昆蟲細胞轉染實驗
實驗材料 昆蟲細胞試劑、試劑盒 胎牛血清脂質體轉染劑儀器、耗材 培養皿錐形瓶培養箱離心機轉子實驗步驟 1. 接種2×106個Sf9細胞于60 mm 培養皿,在含10%胎牛血清的完全培養液或無血清培養液中培養,于27℃培養30~60 min,讓細胞貼壁。2. 相應于毎一待轉染的培養皿,吸取40 μl 無菌水,加入一支無菌聚苯乙烯管中,加入5 μl 線性化的AcMNPV DNA和5 μl 100 ng/μl 的質粒DNA。將Lipofectin 充分混勻后,往DNA溶液中加入50 μl,輕柔混勻,于室溫溫育15 min。3. 在15 min 的溫育期間,用1.5 ml 不含胎牛血清的完全培養液代替培養皿中的培奍液。4. 往培養皿中遂滴加入Lipofectin-DNA復合物,同時輕柔旋轉平皿加以混勻。于27℃溫育4~5 h。 5. 往每個培養皿中加入1.5 ......閱讀全文
昆蟲細胞轉染實驗
基本方案 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 昆蟲細胞 試劑、試劑盒
昆蟲細胞轉染實驗
實驗材料 昆蟲細胞試劑、試劑盒 胎牛血清脂質體轉染劑儀器、耗材 培養皿錐形瓶培養箱離心機轉子實驗步驟 1. ?接種2×106個Sf9細胞于60 mm 培養皿,在含10%胎牛血清的完全培養液或無血清培養液中培養,于27℃培養30~60 min,讓細胞貼壁。2. ?相應于毎一待轉染的培養皿,吸取40
昆蟲細胞轉染實驗
實驗材料昆蟲細胞試劑、試劑盒胎牛血清脂質體轉染劑儀器、耗材培養皿錐形瓶培養箱離心機轉子實驗步驟1. ?接種2x106個Sf9細胞于60 mm 培養皿,在含10%胎牛血清的完全培養液或無血清培養液中培養,于27℃培養30~60 min,讓細胞貼壁。2. ?相應于毎一待轉染的培養皿,吸取40 ul 無菌
昆蟲細胞轉染實驗
基本方案 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 昆蟲細胞 試劑、試劑盒
昆蟲細胞共轉染實驗
實驗方法原理 實驗材料 草地夜蛾(Sf 9)細胞含目的基因的重組桿狀病毒轉移質粒陽性對照載體:pVL 1392 - XylE試劑、試劑盒 ORF 1629 缺失的線性 AcMNPV DNA轉染緩沖液 B轉染緩沖液A500 mmol/L 兒茶酚/50 mmol/L 硫酸氫鈉儀器、耗材 含 10% 胎牛
昆蟲細胞共轉染實驗
基本方案 用線性化桿狀病毒DNA ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 實驗材料 草地夜蛾(Sf 9)細胞
昆蟲細胞共轉染實驗
實驗材料草地夜蛾(Sf 9)細胞含目的基因的重組桿狀病毒轉移質粒陽性對照載體:pVL 1392 - XylE試劑、試劑盒ORF 1629 缺失的線性 AcMNPV DNA轉染緩沖液 B轉染緩沖液A500 mmol/L 兒茶酚/50 mmol/L 硫酸氫鈉儀器、耗材含 10% 胎牛血清(FBS)的 T
細胞轉染實驗的實驗步驟-細胞轉染
1)轉染試劑的準備A.將400ul去核酸酶水加入管中,震蕩10秒鐘,溶解脂狀物。B.震蕩后將試劑放在-20攝氏度保存,使用前還需震蕩。2)選擇合適的混合比例(1:1-1:2/脂質體體積:DNA質量)來轉染細胞。在一個轉染管中加入合適體積的無血清培養基。加入合適質量的MyoD或者EGFP的DNA,震蕩
真核細胞轉染實驗
學習和掌握外源基因導入真核細胞的主要方法——脂質體介導的轉染。了解外源基因進入的一般性方法,觀測外源蛋白的表達(綠色熒光蛋白),為染色準備實驗材料。實驗材料真核細胞試劑、試劑盒脂質體 轉染液儀器、耗材CO2孵箱 離心管 6孔板
細胞轉染實驗目的
學習和掌握外源基因導入真核細胞的主要方法—脂質體介導的轉染。了解外源基因進入的一般性方法,觀測外源蛋白的表達(綠色熒光蛋白),為染色準備實驗材料。