放射性同位素標記的DNA序列測定分析
測定DNA 的核苷酸序列是分析基因結構與功能關系的前提。從小片段重疊法到加減法、雙脫氧鏈終止法、化學降解法、自動測序，DNA 測序技術發展很快。目前在實驗室手工測序常用Sanger雙脫氧鏈終止法。Sanger法就是使用DNA 聚合酶和雙脫氧鏈終止物測定DNA 核苷酸序列的方法。它要求使用一種單鏈的DNA 模板或經變性的雙鏈DNA 模板和一種恰當的DNA 合成引物。其基本原理是DNA 聚合酶利用單鏈的DNA 模板，合成出準確互補鏈，在合成時，某種dNTP換成了ddNTP，這時，DNA 聚合酶利用2’，3’-雙脫氧核苷三磷酸作底物，使之摻入到寡核苷酸鏈的3’末端，導致3’末端無3＇-OH，從而終止DNA 鏈的生長，雙脫氧核苷酸的種類不同，摻入的位置不同就造成了在不同的專一位置終止的長度不同的互補鏈。通過摻入放射性核苷酸和聚丙烯酰胺凝膠電泳，即可讀出模板DNA 的互補鏈序列。一、 試劑準備1. 硅化液：四氯化碳......閱讀全文
什么是放射性同位素標記法
簡單的說，就是用放射性元素標記分子，然后觀測這個分子在代謝和生命活動中的變化。因為只有標記了放射性，這些分子才能被觀測到。
什么是放射性同位素標記法
3H標記亮氨酸追蹤分泌蛋白的合成與分泌過程,首先出現在核糖體--內質網--高爾基體---細胞膜18O標記水和二氧化碳中的氧原子,明確光合作用的氧氣中的氧全部來自于水.14C 標記二氧化碳,光合作用的暗反應過程（卡爾文循環）碳原子轉移途徑.CO2--C3--(CH2O)15N標記脫氧核苷酸,DNA的半
放射性同位素標記的DNA序列測定分析
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 使用一種單鏈的DNA 模板或經變性的雙鏈DNA 模板和一種恰當的DNA 合成引物。DNA 聚合酶利用單鏈的DNA 模板，合成出準確互補鏈，在合成時，某種dNTP換成了ddNTP，這時，DNA 聚合酶利用2’，3’-雙脫氧
放射性同位素標記的DNA序列測定分析
放射性同位素標記的DNA序列測定分析可應用于分析基因結構與功能關系。實驗方法原理使用一種單鏈的DNA 模板或經變性的雙鏈DNA 模板和一種恰當的DNA 合成引物。DNA 聚合酶利用單鏈的DNA 模板，合成出準確互補鏈，在合成時，某種dNTP換成了ddNTP，這時，DNA 聚合酶利用2’，3’-雙脫氧
放射性同位素標記的DNA序列測定分析
放射性同位素標記的DNA序列測定分析??? 測定DNA的核苷酸序列是分析基因結構與功能關系的前提。從小片段重疊法到加減法、雙脫氧鏈終止法、化學降解法、自動測序，DNA測序技術發展很快。目前在實驗室手工測序常用Sanger雙脫氧鏈終止法。Sanger法就是使用DNA聚合酶和雙脫氧鏈終止物測定DNA核苷
放射性同位素標記的DNA序列測定分析
測定DNA 的核苷酸序列是分析基因結構與功能關系的前提。從小片段重疊法到加減法、雙脫氧鏈終止法、化學降解法、自動測序，DNA 測序技術發展很快。目前在實驗室手工測序常用Sanger雙脫氧鏈終止法。Sanger法就是使用DNA 聚合酶和雙脫氧鏈終止物測定DNA 核苷酸序列的方法。它要求使用一種
質譜技術鑒定放射性同位素標記
為了更直觀快速地鎖定代謝產物，獲取更多的代謝產物結構信息，人們引入了放射性同位素標記鑒定。該法是尋找、鑒定代謝產物非常直觀有效的方法，適用于所有有機化合物的分析，其常用方法分為2類，一類是直接標記，另一類是間接標記。放射性同位素直接標記是在進行代謝反應前對所研究化合物進行放射性同位素標記，藥物經代謝
穩定同位素標記多肽
隨著多肽在生物醫藥領域越來越廣泛和深入的應用，標記和修飾性的多肽種類的需求越來越多，質量需求也越來越高。穩定同位素標記就是其中典型的一種。穩定同位素標記示蹤，可以實現肽類代謝途徑研究，能夠隨時追蹤含有同位素標記的多肽在體內或體外位置及數量的變化情況。同位素標記具有高靈敏度、定位簡單、定量準確等優點，
同位素標記的概念
同位素標記是化合物中的原子被其同位素(放射性同位素或穩定同位素)的示蹤原子所取代的標記。
同位素標記的探針和非同位素標記的探針的特點和應用
同位素標記的探針通常有很高的放射比活性，雜交的靈敏度高，但使用期限短，且有放射性危害，污染物處置困難，需要特殊的儀器和設備，不適用于普通實驗室。近年來非同位素標記法得到很大發展，如酶促標記法（如生物素、地高辛標記法）和化學標記法（如熒光生物素、酶標記法）。非同位素標記的探針保存時間較長、避免了同位素
DNA探針的非同位素標記
實驗方法原理 進行Southern雜交分析時應標記不帶載體的插入片段作為探針,常用的標記方法耗時很長,它包括將質粒或λDNA經限制性內切酶酶解后分離插入片段,用切口平移法或隨機引物標記法進行標記。相比之下,采用PCR聚合酶鏈式反應法標記探針有幾個優點,只需極少量的質粒DNA(50ng)作模板即可擴增
DNA探針的非同位素標記
實驗方法原理進行Southern雜交分析時應標記不帶載體的插入片段作為探針,常用的標記方法耗時很長,它包括將質粒或λDNA經限制性內切酶酶解后分離插入片段,用切口平移法或隨機引物標記法進行標記。相比之下,采用PCR聚合酶鏈式反應法標記探針有幾個優點,只需極少量的質粒DNA(50ng)作模板即可擴增出
同位素標記法的實驗過程
測量方法分為絕對測量和相對測量。絕對測量是對樣品的實有放射性強度作測量，求出樣品中標記同位素的實際衰變率，在作絕對測量時，要糾正一些因素對測量結果的影響，這些因素包括儀器探頭對于放射源的相對立體角、射線被探頭接收后被計數的幾率、反散射、 放射源的自吸收影響等等。而相對測量只是在某個固定的探測儀器上作
穩定同位素標記技術的原理
高中生物實驗中涉及的同位素標記主要有3H、18O、14C、42K、131I、35S、32P、15N等，那么這些元素是否都具有放射性呢？其實不然！所謂同位素是指具有相同原子序數（即質子數相同，因而在元素周期表中的位置相同），但質量數不同，亦即中子數不同的一組核素。如果某同位素能夠自發地從原子核內部放出
穩定同位素標記技術的原理
高中生物實驗中涉及的同位素標記主要有3H、18O、14C、42K、131I、35S、32P、15N等，那么這些元素是否都具有放射性呢？其實不然！所謂同位素是指具有相同原子序數（即質子數相同，因而在元素周期表中的位置相同），但質量數不同，亦即中子數不同的一組核素。如果某同位素能夠自發地從原子核內部放出
穩定同位素標記技術的原理
高中生物實驗中涉及的同位素標記主要有3H、18O、14C、42K、131I、35S、32P、15N等，那么這些元素是否都具有放射性呢？其實不然！所謂同位素是指具有相同原子序數（即質子數相同，因而在元素周期表中的位置相同），但質量數不同，亦即中子數不同的一組核素。如果某同位素能夠自發地從原子核內部放出
穩定同位素標記技術的原理
高中生物實驗中涉及的同位素標記主要有3H、18O、14C、42K、131I、35S、32P、15N等，那么這些元素是否都具有放射性呢？其實不然！所謂同位素是指具有相同原子序數（即質子數相同，因而在元素周期表中的位置相同），但質量數不同，亦即中子數不同的一組核素。如果某同位素能夠自發地從原子核內部放出
介紹DNA探針的同位素標記方法
1.缺口平移法(nick translation)缺口平移法是最常用的探針標記法,反應體系的主要成分有DNA酶I(DNase I)、大腸桿菌DNA聚合酶I(DNA polymerase I)、三種三磷酸脫氧核糖核苷酸、一種同位素標記的核苷酸(如dATP、dTTP、dCTP,”P—dGTP),其原理如
非同位素標記探針的酶法檢測
實驗材料 探針試劑、試劑盒 PBS鏈親和素HRPODAB雙氧水甘油二氨基聯苯胺儀器、耗材 蓋玻片水浴鍋實驗步驟 1. ?以生物素酰化探針與載玻片上樣品雜交并洗片（“熒光原位雜交實驗”基本方案1~6步）。2. ?由1×SSC中取出玻片，盡可能吸去殘留玻片上的緩沖液，但不要使玻片干涸。加200 μl 封
同位素標記親和標簽(ICAT)技術的技術原理
同位素親和標簽技術是一種用于蛋白質分離分析技術，此技術是蛋白質組研究技術中的核心技術之一。該技術用具有不同質量的同位素親和標簽(ICATs)標記處于不同狀態下的細胞中的半胱氨酸，利用串聯質譜技術，對混合的樣品進行質譜分析。來自兩個樣品中的同一類蛋白質會形成易于辨識比較的兩個不同的峰形，能非常準確的比
同位素標記親和標簽(ICAT)技術的技術原理
同位素親和標簽技術是一種用于蛋白質分離分析技術，此技術是蛋白質組研究技術中的核心技術之一。該技術用具有不同質量的同位素親和標簽( ICATs) 標記處于不同狀態下的細胞中的半胱氨酸，利用串聯質譜技術，對混合的樣品進行質譜分析。來自兩個樣品中的同一類蛋白質會形成易于辨識比較的兩個不同的峰形，能非常準確
放射免疫分析的同位素標記介紹
標記物標記物是指通過直接或間接的化學反應將放射性核素連接到被標記分子上所形成的化合物。制備高比度、高純度和具完整免疫活性的標記物是建立高質量放射免疫分析法的重要條件。在放射免疫技術中,常用的放射性核素有放射γ射線和β射線兩大類。前者主要為?125I、131I、57Cr 和 60Co;后者為3H、14
放射性核素標記技術的優缺點
穩定同位素和放射性同位素均可用來示蹤，但在實際應用中，穩定同位素具有放射性同位素無法比擬的優越性：（1）安全、無輻射，穩定同位素對動植物不會造成傷害，在使用、運輸和儲存的過程中比較方便；（2）半衰期長，放射性同位素因其半衰期太短而沒有實用性，限制了其應用，而穩定同位素的半衰期均大于1×1015年，因
“DNA探針”的分類及介紹
DNA探針分為兩類:同位素標記的探針和非同位素標記的探針。同位素標記的探針通常有很高的放射比活性,雜交的靈敏度高,但使用期限短,且有放射性危害,污染物處置困難,需要特殊的儀器和設備,不適用于普通實驗室。近年來非同位素標記法得到很大發展,如酶促標記法(如生物素、地高辛標記法)和化學標記法(如熒光生物素
同位素示蹤法代謝方法的介紹
同位素是指原子序數相同而原子量不同的同種元素。當化合物分子中的原子被相同元素的同位素所取代，而取代后的分子性質沒有改變時，稱為 “同位素標記”。同位素標記是研究體內代謝水平的常用方法，將同位素標記的化合物引進代謝體系來觀察其代謝過程與結果的方法就是同位素示蹤法。同位素有穩定同位素和放射性同位素兩
物質代謝檢查方法同位素示蹤法
同位素是指原子序數相同而原子量不同的同種元素。當化合物分子中的原子被相同元素的同位素所取代，而取代后的分子性質沒有改變時，稱為 “同位素標記”。同位素標記是研究體內代謝水平的常用方法，將同位素標記的化合物引進代謝體系來觀察其代謝過程與結果的方法就是同位素示蹤法。同位素有穩定同位素和放射性同位素兩種，
放射性核素數據（放射性核素衰變表、放射性測定單...2
3、原子量 符號 原子序數 原子量 錒（actinium） Ac 89 227.02
放射性核素數據（放射性核素衰變表、放射性測定單位...
放射性核素數據（放射性核素衰變表、放射性測定單位和原子量）-1 1、放射性核素衰變表 3 H 35
熒光標記和同位素標記有什么區別
熒光標記所依賴的化合物稱為熒光物質。熒光物質是指具有共軛雙鍵體系化學結構的化合物，受到紫外光或藍紫光照射時，可激發成為激發態，當從激發態恢復基態時，發出熒光。熒光標記技術指利用熒光物質共價結合或物理吸附在所要研究分子的某個基團上，利用它的熒光特性來提供被研究對象的信息。熒光標記的無放射物污染，操作簡
放射性氣溶膠的放射性氣溶膠
固體或液體放射性微粒懸浮在空氣或氣體介質中形成的分散體系。氣溶膠的基本特性是不穩定,小于0.1微米的微粒在氣體中作布朗運動,不因重力作用而沉降；1～10微米的微粒沉降緩慢，懸浮在空氣中較久。放射性氣溶膠的電離效應高、濃度低、微粒上易帶電（由放射性衰變產生）。放射性氣溶膠是造成人體內照射的主要威脅。