GAL4）由兩個可以分開，功能上相互獨立的結構域組成，N端有一個147個氨
蛋白質組學（Proteomics）一詞，源于蛋白質（protein）與基因組學（genomics）兩個詞的組合，意指“一種基因組所表達的全套蛋白質”，即包括一種細胞乃至一種生物所表達的全部蛋白質。” 1994年澳大利亞的Marc Wikins首次提出蛋白質組(Proteome)的概念，1997年
褚福亮,王福生, 中國人民解放軍第302醫院全軍艾滋病與病毒性肝炎重點實驗室 北京市 100039項目負責人 王福生, 100039 ,北京市豐臺路26號, 中國人民解放軍第302醫院全軍艾滋病與病毒性肝炎重點實驗室. fswang@public.b
獨體—基于纖連蛋白類型Ⅲ結構域框架的抗體模擬 Akiko Koide and Shohei Koide