核酸擴增—鏈置換擴增技術(SDA)
SDA是一種基于酶促反應的DNA體外等溫擴增技術，采用標記的兩種不同熒光基團的探針。在SDA過程中，該探針被摻入到雙鏈擴增產物中，由限制內切酶的酶切使淬滅基團與熒光基團分開，從而釋放熒光，用熒光偏振檢測法定量檢測。SDA較之PCR有更高的擴增效率，耗時僅30min。其基本系統包括一種限制性核酸內切酶、一種具有鏈置換活性的DNA聚合酶、兩對引物、dNTPs以及鈣、鎂離子和緩沖系統。基本過程包括準備單鏈DNA模板、生成兩端帶酶切位點的目的DNA片段、SDA循環三個階段。 SDA技術同樣具有較高的敏感性和特異性，但由于擴增時間和模板DNA濃度的影響可能會出現非特異性擴增產物的累積，因此需要利用熱穩定機制優化其擴增條件。......閱讀全文
核酸擴增—鏈置換擴增技術(SDA)
SDA是一種基于酶促反應的DNA體外等溫擴增技術，采用標記的兩種不同熒光基團的探針。在SDA過程中，該探針被摻入到雙鏈擴增產物中，由限制內切酶的酶切使淬滅基團與熒光基團分開，從而釋放熒光，用熒光偏振檢測法定量檢測。SDA較之PCR有更高的擴增效率，耗時僅30min。其基本系統包括一種限制性核酸內
恒溫核酸擴增技術的擴增速度
由于恒溫核酸擴增只需要在一個溫度下進行，相比較于PCR不同溫度之間的循環，恒溫擴增不需要反復的升溫降溫過程，有些恒溫擴增的速度是快于PCR的擴增速度的。例如：環介導恒溫核酸擴增（LAMP），重組聚合酶擴增法（RPA）以及切刻內切酶恒溫擴增（NEAR）。目前英國公司optigene已經成功的改造了
核酸擴增—轉錄介導的擴增技術(TMA)
TMA是一種利用RNA聚合酶和逆轉錄酶在約42℃等溫條件下來擴增RNA或DNA的技術，其原理是帶有T7 RNA聚合酶識別的啟動子序列的啟動子引物與模板退火經反轉錄形成RNA-DNA雜交分子，被反轉錄酶的RNase H活性水解形成單鏈RNA，然后與引物2退火，通過反轉錄合成雙鏈DNA，在T7 RN
恒溫核酸擴增技術通量
在實際的產業化中，分子診斷儀器的通量往往至關重要。對于qPCR而言，由于引物設計的成熟和熒光通道的多樣性，往往可以比較好的實現高通量檢測。由于恒溫核酸擴增技術引物設計較為困難，單一的反應溫度會造成引物和模板，引物與引物之間的非特異性鏈接和擴增，使得恒溫擴增的檢測通量受到限制。但同時也得益于反應溫
恒溫核酸擴增技術概述
恒溫核酸擴增技術是利用各種酶，引物，脫氧核苷三磷酸（dNTP），模板DNA以及緩沖液的混合物在同一溫度下溫浴一定時間，讓不同的酶與DNA進行反應，從而達到特定DNA片段的擴增。與傳統的PCR核酸擴增相比，恒溫核酸擴增不需要在不同溫度之間的轉換，只要保持酶反應的最佳溫度，37℃、42℃、56℃或6
核酸等溫擴增技術及其應用
據微生物學家的估計，采用培養技術，僅有約1%的細菌可以培養。在過去的一個世紀里，以聚合酶鏈反應（PCR）為代表的基于核酸的檢測技術發展迅速，為其他病原體的精確檢測診斷提供了可能。毋庸置疑，Kary Mtlllis發明的PCR技術是20世紀80年代分子生物學領域的一項革命性突破。也許他本人當時也沒有想
核酸等溫擴增技術有什么
環介導等溫擴增技術（LAMP）。依賴于核酸序列的擴增技術（NASBA）。滾環擴增技術（RCA）。單引物等溫擴增技術（SPIA）。依賴于解旋酶的等溫擴增技術（HAD）。鏈接代擴增技術（SDA）。快速等溫檢測放大技術（RIDA）。切刻內切酶核酸恒溫擴增技術（NEMA）。核酸等溫擴增技術，無論是在實際操作
EMA－常溫核酸擴增技術介紹
基于分子仿生學的原理，把生物體內(如大腸桿菌，酵母或人體等)多酶介導的核酸復制機理在體外再現，使痕量的核酸靶標在普通生物耐受的條件下(常溫下)進行快速的擴增，同時利用特異性熒光探針結合擴增產物，通過熒光檢測儀實時監測熒光信號，實現核酸靶標的快速擴增和檢測。?常溫核酸擴增技（簡稱EMA技術），是由點晶
核酸擴增—環介導的等溫擴增法
2000年日本學者Notomi在Nucleic Acids Research（核酸研究）雜志上公開了一種新的適用于基因診斷的恒溫核酸擴增技術，即環介導等溫擴增技術，英文名稱為“Loop-mediated isothermal amplification"，受到了世衛組織、各國學者和相關政府部門的
依賴核酸序列的擴增技術相關
NASBA的簡要過程如下：1.RNA模板鏈進入反應混合物后，第一個引物首先與模板鏈的3'端結束。2. 反轉錄酶，合成反義的補償的DNA鏈。3. RNA 酶H（一種核糖核酸內切酶，能夠特異性地水解雜交到DNA鏈上的RNA磷酸二酯鍵，分解RNA/DNA雜交體系中的RNA鏈，但不能消化單鏈或雙
依賴核酸序列的擴增技術檢測
1 核酸提取 NASBA 方法的核酸提取可按照常規的RNA提取方法進行，根據實際需要可以采取不同的方法。 2 核酸擴增 將純化的RNA 加到標準的NASBA 反應體系中后，先在65 ℃條件下作用5 min 去除RNA 的二級結構，然后在恒溫的42 ℃條件下開始擴增反應。 3 產物的檢測
依賴核酸序列的擴增技術敘述
國內外的研究結果均表明，草莓組織中富含多糖等物質，分離優質核酸較困難，核酸巾的雜質影響taq DNA聚合酶的活性，從而影響PCR技術在草莓病毒檢測中的應用。為了提高利用PCR技術草莓病毒檢測的穩定性，國內外的學者在草莓核酸提取方法做了較多的研究，利用OIAGEN公司生產的植物RNA提取試劑盒(P
核酸序列擴增法的技術特點
中文名稱核酸序列擴增法英文名稱nucleic acid sequence-based amplification;NASBA定 義一種在等溫系統中擴增核酸的方法。即利用T7RNA聚合酶僅在結合核酸上相應位點時才能起作用的特點，將結合位點序列與靶序列相連，然后產生靶分子的RNA拷貝，形成反轉錄和RN
依賴核酸序列的擴增技術簡述
該技術的檢測反應有賴于AMV逆轉錄酶、噬菌體T7RNA多聚酶、核糖核酸酶H、兩種特別設計的特異性寡核苷酸引物和分子信標探針共同協作而完成。 NASBA全稱是nucleic acid sequence-based amplification，即依賴核酸序列的擴增技術。 依賴核酸序列的擴增技術，是
依賴核酸序列的擴增技術解析
1.概述：依賴核酸序列的擴增(Nucleic acid sequence-basedamplification，NASBA)，又稱自主序列復制系統(self-sustainedsequence replication，3SR)或再生長序列復制技術。1990年Guatelli等首先報道了這一技術.NA
核酸序列的擴增技術優勢
相對于免疫學方法或其他基因檢測法，NASBA在試驗的快速、敏感性、特異性方面有更多的優勢。 特異性強：NASBA是一種快速、等溫的RNA擴增技術，通過AMV逆轉錄酶和T7 RNA聚合酶進行的擴增反應，因為反應條件溫和以及比PCR短的反應時間，因此轉錄更加忠實于模板，錯配率很低，因而特異性更強。
核酸擴增—多重PCR
多重PCR是在單一PCR基礎上改進和發展起來的新技術，是在同一PCR體系中加入多對特異性引物，一次擴增多個DNA片斷，實現多個基因序列或多種病原體的同時檢出。多重PCR降低了檢測成本，減少了工作量，提高了檢測效率，并且可以解決淋球菌、衣原體等混合感染者臨床癥狀不明顯，檢出率低等問題。淋病患者往往
恒溫核酸擴增技術的特異性
由于恒溫核酸擴增的整個反應是沒有溫度的變化，模板DNA雙鏈的打開，引物與互補片段的鏈接以及新片段的合成都是在同一溫度下進行的。這就造成某些情況下的反應體系里引物之間形成非特異性互補，擴增，最后造成假陽性的結果。與PCR相比，恒溫核酸擴增更易出現假陽性的結果。
恒溫核酸擴增技術與傳統PCR對比
和傳統的PCR技術相比，恒溫核酸擴增不僅僅是縮短了核酸擴增的時間，更重要的是核酸擴增擺脫了對硬件的束縛。PCR技術原理是利用94℃高溫使DNA雙鏈解開，并在耐高溫的DNA聚合酶的作用下擴增DNA片段。PCR反應至少需要2個不同的溫度使DNA片段得到特異性的擴增。恒溫核酸擴增是利用各種酶與DNA之
核酸擴增熒光定量檢測
如果懷疑有乙肝的情況，那么需要到醫院進行專業的檢查，比如做核酸擴增熒光定量檢測之類的，當然核酸擴增熒光定量檢測還可以測量其他方面的情況，比如測解脲脲原體，接下來我們來了解一下核酸擴增熒光定量檢測的相關情況吧。核酸擴增熒光定量檢測檢查什么核酸方面的檢查有核酸擴增熒光定量檢測檢查，那么核酸擴增熒光定量檢
核酸擴增—實時熒光PCR
實時熒光PCR，即在常規PCR擴增時加入一對引物的同時加入一個特異性的熒光探針，該探針為一寡核苷酸，兩端分別標記一個報告熒光基團和一個淬滅熒光基團。探針完整時，報告基團發射的熒光信號被淬滅基團吸收；剛開始時，探針結合在DNA任意一條單鏈上；PCR擴增時，Taq酶的5'-3'端外切
等溫擴增技術的原理及應用
等溫擴增技術（isothermal amplification technology，ITA）是近年來發展起來的基于恒溫擴增的新型核酸擴增技術,主要包括環介導等溫擴增（loop-mediated isothermal amplification，LAMP)[1]、交叉引物擴增（crossing pr
核酸序列擴增法的定義
中文名稱核酸序列擴增法英文名稱nucleic acid sequence-based amplification;NASBA定 義一種在等溫系統中擴增核酸的方法。即利用T7RNA聚合酶僅在結合核酸上相應位點時才能起作用的特點，將結合位點序列與靶序列相連，然后產生靶分子的RNA拷貝，形成反轉錄和RN
多國批準尿液樣本核酸擴增檢測技術上市
沙眼衣原體（ct）和淋球菌（ng）被認為是全球引起生殖道感染性傳播疾病的主要病原體，男女均可感染。傳統的細胞培養等檢測方法存在對樣本采集保存條件要求高，檢測周期長，敏感性低等不足。 近年來多個國際研究顯示，在ct和ng的檢測中，核酸擴增檢測（naat）技術具有90%～97%高敏感性和99%～1
恒溫核酸擴增技術對引物的高要求
自80年代PCR技術發明以來，PCR引物的設計已經相當成熟，市場上有很多關于PCR引物設計的軟件可供使用。所以設計一對好的PCR的引物并不困難。恒溫核酸擴增剛好相反。一對或者幾對好的引物對任何一種恒溫核酸擴增技術都是相當關鍵的，可是由于恒溫核酸擴增技術各不相同，引物設計方法很難相互借鑒。目前雖然
多國批準尿液樣本核酸擴增檢測技術上市
沙眼衣原體（CT）和淋球菌（NG）被認為是全球引起生殖道感染性傳播疾病的主要病原體，男女均可感染。傳統的細胞培養等檢測方法存在對樣本采集保存條件要求高，檢測周期長，敏感性低等不足。近年來多個國際研究顯示，在CT和NG的檢測中，核酸擴增檢測（NAAT）技術具有90%～97%高敏感性和99%～100%的
依賴核酸序列的擴增技術的定義和原理
1.概述：依賴核酸序列的擴增(Nucleic acid sequence-based amplification，NASBA)，又稱自主序列復制系統(self- sustainedsequence replication，3SR)或再生長序列復制技術。1990年Guatelli等首先報道了這一技術.
溶藻弧菌核酸檢測的原理是什么
溶藻弧菌（Vibrio alginolyticus）為海水中常見嗜鹽性弧菌，1973年開始明確對人類致病，易污染食物，引起腹瀉及創傷部位感染。溶藻弧菌可導致食物中毒，其主要癥狀為不同程度的頭暈、乏力和腹痛、腹瀉等消化道癥狀。也可導致腸道外感染，如經傷口感染可導致人體引起蜂窩組織炎，游泳者為中耳炎
總結篇：一圖全面總結各種等溫PCR關鍵要素
乘著新冠的東方，PCR被廣泛關注，PCR中的等溫PCR由于其系統對儀器設備需求低也備受矚目，對于醫療設施相對較差地區，甚至可以不需要儀器，只需要一個恒溫水浴鍋即可。等溫擴增PCR發展至今已經近30年，目前市面是的等溫PCR七七八八數起來也有大約15種，其中有些工作原理相似或相同，先前也逐個進行了介紹
核酸擴增—連接酶鏈反應
LCR由基因擴增技術和連接酶方法結合而成，是繼PCR之后的快速DNA擴增方法。與PCR不同的是，LCR采用2對寡核苷酸探針，每對寡核苷酸探針與變性正負靶鏈雜交時處于相鄰的位置，兩者之間形成一個缺口，只有當它們與靶DNA堿基配對且3'與5'端相鄰位置均正確時，DNA連接酶才能將其連