用于酶聯免疫測定(ELISA)酶的色原底物
辣根過氧化物酶的色原底物 HRP最常用的色原底物有鄰苯二胺(OPD)、2,2’—吖嗪—(3—乙酰苯基噻唑磺酸—6)[2,2’—azino-di(3—ethylben2thiazolinesulphonicacid-6),ABTS](雜環吖嗪)、四甲基聯苯胺(TMB)和4—氨基安替比林:苯酚耦聯底物對等。上述色原底物受HRP作用主要有兩種形式的反應:①氧化還原底物的氧化作用,如OPD、ABTS等;②一個氨基芳香劑與另一個芳香基化合物的氧化耦聯,如4—氨基安替比林:苯酚等。 (一)氧化還原色原底物 OPD被認為是HRP最為敏感的色原底物之一,其在HRP的作用下,由過氧化氫(H202) 氧化而聚合成2,2’—二氨基偶氮苯(DAB)。在pH5.0左右時,DAB在波長450nm處有廣范圍的最大吸收,當pH值降為1.0時,最大吸收波長移動至492nm,同時摩爾消光系數變大,顯色加深(圖4—2)。因而常用強酸......閱讀全文
用于酶聯免疫測定(ELISA)酶的色原底物
辣根過氧化物酶的色原底物 HRP最常用的色原底物有鄰苯二胺(OPD)、2,2’—吖嗪—(3—乙酰苯基噻唑磺酸—6)[2,2’—azino-di(3—ethylben2thiazolinesulphonicacid-6),ABTS](雜環吖嗪)、四甲基聯苯胺(TMB)和4—氨基安替比林:苯酚耦聯底
堿性磷酸酶(AP)的色原底物
在ELISA測定中,堿性磷酸酶的色原底物最常用的是對硝基苯磷酸鹽(p-nitropheny|phosate,)。在堿性磷酸酶的作用下生成對硝基酚(),其在入=405 nm處有最大吸收。由于堿性條件下的光吸收增強,并可使堿性磷酸酶失活,因而可使用碳酸鈉作為終止劑。二乙醇胺緩沖液中不能有單乙醇胺,因為單
酶免疫技術酶與底物
酶結合物是酶與抗原或者抗體、半抗原在交聯劑作用下聯結的產物,是 ELISA 成敗的關鍵試劑。它不僅具有抗原抗體的特異性反應,還具有酶促反應的特性,最終產生生物放大的特性。酶免疫反應中,最常用的酶是辣根過氧化物酶,HRP的催化反應需要底物過氧化氫(H2O2)和供氫體(DH2)。供氫體多為無色的還原型染
人降鈣素原(PCT)酶聯免疫分析
人降鈣素原(PCT)酶聯免疫分析試劑盒使用說明書本試劑僅供研究使用???????目的:本試劑盒用于測定人血清,血漿及相關液體樣本中降鈣素原(PCT)的含量。實驗原理:??本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人降鈣素原(PCT)水平。用純化的人降鈣素原(PCT)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的
酶免疫技術中酶和酶作用底物
酶和酶作用底物(一)酶的要求:?一個酶蛋白分子每分鐘可催化10 3 ~10 4 個底物分子轉變成有色產物。用于標記的酶應符合:1.酶的活性要強,催化反應的轉化率高,純度高。2.酶催化底物后產生的產物易于判斷或測量,方法簡單易行、敏感和重復性好。3.作用專一性強 ,酶活性不受樣品中其他成分的影響,受檢
小鼠胰島素原(PI)酶聯免疫分析
小鼠胰島素原(PI)酶聯免疫分析試劑盒使用說明書本試劑僅供研究使用???????目的:本試劑盒用于測定小鼠血清,血漿及相關液體樣本中胰島素原(PI)的含量。實驗原理:???本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中小鼠胰島素原(PI)水平。用純化的小鼠胰島素原(PI)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗
大鼠胰島素原(PI)酶聯免疫分析
大鼠胰島素原(PI)酶聯免疫分析試劑盒使用說明書本試劑僅供研究使用???????目的:本試劑盒用于測定大鼠血清,血漿及相關液體樣本中胰島素原(PI)的含量。實驗原理:???本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中大鼠胰島素原(PI)水平。用純化的大鼠胰島素原(PI)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗
大鼠心臟纖維原細胞(HCF)酶聯免疫分析
大鼠心臟纖維原細胞(HCF)酶聯免疫分析試劑盒使用說明書本試劑僅供研究使用???????目的:本試劑盒用于測定大鼠血清,血漿,細胞上清及相關液體樣本中心臟纖維原細胞(HCF)的含量。實驗原理:???本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中大鼠心臟纖維原細胞(HCF)水平。用純化的大鼠心臟纖維原細胞(HCF
免疫酶技術中常用的酶底物系統
各種免疫酶技術,最終都是以某種顯色反應而揭示待測物質來進行定性和定量分析。不同酶要選擇相應的底物,見下表。免疫酶技術中常用的酶-底物系統酶底物顯色反應測定波長/nm辣根過氧化物酶二氨基聯苯胺深褐色沉淀5-氨基水楊酸棕色449鄰苯二胺橘紅色492/460鄰聯甲苯胺藍色4254-硝基酚磷酸黃色400堿性
人碳酸酐酶(CA)酶酶聯免疫分析
人碳酸酐酶(CA)酶酶聯免疫分析(ELISA)試劑盒使用說明書本試劑僅供研究使用???????目的:本試劑盒用于測定人血清,血漿,組織及相關液體樣本中碳酸酐酶(CA)的含量。實驗原理:本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人碳酸酐酶(CA)水平。用純化的人碳酸酐酶(CA)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往
人ATP酶(ATPase)酶聯免疫分析
人ATP酶(ATPase)酶聯免疫分析試劑盒使用說明書本試劑僅供研究使用???????目的:本試劑盒用于測定人血清,血漿及相關液體樣本中ATP酶(ATPase)的含量。實驗原理:???本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人ATP酶(ATPase)水平。用純化的人ATP酶(ATPase)抗體包被微孔板,
什么是酶聯免疫
酶聯免疫法,簡稱ELISA。它的中心就是讓抗體與酶復合物結合,然后通過顯色來檢測。步驟其實很簡單:ELISA用血清來檢測,首先血液要經過至少半個小時的凝集,然后取血清(這是有些網友不理解為什么醫院抽完了血對血置之不理的原因,其實是誤會)。將酶復合物用稀釋液稀釋后,加血清及陰性、陽性對照,還有就是質控
什么是酶聯免疫
酶聯免疫法簡介 酶聯免疫吸附劑測定法,簡稱酶聯免疫法,或者ELISA法。 它的中心就是讓抗體與酶復合物結合,然后通過顯色來檢測。步驟 ELISA用血清來檢測,首先血液要經過至少半個小時的凝集,然后取血清。將酶復合物用稀釋液稀釋后,加血清及陰性、陽性對照,還有就是質控品(這是嚴格的要求,它的范
酶聯免疫法簡介
酶聯免疫法(Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay,ELISA)是將免疫技術發展為檢測體液中微量物質的固相免疫測定方法,用血清來進行檢測。 酶聯免疫法是利用抗體與酶復合物結合顯色的原理,并保持抗體免疫活性,其已成為分析化學領域中的前沿課題。
酶聯免疫分析缺點
①使抗原或抗體結合到某種固相載體表面,并保持其免疫活性。 ②使抗原或抗體與某種酶連接成酶標抗原或抗體,這種酶標抗原或抗體既保留其免疫活性,又保留酶的活性。在測定時,把受檢標本(測定其中的抗體或抗原)和酶標抗原或抗體按不同的步驟與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗
鯽魚卵黃蛋白原(vtg)酶聯免疫分析
鯽魚卵黃蛋白原(vtg)酶聯免疫分析試劑盒使用說明書本試劑僅供研究使用???????目的:本試劑盒用于測定鯽魚血清,血漿,細胞上清及相關液體樣本中卵黃蛋白原(vtg)的含量。實驗原理:??本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中鯽魚卵黃蛋白原(vtg)水平。用純化的鯽魚卵黃蛋白原(vtg)抗體包被微孔板,
酶聯免疫斑點實驗(ELIspot)——酶聯免疫斑點實驗(ELIspot)
實驗材料血液樣品細胞樣品試劑、試劑盒70%乙醇PBS脫脂奶粉鏈霉親和素檢測抗體包被抗體儀器、耗材PVDF膜96孔培養板硝基纖維素底板免疫斑點板酶標板實驗步驟一、包被96孔板?用70%乙醇浸潤96孔板中的PVDF膜30 s?加入捕獲抗體(PBS稀釋),4℃過夜?倒空板中包被液,輕輕在紙上拍干,用PBS
酶聯免疫斑點實驗(ELIspot)_酶聯免疫斑點實驗(ELIspot)2
實驗方法原理ELISPOT技術原理,一句話概括就是:用抗體捕獲培養中的細胞分泌的細胞因子,并以酶聯斑點顯色的方式將其表現出來。實驗材料細胞試劑、試劑盒PBSPBST乙醇包被抗體封閉液抗體稀釋液檢測抗體酶聯親和素AEC顯色液PHA刺激物U-Cytech無血清培養基儀器、耗材ELISPOT讀數儀超凈工作
大鼠5α還原酶Ⅱ酶聯免疫分析
大鼠5α-還原酶Ⅱ酶聯免疫分析試劑盒使用說明書本試劑僅供研究使用???????目的:本試劑盒用于測定大鼠血清,血漿,細胞上清及相關液體樣本中5α-還原酶Ⅱ的含量。實驗原理:???本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中大鼠5α-還原酶Ⅱ水平。用純化的大鼠5α-還原酶Ⅱ抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單
人端粒酶(TE)酶聯免疫說明
本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍:???????????????????????????????????????????????????????? ?96T1 IU/L -40 IU/L使用目的:本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關液體樣本中端粒酶(TE)含量。實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中
大鼠5α還原酶Ⅱ酶聯免疫分析
大鼠5α-還原酶Ⅱ酶聯免疫分析試劑盒使用說明書本試劑僅供研究使用???????目的:本試劑盒用于測定大鼠血清,血漿,細胞上清及相關液體樣本中5α-還原酶Ⅱ的含量。實驗原理:???本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中大鼠5α-還原酶Ⅱ水平。用純化的大鼠5α-還原酶Ⅱ抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單
酶免疫技術中酶和酶作用底物是怎么樣的呢?
酶和酶作用底物 (一)酶的要求: 一個酶蛋白分子每分鐘可催化10 3 ~10 4 個底物分子轉變成有色產物。用于標記的酶應符合: 1.酶的活性要強,催化反應的轉化率高,純度高。 2.酶催化底物后產生的產物易于判斷或測量,方法簡單易行、敏感和重復性好。 3.作用專一性強 ,酶活性不受樣品
鴨(T)酶聯免疫分析
鴨(T)酶聯免疫分析試劑盒使用說明書本試劑僅供研究使用???????目的:本試劑盒用于測定鴨血清,糞便及相關液體樣本中**(T)的含量。實驗原理:???本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中鴨**(T)水平。用純化的鴨**(T)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入**(T),再與HR
人(ASD)酶聯免疫分析
人(ASD)酶聯免疫分析試劑盒使用說明書本試劑僅供研究使用???????目的:本試劑盒用于測定人血清,血漿及相關液體樣本中雄烯二酮(ASD)的含量。實驗原理:本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人雄烯二酮(ASD)水平。用純化的人雄烯二酮(ASD)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加
酶聯免疫法的原理
①使抗原或抗體結合到某種固相載體表面,并保持其免疫活性。 ②使抗原或抗體與某種酶連接成酶標抗原或抗體,這種酶標抗原或抗體既保留其免疫活性,又保留酶的活性。在測定時,把受檢標本(測定其中的抗體或抗原)和酶標抗原或抗體按不同的步驟與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原
人(TotalT)酶聯免疫分析
人(TotalT)酶聯免疫分析試劑盒使用說明書本試劑僅供研究使用???????目的:本試劑盒用于測定人血清,血漿及相關液體樣本中總**(TotalT)的含量。實驗原理:???本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人總**(TotalT)水平。用純化的人總**(TotalT)抗體包被微孔板,制成固相抗體,
豬酶聯免疫分析(ELISA)
? 豬酶聯免疫分析(ELISA)試劑盒使用說明書本試劑僅供研究使用???????目的:本試劑盒用于測定豬血清,血漿及相關液體樣本中胰島素(Insulin)的含量。實驗原理:???本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中豬胰島素(Insulin)水平。用純化的豬胰島素(Insulin)抗體包被微孔板,制成固
什么是酶聯免疫法
酶聯免疫法是將免疫技術發展為檢測體液中微量物質的固相免疫測定方法,即酶聯免疫吸附測定法。1971年瑞典學者Engvall和Perlmann,荷蘭學者Van Weerman和Schuurs分別報道將免疫技術發展為檢測體液中微量物質的固相免疫測定方法,即酶聯免疫吸附測定法 (Enzyme-Linked
什么是酶聯免疫法
酶聯免疫法是將免疫技術發展為檢測體液中微量物質的固相免疫測定方法,即酶聯免疫吸附測定法。1971年瑞典學者Engvall和Perlmann,荷蘭學者Van Weerman和Schuurs分別報道將免疫技術發展為檢測體液中微量物質的固相免疫測定方法,即酶聯免疫吸附測定法 (Enzyme-Linked
小鼠酶聯免疫分析(ELISA)
小鼠酶聯免疫分析(ELISA)試劑盒使用說明書本試劑僅供研究使用???????目的:本試劑盒用于測定小鼠血清,血漿及相關液體樣本中(Insulin)含量。實驗原理:??本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中小鼠胰島素(Insulin)水平。用純化的小鼠胰島素(Insulin)抗體包被微孔板,制成固相抗體