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二、目的基因和載體的連接 獲得目的基因后必須將其放在一定的載體內才能在宿主細胞內擴增或表達。目的基因與載體的連接及其后續的轉化過程習慣上稱為克隆（cloning）。由于目前很多基因都是利用PCR技術獲得，因此這里先介紹PCR產物的克隆策略，然后再介紹其他的克隆方式。 （一）PCR產物的克隆策略 獲得PCR產物通常只是克隆的第一步。無論研究的起始材料是RNA還是DNA，最重要的是要有一種有效的方法對PCR產物進行克隆。目前已建立了多種對PCR產物進行克隆的方法，具體選擇哪種方法取決于以下幾個因素：PCR產物序列是否已知；載體上有哪些單一的限制性酶切位點可以利用；克隆PCR產物的用途等。 1. 限制性內切酶酶切位點添加法 對PCR產物進行克隆的一個基本方法是利用目的片段所特有的限制性內切酶識別位點對產物進行酶切消化。一般是在設計PCR引物時就要考慮到連接方式，直接在引物末端包含與載體相匹配的限......閱讀全文
摘 要： RACE是一種快速克隆cDNA末端的方法，目前, 該方法被廣泛應用于未知堿基序列基因的克隆，尤其是SMART RACE技術更為人們所青睞。本文總結了我們實驗室用SMART RACE技術克隆基因的一些心得體會，希望對用RACE方法克隆基因的同行有些幫助。關鍵詞： RACE; RN
人類基因組計劃的主要任務之一就是要從大片段基因組區域或整條染色體DNA 上鑒定出基因表達序列(gene expressed sequences)或轉錄單位(transcription units)。在人類基因組30億個堿基對中，發生轉錄的表達序列(即基因)僅占總序列的3～5％。基因組中絕大部
5月29日下午，上海交大生命學院召開推進學院文化建設動員會。學院院長鄧子新院士在講話中，就如何開展實驗室文化建設和學院教師分享了他多年的心得。鄧院士認為，學校開展校園精神文化建設，生命學院應趁勢而上，積極推進學院精神文化建設，無論把這個活動納入全國的大框架，還是小到一個研究組，一個辦公室，都是一個及
醫學遺傳學借助于現代生物學的研究方法，在遺傳學理論指導和實驗方法廣泛采用的基礎上發展起來的。人類在遺傳學中獲得的每一新的成就都非常迅速地應用于研究人類的疾病，因而醫學遺傳學近年來得以突飛猛進。 醫學遺傳學早期受孟德爾、摩爾根經典遺傳學的指引，對遺傳病的來源及傳遞方式作了樸
常用生物軟件（windows)全面介紹一、基因芯片1、基因芯片綜合分析軟件。 ArrayVision 7.0 一種功能強大的商業版基因芯片分析軟件，不僅可以進行圖像分析，還可以進行數據處理，方便protocol的管理功能強大，商業版正式版：6900美元。 Arraypro 4.0
隨著人類基因組計劃（human genome project ）在2003年順利完成，基因組測序技術取得了長足的進步，這直接導致了每兆基因組成本的大幅下降以及檢測的基因組數量越來越多。人們對基因組的復雜性深感震驚，這也引導著測序技術的進一步發展。最近的一些突破性技術使得測序技術在更短的時間內可以
摘要：基因芯片技術是90年代中期以來快速發展起來的分子生物學高新技術，是各學科交叉綜合的嶄新科學。其原理是采用光導原位合成或顯微印刷等方法，將大量DNA探針片段有序地固化予支持物的表面，然后與已標記的生物樣品中DNA分子雜交，再對雜交信號進行檢測分析，就可得出該樣品的遺傳信息。基因芯片技術目前國內
真核生物中，從個體的生長、發育、衰老、死亡，到組織的得化、調亡以及細胞對各種生物、理化因子的應答，本質上都涉及基因的選擇性表達。高等生物大約有30000個不同的基因，但在生物體內任意8細胞中只有10%的基因的以表達，而這些基因的表達按特定的時間和空間順序有序地進行著，這種表達的方式即為基因的差異表達
基因定位和基因圖對遺傳學、醫學和人類及生物進化的研究都有十分重要的意義。它可提供遺傳病和其他疾病的診斷的遺傳信息，可以指導對這些疾病的致病基因的克隆和對病癥病因的分析與認識，這些又取決于遺傳圖和物理圖的相互依賴關系。通過多態位點標記進行連鎖分析獲得物理圖的位置有助于遺傳作圖，同時通過連
Application of Electroporation in Gene Transfer and Animal Embryo Cloning 郝新保 范清宇 Hao Xin-bao Fan Qing-yu 第四軍醫大學全軍骨腫瘤研究所 西安 710038 Institute of Orthop
Application of Electroporation in Gene Transfer and Animal Embryo Cloning 郝新保 范清宇 Hao Xin-bao Fan Qing-yu 第四軍醫大學全軍骨腫瘤研究所 西安 710038 Insti
Application of Electroporation in Gene Transfer and Animal Embryo Cloning郝新保 范清宇 Hao Xin-bao Fan Qing-yu第四軍醫大學全軍骨腫瘤研究所 西安 710038Institute of Orthopedi
2．第二代分子標記2.1 SSR標記技術 在真核生物基因組中存在許多非編碼的重復序列，如重復單位長度在15～65個核苷酸的小衛星DNA(Minisatellite DNA)，重復單位長度在2～6個核苷酸的微衛星DNA(Microsatellite DN
摘要：基因芯片技術是90年代中期以來快速發展起來的分子生物學高新技術，是各學科交叉綜合的嶄新科學。其原理是采用光導原位合成或顯微印刷等方法，將大量DNA探針片段有序地固化予支持物的表面，然后與已標記的生物樣品中DNA分子雜交，再對雜交信號進行檢測分析，就可得出該樣品的遺傳信息。基因芯片技術目前國
生物芯片技術是隨著"人類基因組計劃"(human genome project, HGP)的進展而發展起來的，它是90年代中期以來影響最深遠的重大科技進展之一，它融微電子學、生物學、物理學、化學、計算機科學為一體的高度交叉的新技術，具有重大的基礎研究價值，又具有
來自山東農業大學生命科學學院發現了連接植物miRNA和環境脅迫之間的調控新機制，指出選擇性剪接在其中扮演的關鍵角色。相關成果公布在Molecular Cell雜志在線版上。 文章的通訊作者是山東農業大學生命科學學院院長鄭成超教授，其研究組主要研究方向包括：植物重要功能基因的克隆、鑒定與
基因芯片技術及其研究現狀和應用前景生物芯片技術是隨著“人類基因組計劃”（human genome project，HGP）的進展而發展起來的，它是90年代中期以來影響最深遠的重大科技進展之一，它融微電子學、生物學、物理學、化學、計算機科學為一體的高度交叉的新技術，具有重大的基礎研究價值，又具
劉曉燕 (公安縣人民醫院檢驗科，湖北公安434300)王 紅 (湖北中醫藥大學醫學檢驗與技術學院，湖北武漢430065)[關鍵詞] 臨床檢驗技術；耐藥基因；分子生物學技術一份準確全面的醫學檢驗報告是醫生做出準確診斷與制定正確治療方案必不可少的依據。因此，臨床醫學檢驗是一門極其重要的醫學學科
摘要：基因芯片技術是90年代中期以來快速發展起來的分子生物學高新技術，是各學科交叉綜合的嶄新科學。其原理是采用光導原位合成或顯微印刷等方法，將大量DNA探針片段有序地固化予支持物的表面，然后與已標記的生物樣品中DNA分子雜交，再對雜交信號進行檢測分析
第一節 概述 聚合酶鏈反應或多聚酶鏈反應（Polymerase Chain Reaction, PCR），又稱無細胞克隆技術(“free bacteria”cloning technique)，是一種對特定的DNA片段在體外進行快速擴增的新方法。該方法一改傳統分子克隆技術的模式，不通過活細胞，操作
生物芯片技術是隨著"人類基因組計劃"（human genome project, HGP）的進展而發展起來的，它是90年代中期以來影響最深遠的重大科技進展之一，它融微電子學、生物學、物理學、化學、計算機科學為一體的高度交叉的新技術，具有重大的基礎研究價值，又具有明顯的產
摘要：PCR技術是一種體外擴增特定DNA序列的方法。該技術以其高特異性和靈敏度等優點已廣泛用于各領域。本文主要對PCR技術的原理及其在一次性使用衛生用品微生物檢測的應用前景等方面進行綜述。 隨著科學研究的進步，各種新技術不斷形成且廣泛應用于各個領域。人們對一些生物指標的檢測手段也進
細胞是動物和人體的基本組成單元，細胞與細胞內的通信,是依靠其膜上的離子通道進行的，離子和離子通道是細胞興奮的基礎，亦即產生生物電信號的基礎，生物電信號通常用電學或電子學方法進行測量。由此形成了一門細胞學科—電生理學（electrophysiology），即是用電生理的方法來記錄和分析細胞產生電的大小
基因敲除可以說是基因組 學、細胞分離培養以及轉基因技術的組合。那么基因敲除的原理是什么呢？ 基因敲除的方法有哪些呢？在此，做個小結，以供大家學習。一.概述：基因敲除是自80年代末以來發展起來的一種新型分子 生物學技術，是通過一定的途徑使機體特定的基因失活或缺失的技術。通常意義上的基因敲除主要是應用D
劉光清 劉在新 謝慶閣(中國農業科學院蘭州獸醫研究所農業部畜禽病毒學重點開放實驗室,蘭州730046)摘 要: 反向遺傳技術是一種新興的分子生物學技術, 已廣泛應用于生命科學研究的各個領域。綜述反向遺傳技術研究進展,并討論該技術在口蹄疫病毒研究中的應用。關鍵詞: 反向遺傳學 反向遺傳技術 全長c
在我們生存的自然界里，除了單細胞生物、少數低等生物，絕大多數的生物從小到大都遵循著一個相同的規律——由一個受精卵發育形成。 就像是父母的精卵結合，產生了受精卵，受精卵開始快速的生長分裂，經歷四細胞期、八細胞期后形成桑椹胚，直到胚胎干細胞有了明顯的分化進而發育成囊胚，原腸胚，最后發育成一個各器官
基因的克隆就是利用體外重組 技術，將特定的基因和其它DNA順序插入到載體分子中。基因克隆的主要目標是識別、分離特異基因并獲得基因的完整的全序列，確定染色體定位，闡明基因的生化功能，明確其對特定性狀的遺傳控制關系。通過幾十年的努力由于植物發育，生理生化，分子遺傳等學科的迅速發展，使人們
基因的克隆就是利用體外重組技術，將特定的基因和其它DNA順序插入到載體分子中。基因克隆的主要目標是識別、分離特異基因并獲得基因的完整的全序列，確定染色體定位，闡明基因的生化功能，明確其對特定性狀的遺傳控制關系。通過幾十年的努力由于植物 發育，生理生化，分子遺傳等學科的迅速發展，使人們
摘要：本文論述了轉基因農產品、食品的安全性問題以及對轉基因食品從基因、基因轉錄、基因翻譯表達三個層面的檢測技術做了概述。 關鍵詞：轉基因食品 轉基因農產品 食品安全 生物技術 檢測技術 Abstract: discuss on the question Gen
基因治療（genetherapy）：指用（正常或野生型）基因導入人體的細胞，使其發揮生物學效應，從而達到治療疾病目的的技術方法。 基因治療是隨著20世紀七八十年代DNA重組技術、基因克隆技術等的成熟而發展起來的最具革命性的醫療技術之一，它是以改變人的遺傳物質為基礎的生物醫學治療手段，在重大