1. 多肽穩定標同位素記技術 隨著多肽在生物醫藥領域越來越廣泛和深入的應用,標記和修飾性的多肽種類的需求越來越多,質量需求也越來越高。穩定同位素標記(同位素示蹤法)就是其中典型的一種。穩定同位素標記多肽是指用穩定同位素標記的氨基酸合成的多肽。與標準氨基酸相比,同位素標記是指用2H,13C或15N代替原有的12C和14N原子。 重標氨基酸是非放射性的,只是分子量比標準氨基酸大一些。這種分子量的區別能夠讓其在蛋白定量分析和、蛋白結構分析和MS(或NMR)鑒定中成為有力的工具。可以實現肽類代謝途徑研究,可以隨時追蹤含有穩定同位素標記肽在體內或體外的位置及其數量的運動變化情況,其高靈敏度、定位簡單、定量準確等特點使得同位素修飾在醫學及生物化學領域越來越得到廣泛關注。穩定同位素標記多肽技術關鍵在于用于合成多肽的穩定同位素標記氨基酸的質量,肽谷生物為了提供高質量穩定同位素標記氨基酸,與先進同位素......閱讀全文
翻譯后修飾蛋白質的定性和定量實驗 實驗步驟
六、CID、ECD和 ETD的對比基于質譜的蛋白質組學分析依賴于氣相中肽段在低碰撞能量下斷裂, 在質量譜圖中形成峰。進而通過峰圖確定肽段序列,再推斷出相關蛋白質。完成肽段斷裂最主要的方法就是碰撞誘導解離(collision induced dissociation,C I D ) ( S w
七、P T M 的定量分析當研究 P T M 的生物學意義時,如能了解一個特定修飾或一組P T M 的相對或絕對豐度通常會有幫助。這樣可以將不同的生物樣品間的目的修飾進行直接比較。例如, 將正常與疾病狀態下細胞或組織內某一 P T M 的豐度進行比較。定量分析這些變化能夠幫助深人了解 P T M 在
三、蛋白質的硝化修飾酪氨酸、色氨酸、甲硫氨酸、半胱氨酸側鏈的硝化與亞硝化作用構成了蛋白質硝化PT M 的主要部分。這些加成反應由發育、氧化應激及衰老過程中產生的活性氮介導。活性氮的增加是由一氧化氮和活性氧的過度反應或調控紊亂造成的(Yeo et al.,2008)。活性氮和活性氧能夠靶向于D