細胞分選儀進行細胞分選時緩沖液的選擇
細胞分選儀通過磁珠分選的原理進行正選或者負選細胞,分選的細胞可立即用于流式細胞分析、功能性研究或下游分析,在短至25分鐘之內,可一次同時分選多個樣品;也可以同一個樣品中連續分選出不同類型的細胞,大限度地減少了樣品處理工作。 細胞分選儀比僅用于分析對樣本制備要求更高。需要在較短的時間內完成以確保分到高純度的活細胞同時要具備功能性如增殖、分泌細胞因子等。要求高品質的單細胞懸液以確保良好的雙聯體鑒別,并在分選過程中因發生沖突而丟棄的盡量少。 細胞分選儀對緩沖液的選擇分析: 處理哺乳動物細胞的常用培養基/緩沖液都是在1個大氣壓下使用的(實驗室工作臺上或CO2培養箱內),但在大多數細胞分選儀的分選倉內,壓力通常會超過2-4個大氣壓(具體取決于選擇噴嘴尺寸和分選條件)。 樣品分選緩沖液或分選收集緩沖液:DPBS或HBSS(去除Ca2+和Mg2+),均含10-25mM HEPES和蛋白質(通常為1-2%的熱滅活血清或BSA),以及近......閱讀全文
細胞,大鼠胰島細胞瘤細胞
INS-1細胞大鼠胰島細胞瘤細胞1)?來源:傳秋生物細胞庫2)?形態:貼壁?多角形3)?含量:>1x106 個/mL4)?污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性5)?規格:T25瓶或者1mL凍存管包裝6) 運輸:順豐發貨培養條件:培養基:RPMI1640+10%FBS+0.05mM 2-巰D基D乙
細胞免疫細胞免疫
幾乎所有的細胞表面都有MHC-I,CD8+T細胞能識別細胞表面的MHCI+抗原復合物,識別后進行攻擊。 根據功能不同T細胞可分為三類,其表面均有相應的受體,具有抗原特異性:細胞毒性T細胞(Cytotoxic T cells,Tc)、輔助性T細胞(helper T cells,TH)、抑制性T細
自然殺傷細胞NK細胞的細胞功能
自然殺傷活性由于NK細胞的殺傷活性無MHC限制,不依賴抗體,因此稱為自然殺傷活性。NK細胞胞漿豐富,含有較大的嗜天青顆粒,顆粒的含量與NK細胞的殺傷活性呈正相關。NK細胞作用于靶細胞后殺傷作用出現早,在體外1小時、體內4小時即可見到殺傷效應。NK細胞的靶細胞主要有某些腫瘤細胞(包括部分細胞系)、病毒
細胞毒性T細胞的細胞試驗
該試驗測定被特定抗原攻擊后抗原特異性CD8+T淋巴細胞的裂解或者引起的炎癥反應。用細胞毒性T淋巴細胞(CTL)測試細胞介導免疫需要成功的抗原呈遞,以及隨之產生的細胞因子、細胞接觸依賴的信號轉導來產生記憶T淋巴細胞,這是T細胞應答的基礎。CTL試驗曾用于小鼠和大鼠,也用于大型動物模型,但標準的臨床
自然殺傷細胞NK細胞的細胞表型
與T細胞、B細胞相比,NK細胞表面標志的特異性是相對的。人NK細胞mIg-,部分NK細胞CD2、CD3和CD8陽性,表達IL-2受體β鏈 (P75,CD122),CD11b/CD18陽性。常用檢測NK細胞的標記有CD16、CD56、CD57、CD59、CD11b、CD94和LAK-1。一種穩定表達在
細胞組分和細胞器——細胞膜
Isoelectric Focussing of Membrane Protein by Slab Gel Method?(Hancock Lab)??Isolation of Outer Membrane Protein from P.Aeruginosa with Octyl-Poe?(Hanc
稀有細胞和少量細胞的單細胞分離
? ?? 對于單細胞轉錄組學,單細胞蛋白組學和單細胞基因組學而言,高效的單細胞獲取方式至關重要。傳統的流式細胞分選儀是一種常用的細胞分離工具,但是在實際操作過程中一些技術壁壘。除了操作難度高之外,細胞在傳統流式中分離時需要經過相當長度的共用管路,從而產生了大量的死體積。為了彌補這些損失,就往往需要用
稀有細胞和少量細胞的單細胞分離
?對于單細胞轉錄組學,單細胞蛋白組學和單細胞基因組學而言,高效的單細胞獲取方式至關重要。傳統的流式細胞分選儀是一種常用的細胞分離工具,但是在實際操作過程中一些技術壁壘。除了操作難度高之外,細胞在傳統流式中分離時需要經過相當長度的共用管路,從而產生了大量的死體積。為了彌補這些損失,就往往需要用到大量的
細胞組分和細胞器——細胞骨架
Fixation and Immunofluorescence of the Cytoskeleton?(Mitchison Lab)??Recycling Tubulin?(Mitchison Lab)??Labeling Tubulin and Quantifying Labeling Stoi
細胞培養——細胞生長和細胞毒性
Articles posted in the Method Froum??Cell Viability AssayDye exclusion method??Viable Cell Counts Using Trypan Blue?(Gibco)???Soft Agar Assay For Colo