4)去垢劑去垢劑(表面活性劑)是一類即具有親水基又具有疏水基的物質,一般具有乳化、分散、和增溶作用,可分陰離子、陽離子和中性去垢劑等多種類型,中性去垢劑在蛋白提取鐘應用的較多。A.中性去垢劑 又稱非離子表面活性劑,對蛋白質的變性作用影響較少,宜于蛋白質或酶提取之用。一般市售中性去垢劑有聚乙二醇類,如PEG200;多元醇類表面活性劑,如山梨醇、司盤類和吐溫類;聚氧乙烯脂肪醇醚,如芐澤類、平平加類;聚氧乙烯烷基苯酚醚,如Igepal CO、乳化劑OP、Triton、Pluronic(用作消泡劑、潤濕劑、增溶劑)、泡敵。中性去垢劑作用后可通過Sephadex LH-50柱除去;也可直接上DEAE-Sephadex柱層析分離目的蛋白,不必先除去去垢劑。B.陰離子去垢劑 常見的有十二烷基硫酸鈉和十二烷基璜酸鈉。前者可促進核蛋白的溶解,將核酸釋放出來,并對核酸酶有一定抑制作用,常用于核酸的提取。C.陽離子去垢劑 如潔爾滅、新潔爾......閱讀全文
Western免疫印跡(Western Blot)是將蛋白質轉移到膜上,然后利用抗體進行檢測。對已知表達蛋白,可用相應抗體作為一抗進行檢測,對新基因的表達產物,可通過融合部分的抗體檢測。一、原理與Southern或Northern雜交方法類似,但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝膠電泳,被
1.2.7重組融合蛋白的純化 PrP-pET-32a(+)轉化表達菌E.coli BL21(DE3),TB培養基中,25℃,AMP 200 ug/ml,搖床(250 r/min)培養至OD600約為1.5,更換等體積新鮮TB培養基,加入IPTG至終濃度1 mM,AMP 200 ug/ml,
實驗方法原理蛋白質純化和儲備過程中保持穩定性。實驗材料蛋白樣品試劑、試劑盒蛋白質水解酶蛋白酶抑制劑儀器、耗材冰箱實驗步驟一、蛋白質失活的原因在各種條件下使用不同操作方法從細胞環境中提取蛋白質將會導致其活性的丟失和結構的改變。這些操作包括稀釋,改變溶液條件,暴露于各種降解酶、氧氣、重金屬及各種材,的表
分析測試百科網訊 2015年9月9日-12日,第五屆金屬組學國際研討會在北京西郊賓館召開,會議由中國科學院科院高能物理研究所、清華大學共同主辦,來自世界各地的近200位金屬組學領域的專家學者匯聚一堂,探討金屬組學的最新進展及未
2019年8月31日,第四屆全國樣品制備學術報告會在青島銀沙灘溫德姆至尊酒店召開(相關報道:第4屆全國樣品制備學術會在青島召開 關注新機遇新挑戰)。大會報告(相關報道:簡化制樣、提高靈敏度 看第四屆全國樣品制備會大咖報告)后,會議還帶來了精彩的分會場口頭報告,各個專家、廠商紛紛帶來樣品制備方面的
2013年12月12日,由北京色譜學會主辦,北京理化分析測試技術學會承辦的以“色譜在環境和藥物分析中的應用”為主題的2013年北京色譜年會在京東賓館隆重召開,來自北京周邊地區的政府機關、高等院校、科研院所的400余人參加了本屆色譜年會。
從組織和細胞中提取蛋白可能是蛋白質組研究中最關鍵的一步,因為這一步影響了蛋白的產率、生物活性和特定目的蛋白結構的完整性。因此,我們要注意蛋白提取條件的選擇。主要目標是在破壞力最小、保持蛋白結構完整性的前提下,可重復地使細胞最大程度地裂解。方案1 哺乳動物組織的勻漿實驗實驗方法原理對于細胞內蛋白的純化
實驗材料質粒試劑、試劑盒DNase 緩沖液EDTA 溶液TBE 緩沖液丁醇轉化鹽儲液氨芐儲液懸浮緩沖液硼酸緩沖液儀器、耗材水浴鍋分光光度儀分光熒光計實驗步驟本章主要介紹提高蛋白質熱穩定性的常規方法,而不需要在高溫下篩選酶活性。介紹完 β 內酰胺酶模型系統(見 16.3.1 ),我們描述末端截切(見
下村修 做出應獲諾貝爾獎工作的科學家,幾十年默默無聞; 被廣泛應用的分子,很少人知其發現者; 原始論文鮮為人知,后繼論文倒很熱門; 曾失明的人,發現了美麗的發光蛋白; 低調的父親,出了高調的兒子。 這里簡介一項生物化學研究,講一個科學家的故事,
9、什么叫復性成功 復性效果的檢測: 根據具體的蛋白性質和需要,可以從生化、免疫、物理性質等方面對蛋白質的復性效率進行檢測。 1,凝膠電泳:一般可以用非變性的聚丙烯酰胺凝膠電泳可以檢測變性和天然狀態的蛋白質,或用非還原的聚丙烯酰胺電泳檢測有二硫鍵的蛋白復性后二硫鍵的配對
2013年8月3日-4日,由中國儀器儀表學會分析儀器分會樣品制備專業委員主辦,中國科學院大連化學物理研究所協辦的“第一屆全國樣品制備學術報告會”在浪漫之都大連舉行。會議期間來自全國100余位專家、學者及廠商代表共聚一堂,交流、切磋樣品前處理技術的科研進展。分析測試百科網作為受邀媒體對大會進行了全
The International Working Group on Antibody Validation: 國際抗體驗證工作組 Proposal for Antibody Specificity Testing Q&A 關于抗體特異性檢測提議的常見問題及回答 1.What i
分析測試百科網訊 此前我們已經介紹,質譜具有“3S+3A”的所有特征,這是基金委的莊乾坤教授對質譜優勢的高度概括。分析檢測手段,但凡滿足“3S+3A”中的1-2條,就有存在的價值,而質譜是六項全能。質譜的通用性更是出類拔萃,宏觀上我們知道所有物體的質量都可以用“秤”來稱量,這要感謝牛頓祖師爺發現
2012年4月21日下午,全國生物醫藥色譜及相關技術學術交流會各分會在美麗的重慶大學虎溪校區陸續展開。以下是“生化與醫藥分會”的精彩內容,來自各著名高校、研究院所的專家、老師,就色譜新技術、新觀念以及在藥品、蛋白質、天然產物等分析、分離方面的應用進行了深入的交流。分
修飾肽純化的一般目標和方法 首先,自然來源或者重組表達的蛋白質經過一些粗提的步驟(例如:勻漿、離心、硫酸銨沉淀等)成為穩定的可以用于色譜分離的樣品。然后進行捕獲色譜(capture chromatography),主要目標是濃縮和去除大量的容易去除的雜質,此步z
瑞士蘇黎世聯邦理工學院的研究人員領導的一個研究小組,已制定了一個質譜工作流,用于對整個蛋白質組進行高通量的絕對定量。 據ETH的研究者、該研究的領頭人Ruedi Aebersold說,對于多種形態,該技術實現了目標蛋白質組的重現性定量,提供用于
——走進上海中科院植物逆境生物學研究中心 分析測試百科網訊 中國科學院上海植物逆境生物學研究中心坐落于風景優美的上海辰山植物園內,由中央“千人計劃”頂尖人才、美國科學院院士朱健康教授領銜,是在中國科學院、上海市和國家有關部委聯合支持下,依托中國科學院上海生命科學研究院研究平臺,與上
自讀研究生到現在,我聽過不下300場科學報告,從碩博生、博士后到知名學者、院士和諾貝爾獎獲得者。每場報告下來,我總會問自己從中學到了什么,如果能夠有一兩點哪怕很小的所得,就算是不虛此行。論及近16年來哪次報告對我的科研生涯影響最深遠,首推在清華大學聆聽蒲慕明院士關于創新研究和科研人生的演講。這幾天想
分析測試百科網訊 2016年8月11日,由遼寧省分析測試協會,遼寧省分析科學研究院主辦的“第四屆環渤海色質譜學術報告會暨遼寧省第十屆學術年會分會”在丹東召開(相關報道:第四屆環渤海色譜質譜學術會在丹東開幕 首次發布徽標)。大會上,眾位環渤海的
CRISPR/Cas系統是目前發現存在于大多數細菌與所有的古菌中的一種后天免疫系統,其以消滅外來的質體或者噬菌體并在自身基因組中留下外來基因片段作為“記憶”。 CRISPR/Cas系統全名為常間回文重復序列叢集/常間回文重復序列叢集關聯蛋白系統(clustered regularly inte
HUPO2011上 全球蛋白質組學研究者匯聚一堂推進人類蛋白質組計劃 瑞士日內瓦,蛋白質組研究領域的領袖們在HUPO 2011上匯聚一堂,為人類蛋白質組計劃(Human Proteome Project , HPP) 定義新的短期里程碑。這一全球范圍內的
2009年8月29日下午,質譜沙龍第二十二期活動在第二炮兵總醫院制劑樓舉行。除了來自發酵研究院、二炮總醫院、空軍總醫院、北大人民醫院的老朋友外,還有來自中國農科院、PerkinElmer公司、北京伯奧克生物技術公司的新朋友。 第二十二期質譜沙龍活動現場 生物元素檢
3月30日下午,賽默飛世爾科技蛋白質組學市場專員唐佳向大家作了題為《蛋白質組學研究方法和Thermo蛋白質組學解決方案》的報告
分析測試百科網訊 8月16日第二屆全國樣品制備學術報告會的下午報告內容精萃:北京大學白玉:基于新型納米材料的磷酸化肽富集新方法研究 北京大學的白玉教授做題為《基于新型納米材料的磷酸化肽富集新方法研究》的報告。
分析測試百科網訊 2015年9月9日-12日,第五屆金屬組學國際研討會在北京西郊賓館召開,會議由中國科學院科院高能物理研究所、清華大學共同主辦,來自世界各地的近200位金屬組學領域的專家學者匯聚一堂,探討金屬組學的最新進展及未來展望。 9月10日下午,大會報告精彩依舊,馬薩
2008年11月30日下午,質譜沙龍第十四期活動在中國食品發酵研究院會議室舉行。來自發酵研究院、清華大學、二炮總醫院、朝陽醫院、北大醫學院、北醫三院、安貞醫院、空軍總醫院、中科院植物所、中科院過程工程所、AB公司的各位專家、老師、學生20余人。  
諾華(Novartis)制藥 Wang, Karen(王瑛琪)教授 來自諾華(Novartis)制藥的Wang, Karen(王瑛琪)教授,做了題為“Application of Mass Spectrometry in Pharmaceutical Drug Discovery Research
中國科學院大連化學物理研究所 許國旺研究員 來自中國科學院大連化學物理研究所的許國旺研究員做了題為“液相色譜-質譜用于代謝標志物的發現和鑒定”的報告。許老師提出,現在是一個組學的時代,代謝組學作為最主要的組學之一,目前在疾病研究、藥物研發及職務和微生物等領域均得到重視。 代謝組學是研
Waters推出質譜和分離科學的先進技術,幫助實驗室加速研發,提高效率和通量 新產品包括:Xevo TQ質譜儀,使先進的質譜定量更容易 2008年6月2日,丹佛 沃特世公司(NYSE:WAT)今天在第56屆質譜大會上,推出幾項質譜創新技術,包括Waters Xevo? TQ質譜系統——先進的串
分析測試百科網訊 2020年12月11日,2020年北京色譜年會在北京世紀金源香山商務酒店隆重舉行。本次年會由北京理化分析測試技術學會、北京色譜學會主辦,旨在促進北京地區色譜技術的應用與交流,了解色譜技術的發展趨勢,同時得到了色譜專家及色譜工作者的積極支持與熱烈響應。本屆色譜年會的主題是“色譜質