基因敲除（KO）在驗證抗體特異性的應用
抗體作為基礎科學研究和臨床試驗常用的工具之一，主要通過抗原-抗體的反應揭示蛋白質在生命活動中的變化。盡管它們被廣泛的使用，但是沒有相關標準以確保商業抗體特異性和質量上的一致性。這使得科學界一直存在“重現危機”，浪費了科學家們大量的時間和金錢，妨礙生命科學研究的快速發展。因此，對抗體進行敏感性和特異性測試，確保質量和可重復性至關重要。眾所周知，基因敲除（Knock Out,KO）作為最被大家認可、最被信任的一種抗體特異性驗證方法，是一項非常穩健的技術，可在不表達目的蛋白的 KO 細胞系或組織中通過檢測目的抗體來確證其特異性。為了確定華安抗體產品的功能性、特異性、敏感性，我們對不同的產品是采用不同的驗證策略來確保我們抗體產品在科研工作中的真實有效。為了確保大家可以擁有高度特異性的抗體，我們通過 CRISPR-Cas9 基因組編輯來進行 KO 驗證，從而給大家提供研究所需的可靠結果。CRISPR/Cas9介導編碼基因KO的原理，在......閱讀全文
基因敲除（KO）在驗證抗體特異性的應用
抗體作為基礎科學研究和臨床試驗常用的工具之一，主要通過抗原-抗體的反應揭示蛋白質在生命活動中的變化。盡管它們被廣泛的使用，但是沒有相關標準以確保商業抗體特異性和質量上的一致性。這使得科學界一直存在“重現危機”，浪費了科學家們大量的時間和金錢，妨礙生命科學研究的快速發展。因此，對抗體進行敏感性和特異性
TetraOne－KO——基因敲除技術進展
TetraOne KO——基因敲除技術的重大突破 近日，賽業生物科技（Cyagen Biosciences）宣布推出其全球ZL技術TetraOne基因敲除，一種不僅在速度上媲美TALEN、CRISPR/Cas9（把ES打靶基因敲除/敲入鼠的定制周期降低至6個月），而且避免了TALEN、CRISP
基因敲除小鼠在抗體藥物研發平臺的應用
“千鼠萬抗”計劃 (Project Integrum) 是百奧賽圖抗體藥物研發平臺的重要組成部分。目標是利用3-5年時間，在全人抗體小鼠RenMab上，逐一對上千個潛在抗體藥物靶點進行基因敲除，并利用這些基因敲除小鼠制備抗體的計劃。其主要內容包括： 在RenMab上完成1000多個Ta
基因敲除小鼠在抗體藥物研發平臺的應用
?“千鼠萬抗”計劃?(Project Integrum)?是百奧賽圖抗體藥物研發平臺的重要組成部分。目標是利用3-5年時間，在全人抗體小鼠RenMab上，逐一對上千個潛在抗體藥物靶點進行基因敲除，并利用這些基因敲除小鼠制備抗體的計劃。其主要內容包括：?在RenMab上完成1000多個Targets的
TetraOne－KO——基因敲除技術的重大突破
近日，賽業生物科技（Cyagen Biosciences）宣布推出其全球ZL技術TetraOne基因敲除，一種不僅在速度上媲美TALEN、CRISPR/Cas9（把ES打靶基因敲除/敲入鼠的定制周期降低至6個月），而且避免了TALEN、CRISPR/Cas9脫靶效應困擾的革命性技術。TetraO
TetraOne－KO——基因敲除技術的重大突破
TetraOne KO——基因敲除技術的重大突破 近日，賽業生物科技（Cyagen Biosciences）宣布推出其全球ZL技術TetraOne基因敲除，一種不僅在速度上媲美TALEN、CRISPR/Cas9（把ES打靶基因敲除/敲入鼠的定制周期降低至6個月），而且避免了TALEN、
斑馬魚的基因敲除定制（Cas9KO）法介紹
利用 CRISPR/Cas9 技術，針對靶基因序列設計 sgRNA， 指導 Cas9 蛋白在特定基因位點引起 DNA 雙鏈斷裂，在非同源性末端接合修復斷裂 DNA 的過程中，靶基因堿基突變或缺失被引入到斑馬魚基因組中，最終導致靶基因無法正常轉錄翻譯，達到基因敲除的目的。目前我們利用 CRISPR
斑馬魚的基因敲除定制（Cas9KO）法介紹
利用 CRISPR/Cas9 技術，針對靶基因序列設計 sgRNA，?指導 Cas9 蛋白在特定基因位點引起 DNA 雙鏈斷裂，在非同源性末端接合修復斷裂 DNA 的過程中，靶基因堿基突變或缺失被引入到斑馬魚基因組中，最終導致靶基因無法正常轉錄翻譯，達到基因敲除的目的。目前我們利用 CRIS
組織特異性基因敲除的定義
中文名稱組織特異性基因敲除英文名稱tissue-specific gene knockout定 義在特定組織細胞類型中使基因功能完全喪失的實驗技術。應用學科遺傳學（一級學科），發育遺傳學（二級學科）
AVTBGCre/GOI在小鼠肝臟特異性基因表達敲除應用與分析
AAV-TBG-Cre/GOI系統簡介： l AAV-TBG-Cre系統是整合了肝臟特異性TBG啟動子和Cre重組酶的腺相關病毒載體。 ? TBG啟動子是一種基于人甲狀腺結合球蛋白(TBG)啟動子和微球蛋白增強子的混合型啟動子，用于肝臟特異性轉外源基因表達。 ? Cre重組酶是
AAVTBGCre/GOI在小鼠肝臟特異性基因表達或敲除中的應用...
AAV-TBG-Cre/GOI在小鼠肝臟特異性基因表達或敲除中的應用與優勢分析AAV-TBG-Cre/GOI系統簡介：l AAV-TBG-Cre系統是整合了肝臟特異性TBG啟動子和Cre重組酶的腺相關病毒載體。? TBG啟動子是一種基于人甲狀腺結合球蛋白(TBG)啟動子和微球蛋白增強子的混合型啟動子
基因敲除的技術應用
基因敲除技術主要應用于動物模型的建立，而最成熟的實驗動物是小鼠，對于大型哺乳動物的基因敲除模型還處于探索階段。近年來，牛、羊、豬、猴等大型哺乳動物實現了基因敲除。但由于狗的生殖生理較為特殊，基因敲除狗的培育難度大為增加，狗基因組的定點修飾一直未獲成功。針對這一問題，研究團隊設計了一個自體移植的策略，
應用CRISPRCas9實現斑馬魚組織特異性基因敲除
近日，來自美國哈佛大學的研究人員在國際學術期刊Development cell發表了他們的最新研究進展，他們利用基于CRISPR-Cas9技術開發的載體系統在斑馬魚上實現了組織特異性基因敲除，這對于以斑馬魚為主要研究工具的科學家們無疑是一個好消息。 斑馬魚具有養殖方便、繁殖周期短、產卵量大、胚
基因敲除技術的技術應用
基因敲除技術主要應用于動物模型的建立，而最成熟的實驗動物是小鼠，對于大型哺乳動物的基因敲除模型還處于探索階段。近年來，牛、羊、豬、猴等大型哺乳動物實現了基因敲除。但由于狗的生殖生理較為特殊，基因敲除狗的培育難度大為增加，狗基因組的定點修飾一直未獲成功。針對這一問題，研究團隊設計了一個自體移植的策略，
基因敲除技術的技術應用
基因敲除技術主要應用于動物模型的建立，而最成熟的實驗動物是小鼠，對于大型哺乳動物的基因敲除模型還處于探索階段。近年來，牛、羊、豬、猴等大型哺乳動物實現了基因敲除。但由于狗的生殖生理較為特殊，基因敲除狗的培育難度大為增加，狗基因組的定點修飾一直未獲成功。針對這一問題，研究團隊設計了一個自體移植的策略，
國際抗體驗證工作組發布驗證抗體特異性五大策略
國際抗體驗證工作組（IWGAV）是全球范圍內由研究方向各異的蛋白質生物學家組成的獨立工作組。IWGAV 9月19日在瑞典斯德哥爾摩披露，為滿足在抗體特異性、功能性和重復性的迫切需求，該工作組已于9月在《Nature Methods》在線發表了初步的戰略建議。“針對建立廣泛可接受的抗體驗證標準和
關于基因敲除技術應用介紹
基因敲除技術主要應用于動物模型的建立，而最成熟的實驗動物是小鼠，對于大型哺乳動物的基因敲除模型還處于探索階段。近年來，牛、羊、豬、猴等大型哺乳動物實現了基因敲除。但由于狗的生殖生理較為特殊，基因敲除狗的培育難度大為增加，狗基因組的定點修飾一直未獲成功。針對這一問題，研究團隊設計了一個自體移植的策略，
雙特異性抗體的應用
雙特異性抗體的應用：1.在體外免疫檢測中的應用2.在體內免疫治療中的應用3.在體內腫瘤放射免疫顯像診斷中的應用
抗體特異性檢測提議問答國際抗體驗證工作組
The International Working Group on Antibody Validation: 國際抗體驗證工作組 Proposal for Antibody Specificity Testing Q&A 關于抗體特異性檢測提議的常見問題及回答 1.What is th
JBC：針對WB抗體驗證提出最佳操作建議
2020 年 1 月 28 日，英國劍橋和美國林肯：Abcam 和 LI-COR 欣喜地宣布，雙方在同行評審期刊《生物化學雜志》(JBC)[1] 上發表了共同撰寫的手稿，旨在提高整個生命科學行業的試劑可重復性標準。Pillai Kastoori 等人的新論文Antibody Validation
常見的流式細胞術抗體特異性驗證方法
以下是一些常見的流式細胞術抗體特異性驗證方法：免疫熒光染色對照實驗：陽性對照：使用已知高表達目標抗原的細胞或組織切片進行染色，觀察預期的陽性信號。陰性對照：選取已知不表達目標抗原的細胞或組織進行染色，應無明顯信號。同型對照：使用與實驗抗體同亞型、同熒光素標記但無特異性結合能力的同型抗體作為對照，排除
常見的流式細胞術抗體特異性驗證方法
常見的流式細胞術抗體特異性驗證方法：免疫熒光染色共定位：使用該抗體與已知針對同一細胞結構或分子但標記不同熒光素的另一種抗體同時進行染色。通過觀察兩種熒光信號的共定位情況，如果高度重合，說明該抗體具有較好的特異性。競爭抑制實驗：在抗體染色前，先加入過量的未標記的相同抗原，然后再加入標記的抗體進行染色。
基因敲除小鼠在藥物依賴性研究中的應用（一）
基因敲除(gene knockout ) 是 80年代初出現的一項新的基因工程技術, 是制備轉基因動物的重要技術之一。利用該技術可以培育先天缺陷某一特定基因的動物, 以此研究該特定基因的生理功能或在疾病發生發展中的意義。近年來基因敲除小鼠在藥物依賴性研究中也得到廣泛的應用。在傳統的藥物依賴性
基因敲除小鼠在藥物依賴性研究中的應用（二）
3. 2 D2 受體在阿片類誘導的運動增強效應實驗中, D2 受體KO 小鼠對內源性和外源性阿片類物質誘導的運動增強效應與 WT 小鼠無顯著性差異, 表明 D2 受體缺失未影響阿片誘導的運動增強效應。在藥物身體依賴性實驗中,D2 受體 KO 小鼠和 WT 小鼠的戒斷癥狀沒有明顯差別,說明 D2
基因靶向的基因敲除
實驗步驟構建重組基因載體絕大多數的基因敲除策略都是基于同源重組的機制，其基因載體包括載體骨架、靶基因同源序列和突變序列及選擇性標記基因等非同源序列，其中同源序列是影響同源重組效率的關鍵因素。用電穿孔顯微注射方法把重組DNA轉入受體細胞（一般是胚胎干細胞）核內。同源重組基因重組時以載體的同源序列取代染
基因敲除的不簡單論p53基因的重要性
p53基因位于17號染色體p13，全長16-20kb，含有11個外顯子，轉錄2.8kb的mRNA，編碼一種分子量為43.7KDa的P53蛋白質，是一種核內磷酸化蛋白。因蛋白條帶出現在Marker所示53KDa處，命名為P53。p53基因是人體一種腫瘤抑制基因（tumor suppressor gen
基因敲除技術的理論基礎和應用
基因敲除就是通過同源重組將外源基因定點整合入靶細胞基因組上某一確定的位點，以達到定點修飾改造染色體上某一基因的目的的一種技術。它克服了隨機整合的盲目性和偶然性，是一種理想的修飾、改造生物遺傳物質的方法。這項技術的誕生可以說是分子生物學技術上繼轉基因技術后的又一革命。尤其是條件性、誘導性基因打靶系統的
如何優化流式細胞術抗體的特異性驗證實驗？
以下是一些優化流式細胞術抗體特異性驗證實驗的建議：多種方法結合：不要僅僅依賴于一種驗證方法，而是綜合使用多種，如免疫熒光染色對照、競爭抑制實驗、敲除細胞株驗證、交叉反應檢測等，以從不同角度評估抗體特異性。優化細胞模型：除了常用的細胞系，考慮使用原代細胞或更接近體內生理狀態的 3D 細胞培養模型，以提
基因敲除的定義
基因敲除(geneknockout),是指對一個結構已知但功能未知的基因,從分子水平上設計實驗,將該基因去除,或用其它順序相近基因取代,然后從整體觀察實驗動物,推測相應基因的功能。這與早期生理學研究中常用的切除部分-觀察整體-推測功能的三部曲思想相似。基因敲除可中止某一基因的表達外,還包括引入新基因
基因敲除簡介
基因敲除是自80年代末以來發展起來的一種新型分子生物學技術，是通過一定的途徑使機體特定的基因失活或缺失的技術。通常意義上的基因敲除主要是應用DNA同源重組原理，用設計的同源片段替代靶基因片段，從而達到基因敲除的目的。隨著基因敲除技術的發展，除了同源重組外，新的原理和技術也逐漸被應用，比較成功的有基因