實驗方法原理 將培養瓶倒置放于 X 射線機或 60Co 源下,用鉛塊遮蔽需要的集落。實驗材料 D-PBS0.25%胰蛋白酶儀器、耗材 生長培養基X射線或鈷源鉛塊實驗步驟 1. 選擇想要的集落,用氈制粗頭筆或 Nikon 標記筆做記號。2. 選出一塊大小適當的鉛塊。3. 將培養瓶拿至放射源處。4. 將培養瓶倒置放于放射源下方。5. 用 2 mm 厚的鉛塊(用 2 mm 厚的鉛條切出的直徑約 2~5 mm 大小的鉛塊)遮蔽需要的集落。6. 用 30 Gy 的輻射強度照射培養瓶。7. 將培養瓶重新放回無菌環境,撤去培養基,胰蛋內酶消化,使細胞在原培養瓶中重新生長。接受輻射的細胞可作為飼養層細胞。注意事項 X 射線機或 60Co 源一定要在嚴格監控下使用, 正確檢查以確保自己及他人暴露部位的安全。做此類試驗前, 應與地方放射性保護官員取得聯系。......閱讀全文
4.軟瓊脂克隆分離法 本法僅適用于懸浮培養的類淋巴細胞或惡性程度高的貼壁細胞,而正常貼壁細胞在軟瓊脂中不能形成克隆。 (1)將對數生長期的細胞制成單個細胞懸液(貼壁細胞用0.25%胰蛋白酶消化使之分散成單個細胞)作活細胞計數。調整細