基因克隆技術概述
基因克隆技術是分子生物學的核心技術，其目的是獲得某一基因或DNA片段的大量拷貝，用于深入分析基因的結構與功能，并可達到人為改造細胞以及物種遺傳性狀的目的。基因克隆的一項關鍵技術是DNA重組技術，它利用酶學方法將不同來源的DNA分子進行體外特異性切割，重新拼接組裝成一個新的雜合DNA分子。在此基礎上將雜合DNA分子轉入一定宿主細胞中進行擴增，形成大量的子代分子，此過程稱基因克隆。有目的地通過基因克隆技術，人為操作改造基因，改變生物遺傳性狀的系列過程總稱為基因工程。基因克隆的一般程序為：一、獲取目的基因目的基因就是需要研究的特定基因或DNA片段。獲取目的基因的主要方法：1、用限制性內切酶酶解染色體DNA，構建基因組文庫，再從基因組文庫中篩選目的基因。該法的優點是獲得的目的基因的組織結構與天然基因完全相同，在結構基因中也含有內含子序列，但是也正因為這一點構成了該法最大缺點，即含有內含子的基因在原核細胞中不能表達。原因是原核細胞不能識別......閱讀全文
基因克隆技術概述
基因克隆技術是分子生物學的核心技術，其目的是獲得某一基因或DNA片段的大量拷貝，用于深入分析基因的結構與功能，并可達到人為改造細胞以及物種遺傳性狀的目的。基因克隆的一項關鍵技術是DNA重組技術，它利用酶學方法將不同來源的DNA分子進行體外特異性切割，重新拼接組裝成一個新的雜合DNA分子。在此基礎上將
基因克隆技術
一、目的基因的獲得目的基因是指所要研究或應用的基因，也就是將要克隆或表達的基因。獲得目的基因是分子克隆過程中最重要的一步。目前用于獲得目的基因的方法有幾種，如限制性內切酶直接分離法、文庫篩選法、體外擴增法和人工合成法等，其中限制性內切酶法直接分離目的基因和多聚酶鏈式反應（PCR）或逆轉錄-多聚酶鏈式
基因克隆技術
一、目的基因的獲得 目的基因是指所要研究或應用的基因，也就是將要克隆或表達的基因。獲得目的基因是分子克隆過程中最重要的一步。目前用于獲得目的基因的方法有幾種，如限制性內切酶直接分離法、文庫篩選法、體外擴增法和人工合成法等，其中限制性內切酶法直接分離目的基因和多聚酶鏈式反應（PCR）或逆轉錄-
基因克隆技術1
一、目的基因的獲得目的基因是指所要研究或應用的基因，也就是將要克隆或表達的基因。獲得目的基因是分子克隆過程中最重要的一步。目前用于獲得目的基因的方法有幾種，如限制性內切酶直接分離法、文庫篩選法、體外擴增法和人工合成法等，其中限制性內切酶法直接分離目的基因和多聚酶鏈式反應（PCR）或逆轉錄-多聚酶鏈式
GeneCopoeia基因克隆技術相關研究
與PCR、qPCR等技術一樣，作為分子實驗室必備手段，分子克隆技術被廣泛用于多樣的基因功能研究。所謂分子克隆指的是在體外將核酸分子插入病毒、質粒或其他載體分子，構成遺傳物質的新組合，使之進入宿主細胞內并獲得持續穩定增殖能力和表達。?基因克隆技術的發展經歷3個階段，第一階段為經典的T4 DNA連接酶介
基因印記與動物克隆技術
基因印記 (imprinting) 對核移植后基因組重新編程的影響。基因印記現象在哺乳動物的發育過程中普遍存在,它是指基因的表達與否取決于它們是在父源染色體上還是母源染色體上。有些印記基因只從母源染色體上表達,而有些則只從父源染色體上表達。基因印記與動物克隆技術的成功及不足有何關系值得深入研究。
原核表達——基因克隆技術
原核表達可以用于檢測（1）發生在原核生物內的基因表達。（2）通過基因克隆技術，將外源目的基因，通過構建表達載體并導入表達菌株的方法，使其在特定原核生物或細胞內表達。實驗方法原理一個完整的表達系統通常包括配套的表達載體和表達菌株。如果是特殊的誘導表達還包括誘導劑，如果是融合表達還包括純化系統或者Tag
常用的植物目的基因克隆技術
1、通過已知基因產物的分析和鑒定這類技術主要通過生物化學和病理學研究分離鑒定有關基因的蛋白產物，并對蛋白質氨基酸順序進行分析，推斷出編碼該蛋白質的基因序列，然后通過抗體、寡聚核苷酸探針或PCR制備的探針對文庫進行篩選來分離目的基因。如植物抗病蟲基因工程中常用的蘇云金桿菌殺蟲晶體蛋白基因（Bt基因）、
基因克隆技術（Gene－Cloning－Techniques）2
二、目的基因和載體的連接 獲得目的基因后必須將其放在一定的載體內才能在宿主細胞內擴增或表達。目的基因與載體的連接及其后續的轉化過程習慣上稱為克隆（cloning）。由于目前很多基因都是利用PCR技術獲得，因此這里先介紹PCR產物的克隆策略，然后再介紹其他的克隆方式。 （一
基因克隆技術（Gene－Cloning－Techniques）2
二、目的基因和載體的連接獲得目的基因后必須將其放在一定的載體內才能在宿主細胞內擴增或表達。目的基因與載體的連接及其后續的轉化過程習慣上稱為克隆（cloning）。由于目前很多基因都是利用PCR技術獲得，因此這里先介紹PCR產物的克隆策略，然后再介紹其他的克隆方式。（一）PCR產物的克隆策略獲得PCR
特異正常基因的分離與克隆技術介紹
特異正常基因的分離與克隆：應用重組DNA和分子克隆技術結合基因定位研究成果，已有不少基因并將會有更多人類基因被分離和克隆，這是基因治療的前提，在當代分子生物技術條件下，一般來說，只要有基因探針和準確的基因定位，任何基因都可被克隆。除此，如今既可人工合成DNA探針，還可用DNA合成儀在體外人工合成基因
分子克隆技術在基因治療方面的應用
通過遺傳工程看到癌細胞具有逆轉為正常細胞的可能性，例如SV40病毒引起的小鼠腫瘤細胞，在溫度高時可逆轉為正常細胞。為治療半乳糖血癥，用帶有大腸桿菌乳糖操縱子的λ噬菌體去感染半乳糖血癥患者的離體培養細胞，發現這種細胞的半乳糖苷酶達到了正常水平，并確實能代謝半乳糖。
克隆技術（九）
生物學應用 在生物學上，克隆通常用在兩個方面：克隆一個基因或是克隆一個物種。克隆一個基因是指從一個個體中獲取一段基因（例如通過PCR的方法），然后將其插入。另外在動物界也有無性繁殖，不過多見于非脊椎動物，如原生動物的分裂繁殖、尾索類動物的出芽生殖等。但對于高級動物，在自然條件下，一般只 能進行有
克隆技術（八）
技術應用日本理化研究所的科學家借助用克隆動物培育克隆動物的“再克隆”技術，成功地用一只實驗鼠培育出了26代共598只實驗鼠，而且克隆的實驗鼠很健康，繁殖能力和壽命與一般實驗鼠也沒有區別。研究人員認為，這說明再克隆可以無限持續下去。該研究作為封面故事發表在了3月7日的《細胞-干細胞》(Cell Ste
克隆技術（十）
克隆多利羊1996年7月5日克隆出一只基因結構與供體完全相同的小羊“多利”（Dolly），世界輿論為之嘩然。“多利”的特別之處在于它的生命的誕生沒有精子的參與。研究人員先將一個綿羊卵細胞中的遺傳物質吸出去，使其變成空殼，然后從一只6歲的母羊身上取出一個乳腺細胞，將其中的遺傳物質注入卵細胞空殼中。這克
克隆技術（一）
克隆是英文"clone"或"cloning"的音譯，而英文"clone"則起源于希臘文"Klone"，原意是指以幼苗或嫩枝插條，以無性繁殖或營養繁殖的方式培育植物，如扦插和嫁接。很多植物都是通過克隆這樣的無性生殖方式從單一植株獲得大量的子代個體。在生物學上，是指選擇性地復制出一段DNA序列（分子克隆
克隆技術（三）
克隆定義克隆的定義（一）克隆豬 科學家把人工遺傳操作動物繁殖的過程叫“克隆”，這門生物技術叫“克隆技術”，其本身的含義是無性繁殖（中國大陸的翻譯），即由同一個祖先細胞分裂繁殖而形成的純細胞系，該細胞系中每個細胞的基因彼此相同。 克隆也可以理解為復制、拷貝（港澳臺的意譯），就是從原型中產生出同樣的
克隆技術（十一）
克隆的其他綿羊:1997年，多利（Dolly）獼猴:2000年1月，Tetra，雌性豬:2000年3月，5只蘇格蘭PPL小豬；8月，Xena，雌性牛:2001年，Alpha和Beta，雄性貓:2001年底，CopyCat（CC），雌性鼠:2002年兔:2003年3-4月分別在法國和朝鮮獨立地實現；騾
克隆技術（四）
克隆的定義（二） 克隆（clone）是指通過無性生殖而產生的遺傳上均一的生物群，即具有完全相同的遺傳組成的一群細胞或者生物的個體。克隆在希臘語中是“小樹枝葉”的意思，用以指無性增殖物。現在則指個體、細胞、基因等不同水平上的無性增殖物。（1）個體水平：在植物的無性增殖中，植物的發芽、插條等由同一個體
克隆技術（十二）
應用前景奇妙的克隆克隆技術已展示出廣闊的應用前景，概括起來大致有以下四個方面：（1）培育優良畜種和生產實驗動物；（2）生產轉基因動物；（3）生產人胚胎干細胞用于細胞和組織替代療法；（4）復制瀕危的動物物種，保存和傳播動物物種資源。以下就生產轉基因動物和胚胎干細胞作簡要說明。克隆山羊轉基因動物研究是動
克隆技術（二）
定義概述克隆技術? ? ? [1]克隆是英文“clone”一詞的音譯，在臺灣與港澳一般意譯為復制或轉殖，是利用生物技術由無性生殖產生與原個體有完全相同基因組之后代的過程.科學家把人工遺傳操作動物繁殖的過程叫克隆，這門生物技術叫克隆技術，其本身的含義是無性繁殖，即由同一個祖先細胞分裂繁殖而形成的純細胞
克隆技術（十三）
克隆利弊克隆技術選自2000年11月8日《文匯報》文字我們所說的生物技術的利和弊主要指的是克隆，其利和弊是：利:1) 克隆技術可解除那些不能成為母親的女性的痛苦。2) 克隆實驗的實施促進了遺傳學的發展，為“制造”能移植于人體的動物器官開辟了前景。3) 克隆技術也可用于檢測胎兒的遺傳缺陷。將受精卵克隆
亞克隆技術
一、目的與原理限制性內切酶是一類能識別雙鏈DNA分子中特異核苷酸序列的DNA水解酶，該類酶是體外剪切基因片段的重要工具。實驗主要通過EcoR Ⅰ,Hind Ⅲ兩種限制性內切酶對λ DNA的單切酶、雙切酶及部分酶切的操作，掌握內切酶的實驗操作技術。二、材料與試劑1．材料：λDNA2．儀器：離心機，恒溫
克隆技術（七）
研究成果克隆羊“多利”的誕生在全世界掀起了克隆研究熱潮，隨后，有關克隆動物的報道接連不斷。1997年3月，即“多利”誕生后近1個月的時間里，美國、中國臺灣和澳大利亞科學家分別發表了他們成功克隆猴子、豬和牛的消息。不過，他們都是采用胚胎細胞進行克隆，其意義不能與“多利”相比。同年7月，羅斯林研究所和P
克隆技術（十四）
中國應用作為新世紀的尖端科學，克隆技術從它誕生的那一刻起就吸引了眾多世人的目光。作為世界最大的發展中國家，中國一直在致力于前沿科學的研究。據目前的狀況來看，克隆作為新興的技術在中國得到前所未有的關注而且碩果累累：1、2000年6月16日，由西北農林科技大學動物胚胎工程專家張涌教授培育的世界首例成年體
克隆技術（六）
發展時期克隆技術，經歷了三個發展時期：第一個時期是微生物克隆，即用一個細菌很快復制出成千上萬個和它一模一樣的細菌，而變成一個細菌群；第二個時期是生物技術克隆，比如用遺傳基因――DNA克隆；第三個時期是動物克隆，即由一個細胞克隆成一個動物。克隆綿羊“多利”由一頭母羊的體細胞克隆而來，使用的便是動物克隆
克隆技術（五）
技術來源“克隆”一詞于1903年被引入園藝學，以后逐漸應用于植物學、動物學和醫學等方面。廣泛意義上的“克隆”其實是我們的日常生活中經常遇到，只是沒叫它“克隆”而已。 在自然界，有不少植物具有先天的克隆本能，如番薯、馬鈴薯、玫瑰等的插枝繁殖的植物。而動物的克隆技術，則經歷了由胚胎細胞到體細胞的發展過程
基因檢測概述
基因檢測是通過血液、其他體液、或細胞對DNA進行檢測的技術。在基因檢測中，取被檢測者外周靜脈血或其他組織細胞，擴增其基因信息后，通過特定設備對被檢測者細胞中的DNA分子信息作檢測，分析它所含有的基因類型和基因缺陷及其表達功能是否正常的一種方法，從而使人們能了解自己的基因信息，明確病因或預知身體患
基因定位概述
? 基因組是生物的生殖細胞中所含全部基因的總和。人類基因組具有極其復雜的結構，其編碼蛋白質的結構基因大約有100 000個，每個單倍體DNA含有3.2×109 bp，分布在24條常染色體和X，Y性染色體上。此外，還含有大量的非編碼的重復DNA序列。基因定位（gene location)是
分子克隆技術的特點
1. 有些生物，如RNA病毒沒有DNA，只能用cDNA克隆； 2. cDNA克隆易篩選，因為cDNA庫中不包含非結構基因的克隆，而且每一cDNA克隆只含一個mRNA的信息； 3. cDNA能在細菌中表達。cDNA僅代表某一發育階段表達出來的遺傳信息，只有基因文庫才包含一個生物的完整遺傳信息。