間接ELISA中試劑的配制及反應流程
實驗概要間接ELISA是一種很實用而常用的免疫分析方法,本文將對反應中所用到的試劑的配制方法和反應的流程進行闡述。主要試劑1. 包被緩沖液:(0.05 mol/L,pH 9.6的碳酸鹽緩沖液) Na2CO3 1.59g NaHCO3 2.93g 蒸餾水 1000ml4℃保存,一周內用完。2. 磷酸鹽緩沖液(PBS,PH 7.4) NaCl 8.0g KH2PO4 0.2g KCl 0.2g Na2HPO4.12H2O 3.65g 蒸餾水 1000ml3. 洗滌液(0.01 mol/L,pH7.4的PBST) 1L PBS中加入0.5ml Tween-204. 封閉液(5% 脫脂奶粉) 5g 脫脂奶粉加入100ml PBS......閱讀全文
間接ELISA中試劑的配制及反應流程
實驗概要間接ELISA是一種很實用而常用的免疫分析方法,本文將對反應中所用到的試劑的配制方法和反應的流程進行闡述。主要試劑1. 包被緩沖液:(0.05 mol/L,pH 9.6的碳酸鹽緩沖液)?? Na2CO3 1.59g?? NaHCO3 2.93g?蒸餾水 1000ml4℃保存,一周內用完。2.
間接ELISA中試劑的配制及反應流程
實驗概要間接ELISA是一種很實用而常用的免疫分析方法,本文將對反應中所用到的試劑的配制方法和反應的流程進行闡述。主要試劑1. 包被緩沖液:(0.05 mol/L,pH 9.6的碳酸鹽緩沖液)?? Na2CO3 1.59g?? NaHCO3 2.93g?蒸餾水 1000ml4℃保存,一周內用完。2.
間接炭凝反應原理、材料試劑及操作方法
一、原理 間接炭凝集反應簡稱炭凝。它是以炭粉微粒作為載體,將已知的抗體球蛋白吸附于這種載體上,形成炭粉抗體復合物,當炭血清與相應的抗原相遇時,二者發生特異性結合,形成肉眼可見的炭微粒凝集塊。 目前炭凝反應已用于炭疽、鼠疫和馬副傷寒性流產等病的診斷。 二、材料與試劑 1、炭粉 炭粉
間接法操作elisa試劑盒的方法介紹
1、用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃過夜; 2、次日洗滌3次; 3、加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育1小時,洗滌; 4、(同時做空白、陰性及陽性孔對照)于反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標第二抗體(抗抗體)0.1
ELISA試劑盒實驗技術中抗原抗體的反應
一、抗體的結構抗體是能與抗原特異性結合的免疫球蛋白?(immunoglobulin,Ig)。Ig 分五類,即IgG、IgA 、IgM、IgD 和IgE。與免疫測定有關的Ig 主要為 IgG 和IgM。Ig 由兩個輕鏈(L)和兩個重鏈(H)的單體組成。Ig 的輕鏈是相同的,有κ(kappa)和
間接-ELISA法
實驗概要Enzyme ?linked immunosorbent ?assay,ELISA。指將可溶性的抗原或抗體吸附到聚苯乙烯等固相載體上,進行免疫反應的定性和定量方法。1971年瑞典學者Engvail和Perlmann,荷蘭學者Van ?Weerman和Schuurs分別報道將免疫技術發展為檢測
間接-ELISA法
實驗概要Enzyme ?linked immunosorbent ?assay,ELISA。指將可溶性的抗原或抗體吸附到聚苯乙烯等固相載體上,進行免疫反應的定性和定量方法。1971年瑞典學者Engvail和Perlmann,荷蘭學者Van ?Weerman和Schuurs分別報道將免疫技術發展為檢測
間接ELISA實驗
實驗概要需要偶聯二抗的 ELISA 測定的一般程序。實驗步驟1. 將抗原包被到微孔板??? 1)?將抗原在 PBS 或其它碳酸鹽緩沖液中稀釋至 20 μg/ml 的最終濃度。移取 50 μl 抗原稀釋液到 PVC 微量滴定板的第一排微孔中,使該微量滴定板的微孔上包被抗原。按需要在微量滴定板上進行梯度
間接ELISA與間接競爭ELISA有什么區別
一般間接Elisa法用于檢測抗體(比如免疫血清的效價)而間接競爭Elisa法用于檢測小分子抗原
間接ELISA與間接競爭ELISA有什么區別
一般間接Elisa法用于檢測抗體(比如免疫血清的效價)而間接競爭Elisa法用于檢測小分子抗原
ELISA試劑盒生產流程及注意事項
1.ELISA試劑盒生產流程2.包被2.1?將包被抗原用包被緩沖液配制包被液,每孔取100?mL加入酶標板,蓋好蓋板膜,包被條件如下表,4℃?16-20h包被時酶標板可以疊放,而37℃?2h包被時酶標板之間的間距應保持一致(一般為5cm)。根據培養箱的設計調節酶標板間的間距,如培養箱從底部產熱,則應
檢測elisa試劑盒組成技術原理與間接法
組成結構 1、 血清:操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血紅細胞迅速小心地分離。 2、 血漿:EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。 3、 細胞上清液:1000×g離心10分鐘去除顆
組織培養中培養基配制滅菌及保存操作流程
培養基的配制 1、根據配方要求,用量筒或移液管從每種母液中分別取出所需的用量,放入同一燒杯中,并用粗天平稱取蔗糖、瓊脂 ?放在一邊備用。 2、將1中稱好的瓊脂 ?加蒸餾水300~400毫升,加熱并不斷攪拌,直至煮沸溶解呈透明狀,再停止加熱。 3、將1中所取的各種物質(包括蔗糖),加入
elisa間接法原理
在運用ELISA方法測定抗體方面,通常所用的方法稱為間接法,也是目前zui常用的方法,其原理:間接法首先用抗原包被于固相載體,這些包被的抗原必須是可溶性的,或者至少是極微小的顆粒,經洗滌,加入含有被測抗體之標本,再經孵育洗滌后,加入酶標記抗抗體,(對人的標本來說即加酶標抗人球蛋白IgG、IgM),再
elisa間接法原理
在運用ELISA方法測定抗體方面,通常所用的方法稱為間接法,也是目前zui常用的方法,其原理:間接法首先用抗原包被于固相載體,這些包被的抗原必須是可溶性的,或者至少是極微小的顆粒,經洗滌,加入含有被測抗體之標本,再經孵育洗滌后,加入酶標記抗抗體,(對人的標本來說即加酶標抗人球蛋白IgG、IgM),再
elisa間接法原理
在運用ELISA方法測定抗體方面,通常所用的方法稱為間接法,也是目前zui常用的方法,其原理:間接法首先用抗原包被于固相載體,這些包被的抗原必須是可溶性的,或者至少是極微小的顆粒,經洗滌,加入含有被測抗體之標本,再經孵育洗滌后,加入酶標記抗抗體,(對人的標本來說即加酶標抗人球蛋白IgG、IgM),再
elisa間接法原理
在運用ELISA方法測定抗體方面,通常所用的方法稱為間接法,也是目前zui常用的方法,其原理:間接法首先用抗原包被于固相載體,這些包被的抗原必須是可溶性的,或者至少是極微小的顆粒,經洗滌,加入含有被測抗體之標本,再經孵育洗滌后,加入酶標記抗抗體,(對人的標本來說即加酶標抗人球蛋白IgG、IgM),再
elisa間接法原理
在運用ELISA方法測定抗體方面,通常所用的方法稱為間接法,也是目前zui常用的方法,其原理:間接法首先用抗原包被于固相載體,這些包被的抗原必須是可溶性的,或者至少是極微小的顆粒,經洗滌,加入含有被測抗體之標本,再經孵育洗滌后,加入酶標記抗抗體,(對人的標本來說即加酶標抗人球蛋白IgG、IgM),再
ELISA試劑盒進口大鼠實驗的技術流程
ELISA試劑盒進口大鼠的技術流程是在抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶符號的基礎上。在實驗室運用的對比老練,是全世界科研人士較為認可的查看方法。針對不一樣工作的需求,不斷完善、更新其技術和方法。在從前看來一些難以進行質量測定的微量生物活性物質,如受體、細胞因子以及酶等均可運用酶聯免疫測定技術來測定
Elisa加血清樣及反應試劑操作技術要點
elisa實驗方法操作標準,用于ELISA測定的標本zui為常用的是血清(漿),有時因為特定的檢測目的,也用到唾液、腦脊液、尿液、糞便等標本。在處理和保存方面要考慮以下幾個方面: 1.要注意避免出現嚴重溶血。 2.樣本的采集及血清分離中要注意盡量避免細菌污染。 3.血清標本如是以無
間接凝集反應的定義及載體介紹
間接凝集反應是將可溶性抗原(或抗體)先吸附或偶聯與免 疫無關的,大小合適的顆粒狀載體表面,使 之形成致敏顆粒,然后與相應抗體反應(抗 原)作用,在適宜的電解質存在條件下,出 現特異性的凝集現象,稱為間接凝集反應。?常用的載體顆粒有人o型紅細胞、綿羊紅 細胞、乳膠顆粒等。如載體顆粒是紅細胞,稱間接血凝
農藥酶試劑500次/盒的試劑組及配制
試劑組成:酶5瓶,底物2瓶,顯色劑2瓶,緩沖液9包。 配制 ① 緩沖液:將緩沖液試劑袋中的試劑倒出,溶于500mL蒸餾水中,溶解,混勻,即可。 ② 顯色劑:向標有“顯色劑”的滴瓶中添加5mL緩沖液,搖勻。在冰箱中冷藏(0~4℃),切勿冷凍結冰。 ③ 底物:向標有“底物”的滴瓶中添加5mL蒸
農藥酶試劑200次/盒的試劑組及配制
試劑組成:酶2瓶,底物1瓶,顯色劑1瓶,緩沖液4包。配制① 緩沖液:將緩沖液試劑袋中的試劑倒出,溶于500mL蒸餾水中,溶解,混勻,即可。② 顯色劑:向標有“顯色劑”的滴瓶中添加5mL緩沖液,搖勻。在冰箱中冷藏(0~4℃),切勿冷凍結冰。③ 底物:向標有“底物”的滴瓶中添加5mL蒸餾水,搖勻。在冰箱
農藥酶試劑1250次/盒的試劑組及配制
試劑組成:酶5瓶,底物2瓶,顯色劑2瓶,緩沖液20包。配制① 緩沖液:將緩沖液試劑袋中的試劑倒出,溶于500mL蒸餾水中,溶解,混勻,即可。② 顯色劑:向標有“顯色劑”的滴瓶中添加5mL緩沖液,搖勻。在冰箱中冷藏(0~4℃),切勿冷凍結冰。③ 底物:向標有“底物”的滴瓶中添加5mL蒸餾水,搖勻。在冰
間接ELISA的操作程序
本法主要用于檢測抗體。以鴨病毒性肝炎(DVH)抗體的ELISA為例,間接ELISA的操作程序如下: ⑴ 材料 ① 包被液、洗滌液、保溫液、底物液、終止液; ② DVH包被抗原、酶標抗抗體、陰性及陽性DVH參考血清;待檢鴨血清; ③ ELISA檢測儀、加樣器、聚苯乙烯微量板。 ⑵ 方
ELISA中的試劑(2)-結合物
3.2 結合物?結合物即酶標記的抗體(或抗原),是ELISA中最關鍵的試劑。良好的結合物應該是既保有酶的催化活性,也保持了抗體(或抗原)的免疫活性。結合物中酶與抗體(或抗原)之間有恰當的分子比例,在結合試劑中應盡量不含有或少含有游離的(未結合的)酶或游離的抗體(或抗原)。此外,結合物尚要有良好的穩
間接-ELISA-實驗方案
實驗概要需要偶聯二抗的 ELISA 測定的一般程序。實驗步驟1. 將抗原包被到微孔板??? 1)?將抗原在 PBS 或其它碳酸鹽緩沖液中稀釋至 20 μg/ml 的最終濃度。移取 50 μl 抗原稀釋液到 PVC 微量滴定板的第一排微孔中,使該微量滴定板的微孔上包被抗原。按需要在微量滴定板上進行梯度
間接凝集反應實驗——間接血球凝集
實驗方法原理間接血球凝集試驗是根據紅血球表面的吸附作用而建立起來的。將細菌可溶性抗原提出使之吸附于紅血球表面,此時紅血球即稱為“致敏紅血球”。這種致敏的紅血球具有細菌的抗原性,與相應的抗血清相遇可產生凝集現象。間接血凝抗原的制備可用加堿或加熱的方法使菌體中的多糖物質浸出,去除類脂以免干擾紅血球的吸附
間接凝集反應實驗——間接凝集抑制
實驗方法原理若使可溶性抗原與相應抗體先混合,充分作用后再加入有關的免疫微球,因抗體已被可溶性抗原結合,不再出現免疫微球的被動凝集現象,叫間接凝集抑制試驗,臨床化驗檢查中常用的免疫妊娠試驗就是一種間接凝集抑制試驗。實驗材料孕婦尿試劑、試劑盒膠乳抗原儀器、耗材滴管實驗步驟1. ?用清潔滴管在反應板上滴加
間接凝集反應
實驗概要將可溶性抗原吸附于一種與免疫無關的顆粒載體上,然后與相應的抗體結合,也可出現顆粒載體的凝集現象,稱為間接凝集反應。間接凝集反應比直接凝集反應敏感性為高,可用于微量抗體或抗原的檢查。本實驗介紹了間接凝集反應兩種主要方法:間接血球凝集試驗、間接凝集抑制試驗和協同凝集試驗。實驗原理1. 間接血球凝