熒光定量核酸擴增儀相關的功能
熒光定量是通過熒光染料或熒光標記的特異性的探針,對PCR產物進行標記跟蹤,實時在線監控反應過程,結合相應的軟件可以對產物進行分析,計算待測樣品模板的初始濃度。 主要功能: 高靈敏度:可檢測單拷貝基因; 動力學范圍廣:可檢測10E0——10E8 拷貝; 高重復性:CV0.3% 高分辨率:輕松區分1000拷貝以下2倍濃度差異; 高速:40分鐘完成40個PCR循環(384孔板)。......閱讀全文
核酸擴增—鏈置換擴增技術(SDA)
SDA是一種基于酶促反應的DNA體外等溫擴增技術,采用標記的兩種不同熒光基團的探針。在SDA過程中,該探針被摻入到雙鏈擴增產物中,由限制內切酶的酶切使淬滅基團與熒光基團分開,從而釋放熒光,用熒光偏振檢測法定量檢測。SDA較之PCR有更高的擴增效率,耗時僅30min。其基本系統包括一種限制性核酸內
核酸擴增—多重PCR
多重PCR是在單一PCR基礎上改進和發展起來的新技術,是在同一PCR體系中加入多對特異性引物,一次擴增多個DNA片斷,實現多個基因序列或多種病原體的同時檢出。多重PCR降低了檢測成本,減少了工作量,提高了檢測效率,并且可以解決淋球菌、衣原體等混合感染者臨床癥狀不明顯,檢出率低等問題。淋病患者往往
基因擴增儀的功能原理
專利技術應用實現快速高效均衡擴增檢測由光開關陣列、自聚焦透鏡和尾纖準直器及變增益微光O/E裝置組成的MEMS有機整體,在以16位單片機為核心的電控裝置管理下,能在毫秒級時間內完成多個標本快速均衡掃描檢測,避免了機械掃描方式或CCD掃描方式引起的時間滯后或漸暈誤差。實現標準樣本的PCR熱循環擴增及
基因擴增儀功能原理
專利技術應用實現快速高效均衡擴增檢測由光開關陣列、自聚焦透鏡和尾纖準直器及變增益微光O/E裝置組成的MEMS有機整體,在以16位單片機為核心的電控裝置管理下,能在毫秒級時間內完成多個標本快速均衡掃描檢測,避免了機械掃描方式或CCD掃描方式引起的時間滯后或漸暈誤差。實現標準樣本的PCR熱循環擴增及
熒光定量PCR技術中的擴增效率什么意思
PCR原理中,反應一個循環,PCR產物擴增一倍,即為之前的2倍。……反應N個循環,理論上應為原來的2的N次方。此時,理論的擴增效率是100%,即1。但實際上,由于酶,dNTPs,引物,模板等因素,擴增效率達不到100%。因此,我們就要做標準曲線,看實際的擴增效率是多少,也就是標準曲線的斜率。理論上1
實時熒光定量pcr實驗中擴增曲線末尾起跳的原因
末尾起跳原因:(1)陰參曲線末尾起跳,通常表示存在污染;(2)復檢樣本,排除非特異性擴增的可能性;(3)正常樣本也可存在曲線末尾起跳,表示樣本濃度低或者加樣量不準確。解決方法:排除是否存在污染;復檢樣本,如果復檢后曲線為陰性直線則說明之前的末尾起跳為非特異性擴增,如果復檢后曲線仍與之前一致則說明末尾
熒光定量PCR技術中的擴增效率什么意思
PCR原理中,反應一個循環,PCR產物擴增一倍,即為之前的2倍。……反應N個循環,理論上應為原來的2的N次方。此時,理論的擴增效率是100%,即1。但實際上,由于酶,dNTPs,引物,模板等因素,擴增效率達不到100%。因此,我們就要做標準曲線,看實際的擴增效率是多少,也就是標準曲線的斜率。理論上1
實時熒光定量PCR中華擴增曲線為什么不平滑
這個跟很多因素有關,一般試劑盒過期或不合格很有可能會出現這種情況,還有就是跟基因的表達有關,你可以用個內參試一下,如果曲線不平滑,可能是試劑出問題;否則的話,將你原來基因的模板濃度加大或調一下溫度(一般55或60℃),這樣還不行的話。估計得換引物和探針了,一定要確保你基因沒有找錯,不是染色體組的序列
熒光定量pcr擴增曲線是負數是怎么回事
可能是沒有擴增,你查查標本是不是降解了
熒光定量pcr儀定量方法之絕對定量
在做qPCR實驗時,我們經常會問:“你是做絕對定量還是相對定量呢?”,而定量方法的選擇是取決于實驗的目標。絕對定量可測定目標核酸分子的實際拷貝數,但也是最費力、最復雜的定量形式。此方法要求周密的實驗方案和高度準確的標準曲線,常用于確定病毒滴度。 使用標準曲線進行絕對定量 絕對定量是通
206.5萬!該地區疾控中心采購熒光定量PCR、核酸提取儀等
一、項目基本情況 項目編號:BGZJ-ZC22313 項目名稱:白銀市白銀區疾病預防控制中心PCR實驗室能力提升項目設備采購項目(二次) 預算金額:206.5(萬元) 最高限價:206.5(萬元) 采購需求:實時熒光定量PCR系統1臺、分液平臺2臺、核酸提取儀1臺等(進口產品已論證具體
核酸序列擴增法的定義
中文名稱核酸序列擴增法英文名稱nucleic acid sequence-based amplification;NASBA定 義一種在等溫系統中擴增核酸的方法。即利用T7RNA聚合酶僅在結合核酸上相應位點時才能起作用的特點,將結合位點序列與靶序列相連,然后產生靶分子的RNA拷貝,形成反轉錄和RN
pcr核酸擴增儀的控溫方式有哪些
水浴鍋控溫壓縮機控溫半導體控溫離心式空氣加熱控溫
熒光定量PCR儀的選購
2003年非典型肺炎和2004年禽流感的爆發,使熒光定量PCR技術在臨床檢驗中的應用前景大為提升。為了提升科研水平和檢驗水平,各單位爭先恐后購人熒光定量PCR儀。如何選擇更適合本單位實際情況的PCR儀,就擺在了許多科研人員的面前。針對上述疑問,結合各款PCR儀的特征,本人提出一些個人的看法。1 PC
熒光定量PCR儀的應用
熒光定量PCR儀可用于醫療,新藥研發,診斷檢驗試劑研發等領域。?在醫療方面,具體可用于病原體檢測;產前診斷以防止各類遺傳性疾病的發生;藥物療效考核,例如對乙型肝炎病毒 (HBV)、丙型肝炎病毒 (HCV) 定量分析顯示:病毒量與某些藥物的療效關系;腫瘤基因檢測。?在新藥開發研究中,實時熒光定量PCR
熒光定量PCR儀的應用
?熒光定量PCR儀可用于醫療,新藥研發,診斷檢驗試劑研發等領域。?在醫療方面,具體可用于病原體檢測;產前診斷以防止各類遺傳性疾病的發生;藥物療效考核,例如對乙型肝炎病毒 (HBV)、丙型肝炎病毒 (HCV) 定量分析顯示:病毒量與某些藥物的療效關系;腫瘤基因檢測。?在新藥開發研究中,實時熒光定量PC
熒光定量PCR儀的用途
1. 定量/定性基因表達分析; 2. 熔解曲線分析; 3. SNP基因分型; 4. microRNA分析; 5. 基因突變分析; 6. 質控圖形分析; 7. PCR擴展效率計算; 8. HBV、HCV、HIV、HPV、SARS、H1N1、 AIDS 、CSF等各種疾病檢測; 9.
ma6000核酸擴增儀怎么新建程序
1、首先打開ma6000核酸擴增儀。2、然后進入ma6000核酸擴增儀設置。3、最后在設置中,登錄雅瑞操作軟件,新建一個項目,再新建一個項目集合,在詳細信息中添加項目名稱,即新建程序創建完成。
恒溫核酸擴增技術通量
在實際的產業化中,分子診斷儀器的通量往往至關重要。對于qPCR而言,由于引物設計的成熟和熒光通道的多樣性,往往可以比較好的實現高通量檢測。由于恒溫核酸擴增技術引物設計較為困難,單一的反應溫度會造成引物和模板,引物與引物之間的非特異性鏈接和擴增,使得恒溫擴增的檢測通量受到限制。但同時也得益于反應溫
恒溫核酸擴增技術概述
恒溫核酸擴增技術是利用各種酶,引物,脫氧核苷三磷酸(dNTP),模板DNA以及緩沖液的混合物在同一溫度下溫浴一定時間,讓不同的酶與DNA進行反應,從而達到特定DNA片段的擴增。與傳統的PCR核酸擴增相比,恒溫核酸擴增不需要在不同溫度之間的轉換,只要保持酶反應的最佳溫度,37℃、42℃、56℃或6
實時熒光定量-PCR-所用熒光探針及功能介紹
應用于實時定量 PCR 檢測體系中的熒光探針主要有兩種:一種是 TaqMan 探針,一種是分子信標探針。Tyagi 和 Krammer(1996)首次建立了分子信標探針,在同一寡核苷酸探針的5'端標記熒光素、3'端標記淬滅劑(DABCYL)分子信標探針能形成發夾結構,探針的嚕撲環(L
實時熒光定量PCR儀
在普通PCR儀的基礎上增加一個熒光信號采集系統和計算機分析處理系統,就成了熒光定量PCR儀。其PCR擴增原理和普通PCR儀擴增原理相同,只是PCR擴增時加入的引物是利用同位素、熒光素等進行標記,使用引物和熒光探針同時與模板特異性結合擴增。擴增的結果通過熒光信號采集系統實時采集信號連接輸送到計算機分析
實時熒光定量PCR儀
在普通PCR儀的基礎上增加一個熒光信號采集系統和計算機分析處理系統,就成了熒光定量PCR儀。其PCR擴增原理和普通PCR儀擴增原理相同,只是PCR擴增時加入的引物是利用同位素、熒光素等進行標記,使用引物和熒光探針同時與模板特異性結合擴增。擴增的結果通過熒光信號采集系統實時采集信號連接輸送到計算機
熒光定量PCR儀原理
?熒光定量PCR儀技術原理將標記有熒光素的Taqman探針與模板DNA混合后,完成高溫變性,低溫復性,適溫延伸的熱循環,并遵守聚合酶鏈反應規律,與模板DNA互補配對的Taqman探針被切斷,熒光素游離于反應體系中,在特定光激發下發出熒光,隨著循環次數的增加,被擴增的目的基因片段呈指數規律增長,通過實
熒光定量PCR儀原理
熒光定量PCR儀技術原理將標記有熒光素的Taqman探針與模板DNA混合后,完成高溫變性,低溫復性,適溫延伸的熱循環,并遵守聚合酶鏈反應規律,與模板DNA互補配對的Taqman探針被切斷,熒光素游離于反應體系中,在特定光激發下發出熒光,隨著循環次數的增加,被擴增的目的基因片段呈指數規律增長,通過實時
實時熒光定量PCR擴增和結果分析的標準操作程序
1 目的:保證擴增及結果分析的標準化、規范化。?2 該SOP變動程序:本文件的變動,可由任一使用該文件的工作人員提出,報經室技術負責人,由季度組長會議決定。如通過則公布實行。?3 使用范圍:使用GeneAmp 5700型擴增儀的實時熒光定量PCR實驗室。 ? ??4 標準程序4.1 核酸擴增標準程序
熒光定量PCR-vs.-恒溫擴增,誰才是分子診斷的未來?
熒光定量PCR 和恒溫擴增在分子診斷方面的應用日漸受關注,兩種技術孰優孰劣,且聽作者娓娓道來。基于核酸擴增的分子診斷,是通過引物介導特異性擴增目的基因,以檢測內源性(遺傳或變異)或外源性(病原體)目的基因的存在與否,從而對疾病的診斷和治療提供信息和決策依據。其主要應用場景有傳染病的診斷,血篩,腫瘤早
定量肝功能試驗的相關癥狀
右脅疼痛,喜嘆息,舌尖邊紅,脘痞,肝癖,肝大而硬,肝質地硬,肝功能異常,膽汁性肝硬化,酒精性肝硬化
全新雙重熒光定量PCR方法助力細菌污染核酸檢測
目前,核酸篩檢系統(Nucleic Acids Testing,NAT)已廣泛用于血制品常規病原體(乙肝、丙肝、艾滋、梅毒)的核酸檢測,極大降低了相關疾病的輸血傳播。但是,在輸血感染性風險中,血小板的細菌污染及相關敗血癥性輸血反應仍是棘手的問題。將核酸篩檢技術用于細菌污染檢測還有不少困難,包括:
實時熒光定量PCR的Ct值的相關介紹
Ct值(Cycle threshold,循環閾值)的含義為:每個反應管內的熒光信號到達設定閾值時所經歷的循環數 1. 熒光閾值(threshold)的設定 PCR反應的前15個循環的熒光信號作為熒光本底信號,熒光閾值的缺省(默認)設置是3-15個循環的熒光信號的標準偏差的10倍,即:thre