1. 主要試劑的的配制碘化丙錠(PI)染色液(4℃ 避光保存):Pl,100 μg/ml;TritonX-100,1.0%;NaCl 0.9%。2. 操作流程2.1 樣本的準備2.1.1 培養細胞收集懸浮細胞于 Eppendorf 管中。貼壁細胞用胰蛋白酶消化后制成單細胞懸液,1000r/min離心 5 min。2.1.2 新鮮實體組織取材組織用 PBS 漂洗干凈后,浸泡在含 PBS 的平皿或青霉素小瓶內,用眼科剪盡可能將組織剪碎,吸去上清液,組織塊轉入大瓶中加入 10~20 ml 酶(200 μg/ml膠原酶),37℃ 消化 30 min,在不銹鋼網上輕輕研磨,使組織和細胞分離,用 200 目篩網過濾 2 次。2.1.3 石蠟切片組織切 50 μm 厚切片 4 張,置玻璃試管中,加二甲苯 5 ml,脫蠟 3×5 min,無水乙醇洗3×5 min,蒸餾水洗 5 min,加 2 ml 0.5% 胃蛋白酶(pH ......閱讀全文
Sirt6蛋白酶結構和新功能的研究獲得重要進展 4月4日,香港大學郝權教授研究組與康奈爾大學Hening Lin教授研究組在《自然》雜志發表了題為“Sirt6 regulates TNFα secretion via hydrolysis of long chain fatty acy
實驗步驟一、膜的制備從細胞或組織中分離質膜是純化膜蛋白的第一步。由于缺少能有效分離去污劑增溶的膜蛋白的生化方法,因此在質膜成分純化上投人一些時間會對后續步驟的結果有利。大多數膜蛋白的含量較低, 因此選擇易于大量獲取并能高表達目的膜蛋白的組織或細胞系就很重要。最近,人們對于將細胞表面蛋白質作為鑒定不同
實驗步驟 一、膜的制備 從細胞或組織中分離質膜是純化膜蛋白的第一步。由于缺少能有效分離去污劑增溶的膜蛋白的生化方法,因此在質膜成分純化上投人一些時間會對后續步驟的結果有利。 大多數膜蛋白的含量較低, 因此選擇易于大量獲取并能
表4-2選擇性免疫蛋白缺乏癥分型IgA缺乏癥選擇性IgA缺乏癥共濟失調-毛細血管擴張癥Nezelof綜合癥慢性皮膚粘膜念珠菌病SIgA(分泌型)缺乏癥IgA缺乏癥IgA缺乏癥選擇性IgM缺乏癥Wiskott-Aldrich綜合征IgE缺乏癥IgA-IgM缺乏癥IgA-IgG
細胞膜的物質運轉及受體功能(1)分隔、形成細胞和細胞器,為細胞的生命活動提供相對穩定的內環境,膜的面積大大增加,提高了發生在膜上的生物功能;(2)屏障作用,膜兩側的水溶性物質不能自由通過;(3)選擇性物質運輸,伴隨著能量的傳遞;(4)生物功能:激素作用、酶促反應、細胞識別、電子傳遞等。(5)識別和傳
12月15日,PNAS 在線發表了中國科學院上海生命科學研究院植物生理生態研究所張鵬研究組題為Structure of a pantothenate transporter and implications for ECF module sharing and energy coupling o
12月15日,PNAS 在線發表了中國科學院上海生命科學研究院植物生理生態研究所張鵬研究組題為Structure of a pantothenate transporter and implications for ECF module sharing and energy co
人的大腦是由約100億個神經元(即神經細胞)組成,這些神經元通過突觸這種特化細胞間連接結構進行信息交換。突觸前神經元通過突觸前膜釋放神經遞質,結合于突觸后膜的神經遞質受體,引起突觸后神經元的電生理變化,從而實現神經信號的跨細胞傳遞。在大腦內,興奮性的信號傳遞主要是由突觸前膜釋放的谷氨酸(神經遞質
快速生長的腫瘤,非常依賴營養物質的高效轉運。GLUT是一種重要的轉運蛋白,負責將糖類運入細胞。瑞典Karolinska研究所的研究人員首次解析了GLUT轉運蛋白的工作機制,文章于四月二十八日發表在Nature Structural & Molecular Biology雜志上。他們希
葡萄糖分子是維持細胞代謝和生命活動的重要能量來源。葡萄糖轉運體1(GLUT1)廣泛存在于人體細胞表面,對于維持正常生理功能極為重要,其表達和功能異常與很多疾病相關。然而,GLUT1在細胞膜上的詳細定位與分布信息,以及定位分布信息與它們的生理功能之間的聯系還未完全解析,尤其是單個葡萄糖分子跨膜轉運
細胞是執行生命功能的基本單位, 各種生物分子在脂膜包被的區域內有序協調地行使功能, 從而構成了生物活動的基礎. 脂分子層不僅具有隔絕內外形成微環境的屏障作用, 而且還通過受控的跨膜物質運輸與信號轉導而發揮交通樞紐的功能, 實現了膜內外物質與信息交換的精細調節. 除此之外, 脂分子層由于其形成的疏
葡萄糖分子是維持細胞代謝和生命活動的重要能量來源。葡萄糖轉運體1(GLUT1)廣泛存在于人體細胞表面,對于維持正常生理功能極為重要,其表達和功能異常與很多疾病相關。 然而,GLUT1在細胞膜上的詳細定位與分布信息,以及定位分布信息與它們的生理功能之間的聯系還未完全解析,尤其是單個葡萄糖分子跨膜
來自清華大學生科院的施一公教授近期發表了題為“Common folds and transport mechanisms of secondary active transporters”的綜述文章,聚焦于繼發性主動轉運作用元件的常見折疊,以及共有的轉運機制。通過一些結構信息,分析新發現
6月18日,Nature 雜志在線發表了中國科學院生物物理研究所黃億華研究員研究組對細菌脂多糖轉運組裝膜蛋白復合體結構解析重要成果。 脂多糖又稱內毒素,最早由德裔著名微生物學家Richard F. J. Pfeiffer于十九世紀末發現。一百多年后,美國科學家Bruce Beutler 因發現
10月13日,最新一期的Developmental Cell 上發表了中國科學院生物物理研究所孫飛研究組與合作研究單位關于囊泡轉運再循環過程中ACAP1分子重塑細胞膜機理的最新研究成果,論文的標題為A PH domain in ACAP1 possesses key features of th
顏寧(左)指導研究組成員鄧東做實驗人源葡萄糖轉運蛋白GLUT1的結構模型 核心閱讀 6月5日,清華大學宣布:清華大學醫學院顏寧教授研究組在世界上首次解析了人源葡萄糖轉運蛋白GLUT1的晶體結構,初步揭示了其工作機制及相關疾病的致病機理。該研究成果被國際學術界譽為“具有里程碑意
人的大腦中約含有100億個神經元,它們通過神經突觸這一個獨特而又基本的結構實現信息傳遞交流和整合。突觸前神經元釋放的神經遞質,進入突觸間隙之后會與定位于突觸后膜的神經遞質受體相結合,引起突觸后神經元活性變化,從而實現神經信息的跨細胞傳遞。這一過程的調控異常被認為是神經精神疾病發生的重要原因之一,
細胞生物膜所含的蛋白稱為膜蛋白,其參與和行使了眾多細胞功能,包括細胞與外界進行物質運輸、信息傳遞、能量交換等。膜蛋白擔任了各種神經信號分子、激素和其他底物的受體,構成了各種離子跨膜的通道,以及構成各類轉運蛋白。在人體蛋白中,有大約 30% 是膜蛋白。FDA 批準的新藥中,絕大多數都以膜蛋白為靶點
ATP門控離子通道P2X3受體選擇性地表達于初級感覺神經元,對生理性和病理性痛覺調節至關重要。P2X3受體的合成、組裝和轉運對于其行使正常的功能是必需的。病理條件下大量釋放的包括ATP在內的各種炎癥因子從多方面調節著P2X3受體的功能。 來自中國科學院上海生化與細胞所的鮑嵐課題組前期的研究
中科院生化細胞所課題組長鮑嵐研究員課題組近年來致力于初級感覺神經元軸突中非編碼RNA 的功能和調控機制研究,近期她與王斌博士受邀發表題為“Axonal miRNAs: Localization, Function and Regulatory Mechanisms During Axon Dev
9. 帶3蛋白(band 3 protein)與血型糖蛋白一樣都是紅細胞的膜蛋白,因其在PAGE電泳分部時位于第三條帶而得名。帶3蛋白在紅細胞膜中含量很高,約為紅細胞膜蛋白的25%。由于帶3 蛋白具有陰離子轉運功能,所以帶3蛋白又被稱為“陰離子通道”。帶3蛋白是由兩個相同的亞基組成的二聚體,
2017 年 6 月 8 日,生命中心顏寧研究組在《細胞》(Cell)雜志在線發表了題為《人源脂類外向轉運蛋白 ABCA1 的結構》(Structure of the Human Lipid Exporter ABCA1)的研究論文,首次報道了膽固醇逆向運輸過程中的關鍵蛋白 ABCA1 近原子分
2017年6月8日,清華大學生命學院、結構生物學高精尖創新中心顏寧研究組在《細胞》(Cell)雜志在線發表了題為《人源脂類外向轉運蛋白ABCA1的結構》(Structure of the Human Lipid Exporter ABCA1)的研究論文,首次報道了膽固醇逆向運輸過程中的關鍵蛋白
顏寧研究組一直以來都在針對膽固醇代謝調控通路進行系統的結構生物學與生物化學研究,在近年開始取得進展。去年其研究組在Cell上發文,報道了人源膽固醇胞內轉運蛋白NPC1的冷凍電鏡結構,在此基礎上,他們又首次解析了人源ABCA1全長蛋白的近原子分辨率冷凍電鏡結構,為理解ABCA1作用機制及相關疾病致
葡萄糖,地球生物最重要的能量來源。它,究竟如何進入細胞?100多年來,多少科學家為之著迷。 6月5日,英國《自然》雜志揭開了這個源自生命內部的奧秘:由37歲的中國科學家、清華大學醫學院教授顏寧率領的8
細胞膜的主要功能:細胞膜對于細胞整個結構的完整性以及細胞的正常生命活動都是至關重要的。其功能概括起來有以下幾個方面。(1)細胞的界膜,這是細胞膜最重要的功能。無論是真核細胞還是原核細胞,都必定有一個由一定膜結構形成的界膜,不然的話就不會有細胞存在。細胞膜的出現使生命起源到了細胞的形式,也保證了細胞生
近日來自普渡大學、霍華德休斯醫學研究所的研究人員發表了題為“Crystal structure of the multidrug transporter P-glycoprotein from Caenorhabditis elegans”的文章,報道了來自秀麗隱桿線蟲的多藥蛋白P-糖蛋
近日來自普渡大學、霍華德休斯醫學研究所的研究人員發表了題為“Crystal structure of the multidrug transporter P-glycoprotein from Caenorhabditis elegans”的文章,報道了來自秀麗隱桿線蟲的多藥蛋白P-糖蛋
來自清華大學的顏寧教授課題組發表了題為“Crystal structure of a bacterial homologue of glucose transporters GLUT1C4”的文章,報道了細菌葡萄糖轉運蛋白GLUT1C4同源物的晶體結構。相關研究成果公布在10月17日的N
利用X射線晶體學,德克薩斯大學西南醫學中心的研究人員確定了幫助維持固醇平衡的人類固醇轉運蛋白的三維原子結構。這項研究發布在《自然》(Nature)雜志上。 論文的通訊作者、德克薩斯大學西南醫學中心生物物理和生物化學助理教授Daniel Rosenbaum博士說:“確定這一蛋白質復合物的結構可幫