第 1 天1. 大約 1.5 cm 長的尾部活檢樣品放在一個 1.5 ml 盛有 0.7 ml 尾部緩沖液的小離心管中,加 35 μl 10 mg/ml蛋白酶 K,在 55℃ 振搖溫育過夜。尾部緩沖液(配 25 ml)50 mmol/L Tris,pH 8 1.25 ml 1 mol/L Tris,pH 8100 mmol/L EDTA,pH8 &......閱讀全文
硅化學法已成為從小鼠尾剪取物、動物組織和組織培養細胞等樣品中純化高質量基因組 DNA 的方法之一。Wizard SV 基因組 DNA 純化體系是利用一個充有固相硅的濾膜來純化 基因組 DNA 的。本實驗來源于 PCR 實驗指南(第二版),作者:種康,瞿禮嘉。試劑、試劑盒PBSNa2 HP04KH2P
一、RNA 制備 模板mRNA 的質量直接影響到cDNA 合成的效率。由于mRNA 分子的結構特點,容易受RNA 酶的攻擊反應而降解,加上RNA 酶極為穩定且廣泛存在,因而在提取過程中要嚴格防止RNA 酶的污染,并設法抑制其活性,這是本實驗成敗的關鍵。所有的組織中均存在RNA 酶,人
試劑、試劑盒 PBS Na2 HP04 KH2PO4 NaCl KC1 消化液 M
試劑、試劑盒 PBSNa2 HP04KH2PO4NaClKC1消化液 MasterMix蛋白酶 K儀器、耗材 自動定位器P250 盒裝吸頭 平板密封條Vac-Man96 真空裝置 真空泵實驗步驟 一、材料1.緩沖液、溶液和試劑1XPBS(用于組織培養細胞)將下列試劑溶解于1L消毒的去離子水中,高壓滅
¤ 臨床檢驗樣本RNA的提取人和動物全血、血清、血漿、腦脊液、人淋巴細胞中提取總RNA或病毒RNA——血液(液體樣本)總RNA快速提取試劑盒(離心柱型)貨號:RP4001 700元/50次血清、血漿、全血(或其他含病毒的液體)中同時提取病毒基因組和RNA——病毒基因組DNA/RNA快速提
1、核酸抽提原理 簡單地講,核酸抽提包含樣品的裂解和純化兩大步驟。裂解是使樣品中的核酸游離在裂解體系中的過程,純化則是使核酸與裂解體系中的其它成分,如蛋白質、鹽及其它雜質徹底分離的過程。 經典的裂解液幾乎都含有去污劑 (如 SDS、Triton X-100、NP-40、Tween 20 等
第一章質粒DNA 的分離、純化和鑒定 第二章DNA 酶切及凝膠電泳 第三章大腸桿菌感受態細胞的制備和轉化 第四章RNA 的提取和cDNA 合成 第五章重組質粒的連接、轉化及篩選 第六章基因組DNA 的提取 第七章RFLP 和RAPD 技術 第八章聚合酶鏈式反應(PCR)擴增和擴增產物克隆 第九章分
實驗材料 大腸桿菌菌株 HB101 質粒 pSPL3 COS-7 細胞 載體 pBluescriptⅡ
核酸提取和純化控制程序 1. 目的:規定DNA和RNA核酸樣本提取和純化實驗應遵守的操作。 2. 適用范圍:生物樣本提取DNA和RNA核酸,并包括對核酸樣品的長期保存。 3. 基本定義和術語: DNA,脫氧核糖核:基因組DNA構成了生物體的完整遺傳信息。幾乎所有生物體的基
核酸提取和純化控制程序 1. 目的:規定DNA和RNA核酸樣本提取和純化實驗應遵守的操作。 2. 適用范圍:生物樣本提取DNA和RNA核酸,并包括對核酸樣品的長期保存。 3. 基本定義和術語: DNA,脫氧核糖核:基因組DNA構成了生物體的完整遺傳信息。幾乎所有生物體的基
隨著人類基因組測序工作的基本完成,功能基因組學逐漸成為研究的熱點。而基因表達的調控又是功能基因組學的一個重要研究領域,要想提供蛋白因子直接調控的證據,需要直接檢測蛋白質-DNA的相互作用,而染色質免疫沉淀技術(Chromatin Immunoprecipitation,ChIP)就是一種研
基因療法是廣受關注的創新治療平臺,而作為遞送基因的有力手段,AAV載體平臺的研發也在出現指數型增長。AAV載體有非常顯著的優勢,如安全性、長效性、多種血清型等,這都使AAV載體在基因治療中迅速崛起。本篇行業研究從AAV載體概述、制備與質控、策略與應用、國內外企業等方面展開,詳細介紹了AAV病毒包裝C
實驗方法原理 在 λ 噬菌體中構建基因組 DNA 文庫的步驟與在黏粒載體中的步驟基本一致。在這兩種系統中,真核 DNA 在體外與載體 DNA 連接,形成能包裝到 λ 噬菌體顆粒中
在 λ 噬菌體中構建基因組 DNA 文庫的步驟與在黏粒載體中的步驟基本一致。在這兩種系統中,真核 DNA 在體外與載體 DNA 連接,形成能包裝到 λ 噬菌體顆粒中的多聯體。構建在 λ 噬菌體中的文庫以具有感染性的重組噬菌體形式貯存和增殖。本實驗來源「分子克隆實驗指南第三版」黃培堂等譯。實驗方法原理
實驗方法原理 在 λ 噬菌體中構建基因組 DNA 文庫的步驟與在黏粒載體中的步驟基本一致。在這兩種系統中,真核 DNA 在體外與載體 DNA 連接,形成能包裝到 λ 噬菌體顆粒中的多聯體。構建在 λ 噬菌體中的文庫以具有感染性的重組噬菌體形式貯存和增殖。實驗材料 T4 噬菌體 DNA 連接酶牛小腸堿
試劑、試劑盒 擴增緩沖液 DNA 聚合酶 DNaseI 限制性內切核酸酶 ATP 鏈霉親和素-磁珠結
實驗材料 大腸桿菌菌株 HB101 質粒 pSPL3COS-7 細胞載體 pBluescriptⅡ大腸桿菌 DH5α試劑、試劑盒 pSPL3 多克隆位點圖譜限制性內切核酸酶PvuⅡT4DNA 連接酶LB 瓊脂平板黏粒載體TESOC 培養基瓊脂糖凝膠LB 肉湯培養基PBS胰酶-EDTA 溶液D
3. 染色質免疫沉淀Input對照:在進行免疫沉淀前,需要取一部分斷裂后的染色質做Input對照。Input是斷裂后的基因組DNA,需要與沉淀后的樣品DNA一起經過逆轉交聯,DNA 純化,以及最后的PCR或其他方法檢測。Input對照不僅可以驗證染色質斷裂的效果,還可以根據Input中的靶序
質粒DNA的提取與純化質粒是一類雙鏈、閉環的DNA,大小范圍從1 kb至200 kb以上不等。通常情況下,質粒可持續穩定地處于染色體外的游離狀態,具有自主復制功能;但在一定條件下也會可逆地整合到宿主染色體上,隨著染色體的復制而復制,并通過細胞分裂傳遞到后代。 質粒已成為核酸克隆和測序最常用
本方案使用克隆在 BAC 載體上的一段 500kb 的人基因組 DNA 連續序列,直接篩選與其互補的的 cDNA。但本方法也可適用于任意大小的基因組靶 DNA。本實驗來源于分子克隆實驗指南(第三版)上冊,作者:黃培堂。試劑、試劑盒擴增緩沖液DNA 聚合酶 DNaseI限制性內切核酸酶ATP鏈霉親和素
本方案以哺乳動物穿梭載體 pSPL3 為例,描述了外顯子擴增的方法,內容分為以下五個階段。階段 1: 文庫的構建; 階段 2: 電穿孔法將文庫轉染 COS-7 細胞; 階段 3:mRNA 的提取; 階段 4: 反轉錄 PCR; 階段 5: 克隆分析。本實驗來源于分子克隆實驗指南(第三版)上冊,作者:
本試劑盒提供了高效、快速從各種微量生物樣本中純化得到較高濃度基因組DNA的方法,例如:微量血液、細胞、動物組織、干燥血跡、臨床棉簽、毛囊等。采用本公司特有的DNA-only硅膠膜離心柱和配方,搭配Foregene Protease,可以在20-80分鐘提取到較高濃度、高質量的基因組DNA。專
試劑、試劑盒 擴增緩沖液DNA 聚合酶 DNaseI限制性內切核酸酶ATP鏈霉親和素-磁珠結合緩沖液T4DNA 連接酶熱穩定 DNA 聚合酶瓊脂糖凝膠BACDNA缺口平移緩沖液雜交液平末端 cDNACot1 基因組 DNA胞漿 poly(A)+RNAdNTP 溶液DNA 分子質量標志物寡
實驗原理 PCR是體外人工選擇性擴增DNA的一種方法,它類似于生物體內DNA的復制。在生物體內DNA復制需要模板、引物、DNA聚合酶、DNA解旋酶、 dNTPs;而體外PCR反應同樣需要類似的成分,有模板、引物、PCR Buffer、Taq酶、dNTPs。其中引物是人工設計的特定序列,實現對特
快速、方便、高效的純化實驗方案創新的 InhibitEX buffer 高效去除 PCR 抑制劑靈敏度高,適合多種下游應用可在 QIAcube 上自動操作圖 22. 從不同糞便樣本純化 DNA 產量從 7 個不同的糞便樣本中同時利用 QIAamp Fast DNA Stool Mini Kit
如何從糞便中快速提取基因組DNA(無抑制物,可直接做PCR)北京艾德萊提供糞便基因組DNA快速提取采用硅膠膜技術從新鮮或冷凍人類糞便或其他樣品類型(混有高濃度的PCR抑制劑)中抽提多至30μg 的基因組、細菌、病毒和寄生物DNA。獨特的吸附樹脂配合經優化的緩沖液可去除PCR抑制劑。方便的Aidlab
實驗步驟 一、桿狀病毒表達載體 最簡單的經典桿狀病毒表達載體是一個重組的桿狀病毒,其基因組含有一段外源核酸序列,通常為編碼目標蛋白質的dDNA,在多角體蛋白啟動子控制下進行轉錄。這個嵌合的基因由多角體蛋白啟動子和外源蛋白編碼序列組成
福爾馬林固定、石蠟包埋(FFPE)組織切片的存檔代表了珍貴且來源廣泛的生物醫學研究材料。隨著越來越多的研究人員轉向 FFPE 樣品的分子分析,開發特定的操作步驟,考慮這些樣品的獨特性質就變得越來越重要。QIAGEN 在 FFPE 樣本純化及下游檢測整個流程中都提供完善的解決方案。QIAamp
DNA的不同提取方法及比較傳統的DNA提取方法傳統的DNA 提取與純化,如 CTAB 法、SDS 法是在裂解細胞的基礎上,多次苯酚氯仿等有機溶劑抽提使蛋白質變性沉淀于有機相,而核酸保留在水相,達到分離核酸的目的;加入RNA 酶除去核酸中的RNA; 然后加入異丙醇、乙醇等沉淀DNA;用70
糞便基因組DNA快速提取方法,無抑制物,可直接做PCR。采用硅膠膜技術從新鮮或冷凍人類糞便或其他樣品類型(混有高濃度的PCR抑制劑)中抽提多至30μg 的基因組、細菌、病毒和寄生物DNA。獨特的吸附樹脂配合經優化的緩沖液可去除PCR抑制劑。方便的Aidlab 離心柱純化過程只需40分鐘,用于