DNA裂解分析實驗
實驗材料 細胞試劑、試劑盒 溶解緩沖液RNA 酶A T1 混合液蛋白酶 KDNA 加樣緩沖液儀器、耗材 Eppendorf 管移液管瓊脂糖凝膠實驗步驟 1. 將 5X105 細胞移入無菌的 1.5 ml Eppendorf 管中，4℃ 2000 r/min 離心 5 分鐘，棄上清。2. 加入 20 μl 溶解緩沖液。用移液管尖頭混勻細胞沉淀。3. 加 10 μl RNA 酶A/T1 混合液，輕彈管尖混勻，不要形成旋渦。37℃ 孵育 30~120 分鐘。4. 加 10 μl 蛋白酶 K，輕彈管尖混勻，50℃ 孵育至少 90 min，也可過夜。5. 加 5 μl 6X DNA 加樣緩沖液，在含 0.5 μg/ml 溴化乙錠 TAE 的 1%~1.5% 瓊脂糖凝膠于孔中加 DNA 樣品。6. 低電壓電泳，可以促進 DNA 片段的分離。7. DNA 序列梯最后有紫外光顯示，攝影。凋亡細胞形成明顯的 DNA ......閱讀全文
DNA裂解分析實驗
瓊脂糖凝膠電泳 個體核的PI熒光 乙醇固定后PI染色 JAM分析 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 細胞
DNA裂解分析實驗
瓊脂糖凝膠電泳 個體核的PI熒光 乙醇固定后PI染色 JAM分析 ? ? ? ? ? ? 實驗材料 細胞
DNA裂解分析實驗
實驗材料?細胞試劑、試劑盒?溶解緩沖液RNA 酶A T1 混合液蛋白酶 KDNA 加樣緩沖液儀器、耗材?Eppendorf 管移液管瓊脂糖凝膠實驗步驟 1. 將 5X105 細胞移入無菌的 1.5 ml Eppendorf 管中，4℃ 2000 r/min 離心 5 分鐘，棄上清。2. 加入 20
DNA裂解分析實驗_JAM分析
實驗材料 細胞 試劑、試劑盒 胸腺嘧啶脫氧核苷HBSSPBSEDTA 儀器、耗材 新鮮培養基組織培養板 實驗步驟 1. 實驗前一天，將細胞接種于新鮮培養基。對數生長期細胞可更好地滲入 [3H]-胸腺嘧啶脫氧核苷。 2. 收獲細胞，在新鮮培養基中以 1
堿裂解法提取質粒DNA
實驗目的1、掌握最常用的提取質粒DNA的方法和檢測方法；2、了解制備原理及各種試劑的作用。實驗原理堿裂解法是基于DNA的變性與復性差異而達到分離目的的。堿性使質粒DNA變性，再將pH值調至中性使其復性，復性的為質粒DNA，而染色體DNA不會復性，纏結成網狀物質，通過離心除去。細菌質粒是一類雙鏈、閉環
堿裂解法提取質粒DNA
實驗目的 ? ? ?1、掌握最常用的提取質粒DNA的方法和檢測方法； ? ? ? 2、了解制備原理及各種試劑的作用。 ? ? ?實驗原理 堿裂解法是基于DNA的變性與復性差異而達到分離目的的。堿性使質粒DNA變性，再將pH值調至中性使其復性，復性的為質粒DNA，而染色體DNA不會復性，纏結成網狀物
堿裂解法提取質粒DNA
實驗概要本實驗介紹了堿裂解法提取質粒DNA的實驗原理和操作步驟。實驗原理堿裂解法是一種應用最為廣泛的制備質粒DNA的方法，堿變性抽提質粒DNA是基于染色體DNA與質粒DNA的變性與復性的差異而達到分離目的。在pH值高達12.6的堿性條件下，染色體DNA的氫鍵斷裂，雙螺旋結構解開而變性。質粒DNA的大
煮沸裂解法制備質粒DNA實驗——煮沸裂解法小量制備質粒DNA
這個方法 [ 根據 Holmes 和 Quigley 的方法（1981) 修訂而成 ] 是將細菌懸浮于含有 Triton X-100 和能消化細胞壁的溶菌酶的緩沖液中，然后加熱到 100℃ 使其裂解。本實驗來源「分子克隆實驗指南第三版」黃培堂等實驗方法原理經 Triton X-100、溶菌酶和加熱處
煮沸裂解法制備質粒DNA實驗——煮沸裂解法大量制備質粒DNA
實驗方法原理經 Triton X-100、溶菌酶和加熱處理可從大量（500 ml ) 細菌培養物中分離質粒 DNA，所獲得的質粒通過柱層析或 CsCl-溴化乙錠梯度離心可進一步純化。試劑、試劑盒抗生素乙醇異丙醇乙酸鈉STETTE溶菌酶儀器、耗材LB、YT 或 Terrific 培養液沸水浴實驗步驟一
SDS裂解法提取質粒DNA實驗
這種溫和的方法（改進自 Godson and Vapnek 1973 ) 在處理大質粒（>15 kb ) 時較堿裂解法和煮沸法好。但溫和的代價是產量低：有相當數量的質粒 DNA 混于細胞渣滓中，在操作的早期步驟中丟失。本實驗來源「分子克隆實驗指南第三版」黃培堂等譯。實驗方法原理這種溫和的方法（改進自