白磷還原法制備膠體金分散顆粒
膠體金可用多種方法制備,其中應用較為廣泛的是化學還原法。這一方法的基本原理是在氯化金水溶液中加入一定量的還原劑,使金離子還原為金原子,可用于制備膠體金的還原劑有50余種,但在生物醫學領域內最為常用的還原劑是白磷、檸檬酸三鈉以及鞣酸等。 白磷還原法的建立已有近百年的歷史,由于此法操作較為簡便,制備出來的膠體金顆粒大小較一致,因而應用較為廣泛,現以Faulk和 Taylor(1971)的報道為基礎介紹這一方法。 (1)取1%氯化金1.5mli、0.1mol/LK2CO3 1. 2ml,加入120ml雙蒸水。 (2)上述溶液充分攪拌混勻3min以上。 (3)在攪拌條件下將1ml新鮮配制的20%飽和白磷乙醚溶液加入上述混合液中,約在5min內溶液變為棕紅色。 (4)將上述混合液加熱煮沸,直至變成鮮明的橙紅色為止,一般約需10min。 橙紅色的出現表明氯化金的還原反應終止,膠體金制備成功。按上述法制備的......閱讀全文
白磷還原法
在120ml雙蒸餾水中加入1.5ml1%氯金酸和1.4ml 0.1mol/L K2CO3,然后加入1ml五分之一飽和度的白磷乙醚溶液,混勻后室溫放置15分鐘,在回流下煮沸 直至紅褐色轉變為紅色。此法制得的膠體金直徑約 6nm,并有很好的均勻度,但白磷和乙醚均易燃易爆,一般實驗室不宜采用。要得
白磷還原法制備膠體金分散顆粒
膠體金可用多種方法制備,其中應用較為廣泛的是化學還原法。這一方法的基本原理是在氯化金水溶液中加入一定量的還原劑,使金離子還原為金原子,可用于制備膠體金的還原劑有50余種,但在生物醫學領域內最為常用的還原劑是白磷、檸檬酸三鈉以及鞣酸等。白磷還原法的建立已有近百年的歷史,由于此法操作較為簡便,制備出來的
白磷還原法制備膠體金分散顆粒
膠體金可用多種方法制備,其中應用較為廣泛的是化學還原法。這一方法的基本原理是在氯化金水溶液中加入一定量的還原劑,使金離子還原為金原子,可用于制備膠體金的還原劑有50余種,但在生物醫學領域內最為常用的還原劑是白磷、檸檬酸三鈉以及鞣酸等。 白磷還原法的建立已有近百年的歷史,由于此法操作較
膠體金分散顆粒制備實驗——白磷還原法
膠體金可用多種方法制備,其中應用較為廣泛的是化學還原法。這一方法的基本原理是在氯化金水溶液中加入一定量的還原劑,使金離子還原為金原子,可用于制備膠體金的還原劑有 50 余種,但在生物醫學領域內最為常用的還原劑是白磷、檸檬酸三鈉以及鞣酸等,因此將重點介紹這三種還原劑制備膠體金分散顆粒的具體方法和步驟。
膠體金分散顆粒制備實驗——白磷還原法(改進)
實驗方法原理白磷還原法一般只能制備出單一顆粒直徑的膠體金。因此,用于電鏡雙重標記或多重標記時此法顯得有些不足,還需結合其他方法。Henegouwen 等(1986)發展了傳統的白磷還原法,可制備出多種不同直徑的膠體金,取得了良好的效果。這一方法的特點是通過循環還原的引入使原白磷還原法的適用范圍得到擴
鎘柱還原法
方法提要水樣通過鎘還原柱,將硝酸鹽定量地還原為亞硝酸鹽,然后按重氮-偶氮光度法測定亞硝酸鹽氮的總量,扣除原有亞硝酸鹽氮,得硝酸鹽氮的含量。水樣可用有機玻璃或塑料采水器采集,用0.45μm濾膜過濾,貯存于聚乙烯瓶中。分析工作不能延遲3h以上,如果樣品采集后不能立即分析,應快速冷凍至-20℃。樣品熔化后
膠體金溶液在冷凍條件下會不會變性
一、制備膠體金的準備 (一)玻璃器皿的清潔 制備膠體金的成功與失敗除試劑因素以外玻璃器皿清潔是非常關鍵的 一步。 如果玻璃器皿內不干凈或者有灰塵落入就會干擾膠體金顆粒的生成, 形成的顆粒大小不一,顏色微紅、無色或混濁不透明。 我們的經驗是制備膠體金的所有玻璃器皿先用自來水把玻璃器皿上的 灰塵流水沖洗
鞣酸枸櫞酸鈉還原法
A液:1%HAuCl4水溶液1ml加入79ml雙餾水中混勻。 B液:1%枸櫞酸三鈉4ml,1%鞣酸0.7ml,0.1Mol/L K2CO3液0.2ml,混合,加入雙餾水至20ml. 將A液、B液分別加熱至60℃,在電磁攪拌下迅速將B液加入A液中,溶液變藍,繼續加熱攪拌
關于氧化還原法的介紹
氧化還原法是用氧化劑或還原劑去除水中有害物質的方法。例如,用氯、臭氧或二氧化氯氧化有機物(包括酚);用空氣或氯將低價鐵、錳氧化為高價鐵、錳,使從水中析出。 概念 氧化還原法是用氧化劑或還原劑去除水中有害物質的方法。 應用 如在廢水處理中用氯或漂白粉氧化氰根;用硫酸亞鐵、二氧化硫或亞硫酸鈉
枸櫞酸三鈉還原法
(1)10nm膠體金粒的制備:取0.01%HAuCl4水溶液100ml,加入1%枸櫞酸三鈉水溶液3ml,加熱煮沸30min,冷卻至4℃,溶液呈紅色。 (2)15nm膠體金顆粒的制備:取0.01%HAuCl4水溶液100ml,加入1%枸櫞酸三鈉水溶液2ml,加熱煮沸15min~30min,直至
滲透細胞蛋白磷酸化實驗
實驗方法原理 檢測出目標蛋白是磷蛋白后,可將這個蛋白質的磷酸化過程在無細胞系統或天然細胞系統中進行研究。大多數蛋白激酶除了在細胞內還可在胞外進行許多底物的磷酸化。天然細胞的滲透化處理為得到滿意結果提供了一個有效的實驗方法,通過使用一些不同的試劑可以使細胞處于短暫的滲透狀態。這個過程使反應發生在細胞內
滲透細胞蛋白磷酸化實驗
基本方案 帶分析 備擇方案1 制備用于SDS-PAGE的天然細胞樣品 備擇方案2 制備用于等電聚焦的天然細胞樣品 ? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 檢測出目標
膠體金分散顆粒制備實驗
實驗方法原理 白磷還原法的建立已有近百年的歷史,由于此法操作較為簡便,制備出來的膠體金顆粒大小較一致,因而應用較為廣泛,現以 Faulk 和 Taylor(1971)的報道為基礎介紹這一方法。試劑、試劑盒 氯化金K2CO3雙蒸水實驗步驟 1. 取 1% 氯化金 1.5 ml、0.1mol/L K2C
磷鎢酸還原法檢測血清尿酸(UA)實驗
實驗方法原理去蛋白血濾液中的尿酸在堿性溶液中被鎢酸氧化成尿囊素及二氧化碳,磷鎢酸在此反應中則被還原成鎢蘭,鎢蘭的生成量與反應液中尿酸含量成正比,可進行比色測定。實驗步驟一、實驗試劑:1. 磷鎢酸貯存液:稱取鎢酸鈉50g,溶于約400ml蒸餾水,加濃磷酸40ml及玻璃數粒,煮沸回流水冷卻至室溫,用蒸餾
磷鎢酸還原法檢測血清尿酸(UA)實驗
實驗方法原理去蛋白血濾液中的尿酸在堿性溶液中被鎢酸氧化成尿囊素及二氧化碳,磷鎢酸在此反應中則被還原成鎢蘭,鎢蘭的生成量與反應液中尿酸含量成正比,可進行比色測定。實驗步驟一、實驗試劑:1. 磷鎢酸貯存液:稱取鎢酸鈉50g,溶于約400ml蒸餾水,加濃磷酸40ml及玻璃數粒,煮沸回流水冷卻至室溫,用蒸餾
純水在膠體金制備過程中的應用
膠體金快速診斷試劑在瘦肉精檢測中的應用:????瘦肉精是一類動物用藥,它可以起到減少脂肪增加瘦肉的作用。目前在中國瘦肉精主要為克侖特羅(clenbuterol),它屬于β-興奮劑(β-agonist)藥物。克侖特羅有很危險的副作用,輕則導致心律不整,重則導致心臟病發作。????目前檢測瘦肉精的技術
蛋白磷酸酶的作用和分類
蛋白磷酸酶的作用和蛋白激酶相反。根據脫磷酸化的氨基酸殘基的不同,蛋白磷酸酶也分成蛋白酪氨酸磷酸酶(PTP,PTPase)和絲氨酸/蘇氨酸磷酸酶。參與淋巴細胞激活的蛋白磷酸酶主要有:①CD45:該分子胞內段的兩個結構域發揮PTP的作用,因而CD45屬于受體型蛋白酪氨酸磷酸酶,在對抗瓢kPTK的作用和啟
蛋白磷酸酶的基本信息
蛋白磷酸酶是具有催化已經磷酸化的蛋白質分子發生去磷酸化反應的一類酶分子,與蛋白激酶相對應存在,共同構成了磷酸化和去磷酸化這一重要的蛋白質活性的開關系統。
蛋白磷酸酶的基本信息
蛋白磷酸酶是具有催化已經磷酸化的蛋白質分子發生去磷酸化反應的一類酶分子,與蛋白激酶相對應存在,共同構成了磷酸化和去磷酸化這一重要的蛋白質活性的開關系統。
關于蛋白磷酸酶的基本介紹
蛋白磷酸酶的作用和蛋白激酶相反。根據脫磷酸化的氨基酸殘基的不同,蛋白磷酸酶也分成蛋白酪氨酸磷酸酶(PTP,PTPase)和絲氨酸/蘇氨酸磷酸酶。 參與淋巴細胞激活的蛋白磷酸酶主要有: ①CD45:該分子胞內段的兩個結構域發揮PTP的作用,因而CD45屬于受體型蛋白酪氨酸磷酸酶,在對抗瓢kPT
膠體金的制備常用方法
膠體的制備一般采用還原法,常用的還原劑有檸檬酸鈉、鞣酸、抗壞血酸、白磷、硼氫化鈉等。2.1檸檬酸三鈉還原法制備金溶膠取0.01%氯金酸水溶液100mL加熱至沸,攪動下準確加入1%檸檬酸三鈉(Na3C6H5O7·2H2O)水溶液0.7mL,金黃色的氯金酸水溶液在2min內變為紫紅色,繼續煮沸15min
關于酪蛋白磷酸肽的基本介紹
酪蛋白磷酸肽(CPP)是以牛乳酪蛋白為原料,通過生物技術制得的具有生物活性的多肽,可用于各種營養、保健食品中,能有效促進人體對鈣、鐵、鋅等二價礦物營養素的吸收和利用。 酪蛋白磷酸肽是用胰酶或胰蛋白酶水解的酪蛋白,經過精制、純化制成,其核心結構為:—Se r(P)-Se r(P)-Se r(P)
關于酪蛋白磷酸肽的作用介紹
鈣只有以離子形態存在時才易被吸收,而且在中性和弱堿性環境 中又容易與酸根離子形成不溶性鹽而流失。CPP對鈣的吸收作用主要表現為,在中性和弱堿性環境下能與鈣結合,抑制不溶性沉淀的生成, 避免鈣的流失,最終因游離鈣濃度的提高而被動吸收。目前研究表明, CPP促鈣吸收的作用主要表現在以下幾個方面:
關于酪蛋白磷酸肽的特性介紹
在人體腸道內 pH呈中性到弱堿性的環境中,CPP能螯合鈣、鐵、鋅離子,保護其不被膳食中的磷酸、草酸、植酸等陰離子沉淀,從而有效促進對鈣、鐵、鋅等的吸收和利用。CPP也正是著眼于提高鈣的吸收利用而開發的新型產品,于酪蛋白磷酸肽與傳統的鈣吸收劑維生素D相比,具有以下特點: 1.CPP除了促進鈣吸收
蛋白磷酸化檢測的注意事項
1、樣本準備過程中防止蛋白質降解和保留翻譯后修飾? ? ?樣本準備過程中,細胞會釋放蛋白酶和/或去磷酸化酶,為了減少這些酶的活性,處理樣本的過程應在冰上進行,并預先冷卻所有緩沖液,并且建議用含蛋白酶和磷酸酶抑制劑的裂解緩沖液。2、磷酸化特異性抗體的選擇? ? ?選擇磷酸化特異性抗體時,選擇所要檢測位
滲透細胞蛋白磷酸化實驗——帶分析
本實驗討論用三磷酸核苷在可滲透細胞和分離的細胞組分體外標記蛋白的策略。這類實驗在大多數情況下還是以 [γ-32P] ATP 作為外源性磷酸供體。盡管在特殊情況下[γ-32P] GTP 也能被用于蛋白質標記。實驗方法原理檢測出目標蛋白是磷蛋白后,可將這個蛋白質的磷酸化過程在無細胞系統或天然細胞系統中進
檸檬酸三鈉還原法制備金溶膠
取0、01%氯金酸水溶液100ml 加熱至沸,攪動下準確加入1%檸檬酸三鈉水溶液 0.7ml,金黃色的氯金酸水溶液在2分鐘內變為紫紅色,繼續煮沸15分鐘,冷卻后以蒸餾水恢復到原體積,如此制備的金溶膠其可見光區最高吸收峰在535nm,A1cm / 535 = 1.12 。金溶膠的光
膠體金分散顆粒制備實驗
實驗步驟1. 取 0.01% AuCl3?? HCl 水溶液 100 ml,加熱至沸騰。2. 加入 4 μl?195Au。 3. 迅速加入 4 ml 1% 檸檬酸三鈉水溶液,攪拌 5~7 min,至出現透明的橙紅色。4. 其含量為脈沖數 1×106/min。膠體金可用多種方法制備,其中應用較為廣泛的
關于酪蛋白磷酸肽的作用機理-介紹
1、酪蛋白磷酸肽的的持鈣能力 CPP的持鈣能力也即一定條件下被CPP保持在溶液中的鈣量的大小。在有鈣離子和磷酸根存在的溶液體系中,pH呈堿性時,將有磷酸鈣沉淀形成。CPP的存在可減少因磷酸鈣沉淀而引起的鈣損失,使較多的鈣保持溶解狀態。Ca:P=1:1(8mM:8Mm)和2:1(12Mm:6Mm
關于酪蛋白磷酸肽的基本-應用介紹
科學研究證明,在正常情況下,各種鈣源的吸收率相差無幾。牛奶之所以是眾所周知且人類最喜歡的補鈣食品,其原因除了牛奶含鈣較豐富外,還因牛奶酶蛋白在體內經腸道蛋白酶作用可生成部分CPP,而CPP可促進鈣的吸收和利用,換言之,吸收率不應成為廠家選擇鈣源的依據,在產品中加入適量的鈣吸收促進劑CPP才是明智