1、原理利用電子顯微鏡的超級放大功能,可直接觀察培養細胞中支原體污染情況。2、操怍方法①細胞傳代至貼有蓋玻片的平皿中;②培養24h取出;③PSB洗滌;④2.5%戊二醛/ PSB固定15min,PSB洗滌;⑤1%鋨酸固定30min,PSB洗滌;⑥乙酸異戊酯脫水;⑦冰點干燥;⑧噴金;⑨掃描電鏡觀察,照相綜上所述,幾種不同的方法各有特點,其應用也各有側重。①支原體培養法是最為經濟和可靠的方法,但其實驗周期較長,所以常用于進行對懷疑細胞的最后甄別。②DNA染色法較為快捷,方法簡單,但其靈敏度有一定欠缺,易造成漏檢。③PCR檢測支原體的方法最為快速、靈敏,取樣量少,既可進行細胞檢測也可進行細胞上清的檢測,同時可以檢測8種支原體的污染,是目前常用的檢測手段。但其成本較高,條件要求嚴格,有時易出現假陽性。其彌補的方法是對懷疑的樣品經過3次PCR檢測,或用培養法檢測。④電鏡法非常直觀、準確,但對使用環境要求高,操作復雜,實驗周期較長,常作為樣品......閱讀全文
2、支原體污染的檢測(1)相差顯微鏡觀察直接取少許培養液滴在載物片上,再蓋上蓋片觀察,支原體在鏡下呈暗色微小顆粒,多位于細胞與細胞之間,有時可見類似于布朗運動的表現。應注意與細胞破碎溢出的內容物如線粒體等相區別。(2)熒光染色法觀察用熒光染料Hoechst33258,此染料能與DNA特異地結合,可使
細胞培養 中常遇見的有細菌污染、真菌污染、支原體污染、病毒污染等,說起支原體污染,估計細胞培養的同學就開始犯愁了,細胞培養的老手都知道,支原體污染非常不易察覺,怎么才能檢測支原體污染呢?1、細菌 、真菌污染的檢測(1)肉眼觀察 細菌 、真菌污染常在傳代、換液、
淺談掃描電子顯微鏡在三大領域的應用掃描電子顯微鏡是一種多功能的儀器、具有很多優越的性能、是用途最為廣泛的一種儀器.它可以應用于很多領域中。1掃描電鏡在材料研究中的應用掃描電鏡材料的組織形貌觀察、層表面形貌分析和深度檢測、區化學成分分析和微組織及超微尺寸材料的研究 。例如:掃描電子顯微鏡在
支原體是一種大小介于細菌和病毒之間(最小直徑0.2um)并獨立生活的微生物。約有1%可通過濾菌器。支原體無細胞壁形態呈高度多形性。可為圓形、絲狀或梨形。支原體形態多變,在光境下不易看清內部結構。電鏡下觀察支原體膜為三層結構。其中央有電干密度大的密集顆粒群或絲狀的中心束。支原體多吸附或散在于細胞表面和
支原體是一種大小介于細菌和病毒之間(最小直徑0.2um)并獨立生活的微生物.約有1%可通過濾菌器。支原體無細胞壁形態呈高度多形性.可為圓形、絲狀或梨形。 支原體形態多變,在光境下不易看清內部結構。電鏡下觀察支原體膜為三層結構.其中央有電干密度大的密集顆粒群或絲狀的中心束。支原體多吸附或散在于
支原體是一種大小介于細菌和病毒之間(最小直徑0.2um)并獨立生活的微生物.約有1%可通過濾菌器。支原體無細胞壁形態呈高度多形性.可為圓形、絲狀或梨形。 支原體形態多變,在光境下不易看清內部結構。電鏡下觀察支原體膜為三層結構.其中央有電干密度大的密集顆粒群或絲狀的中心束。支原體多吸附或散在于細胞表面
最近看大家常提到支原體污染,就翻了翻書,做了些筆記,現在貼出來和大家分享:支原體是一種大小介于細菌和病毒之間(最小直徑0.2um)并獨立生活的微生物。約有1%可通過濾菌器。支原體無細胞壁形態呈高度多形性。可為圓形、絲狀或梨形。支原體形態多變,在光境下不易看清內部結構。電鏡下觀察支原體膜為三層結構。其
最近看大家常提到支原體污染,就翻了翻書,做了些筆記,現在貼出來和大家分享:支原體是一種大小介于細菌和病毒之間(最小直徑0.2um)并獨立生活的微生物。約有1%可通過濾菌器。支原體無細胞壁形態呈高度多形性。可為圓形、絲狀或梨形。支原體形態多變,在光境下不易看清內部結構。電鏡下觀察支原體膜為三層結構。其
小生剛開始做細胞培養不久,對于一個細胞培養的新手來說,最怕的就是細胞受污染。所以本人翻閱了一些園子里的關于細胞培養過程中的污染問題的貼子,結合平時查閱資料以及這些天的細胞培養的一些心得,整理出一些關于細胞污染的東東與大家一起分享。希望能對剛踏入細胞培養的同仁們有些幫助,也希望各位達人作出補充,大家共
支原體是一種大小介于細菌和病毒之間(最小直徑0.2um)并獨立生活的微生物。約有1%可通過濾菌器。支原體無細胞壁形態呈高度多形性。可為圓形、絲狀或梨形。支原體形態多變,在光境下不易看清內部結構。電鏡下觀察支原體膜為三層結構。其中心有電干密度大的密集顆粒群或絲狀的中心束。支原體多吸附或散在于細胞表面和
概論§ 污染是細胞培養的大敵。預防和避免污染是細胞培養成功的關鍵之一。§ 一開始就要十分重視,防止污染,否則會前功盡棄,不僅浪費時間,而且浪費人力、物力,甚至造成無法彌補的損失。(一)污染的類型§ 細胞培養過程中的污染不僅僅指微生物,而且還包括所有混入培養環境中的、對細
細胞增殖檢測:3H同位素滲入法實例 實驗方法原理 樹突狀細胞(DC) 是一組分布廣泛的、由骨髓來源
樹突狀細胞(DC) 是一組分布廣泛的、由骨髓來源的、具有遷移能力的免疫細胞,是目前發現的功能最強大的抗原遞呈細胞(APC)。 DC 是機體適應性 T 細胞免疫應答的始動者,主要在(1)腫瘤免疫反應(2)在疫苗生產過程中分別起著至關重要的作用。實驗方法原理樹突狀細胞(DC) 是一組分布廣泛的、由骨髓來
細胞增殖檢測:3H同位素滲入法實例 實驗方法原理 樹突狀細胞(DC) 是一組分布廣泛的、由骨髓來源
為加強藥品生產監管,進一步指導和規范藥品生產企業科學系統地開展除菌過濾技術及應用、無菌工藝模擬試驗,國家藥品監督管理局組織制定了《除菌過濾技術及應用指南》,作為實施《藥品生產質量管理規范(2010年修訂)》的指導性文件,現予發布,自2018年10月1日起施行。 特此通告。 附件:除菌過濾技術
除菌過濾技術及應用指南 1. 目的 為指導和規范除菌過濾技術在無菌藥品生產中的應用,保證無菌藥品的安全、有效和質量穩定,依據《藥品生產質量管理規范(2010年修訂)》及附錄,制定本指南。 本指南不具有法律約束性,僅作為藥品生產企業、工程設計、設備制造以及藥品監管單位的人員參考使用。本指南是
分析測試百科網訊 近日,國家藥品監督管理局發布關于《除菌過濾技術及應用指南》等3個指南的通告。 通知中說明為加強藥品生產監管,進一步指導和規范藥品生產企業科學系統地開展除菌過濾技術及應用、無菌工藝模擬試驗,國家藥品監督管理局組織制定了《除菌過濾技術及應用指南》《無菌工藝模擬試驗指南(無菌原料藥
2017年12月22日,CDE發布《已上市化學仿制藥(注射劑)一致性評價技術要求(征求意見稿)》;2018年9月11日國家藥品監督管理局組織制定了《除菌過濾技術及應用指南》《無菌工藝模擬試驗指南(無菌原料藥)》《無菌工藝模擬試驗指南(無菌制劑)》;小編看注射劑一致性評價征求意見稿很快就要轉正了,