細胞培養中常見的生長問題!
確保充分的細胞生長是細胞培養和收集精-確數據的一個關鍵部分。對于單層生長的細胞,融合度定義為顯微鏡觀察到被一層細胞覆蓋的培養器皿表面積的百分比。比如,50%細胞融合是指一半的培養皿/瓶等的表面被細胞覆蓋。對于懸浮細胞,通常用細胞系或類型的細胞密度衡量其生長過程,但或許也可通過濁度增加和培養基顏色穩定評估“融合“。培養中的細胞生長一般發生在四個階段,如圖所示,隨著時間推移的細胞計數的對數形成一個S型曲線(S-型),不同細胞系和培養物在每個階段需要的時間有很大差異。停滯期:細胞適應培養條件的階段,細胞在此階段不分裂。細胞通常在起始培養后的24小時內附著,該階段的總時長取決于培養之初使用細胞的生長階段和接種密度。對數期:細胞在此階段積極分裂,是評估群體生長和通用數據收集的-佳時間。對數期的后期,過度擁擠導致細胞脅迫之前是傳代細胞(亞培養)的-佳時機。平穩期:隨著細胞達到100%融合,細胞在此階段生長放緩,不足1/10的細胞處于活躍細胞......閱讀全文
細胞,大鼠胰島細胞瘤細胞
INS-1細胞大鼠胰島細胞瘤細胞1)?來源:傳秋生物細胞庫2)?形態:貼壁?多角形3)?含量:>1x106 個/mL4)?污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性5)?規格:T25瓶或者1mL凍存管包裝6) 運輸:順豐發貨培養條件:培養基:RPMI1640+10%FBS+0.05mM 2-巰D基D乙
細胞免疫細胞免疫
幾乎所有的細胞表面都有MHC-I,CD8+T細胞能識別細胞表面的MHCI+抗原復合物,識別后進行攻擊。 根據功能不同T細胞可分為三類,其表面均有相應的受體,具有抗原特異性:細胞毒性T細胞(Cytotoxic T cells,Tc)、輔助性T細胞(helper T cells,TH)、抑制性T細
自然殺傷細胞NK細胞的細胞表型
與T細胞、B細胞相比,NK細胞表面標志的特異性是相對的。人NK細胞mIg-,部分NK細胞CD2、CD3和CD8陽性,表達IL-2受體β鏈 (P75,CD122),CD11b/CD18陽性。常用檢測NK細胞的標記有CD16、CD56、CD57、CD59、CD11b、CD94和LAK-1。一種穩定表達在
細胞毒性T細胞的細胞試驗
該試驗測定被特定抗原攻擊后抗原特異性CD8+T淋巴細胞的裂解或者引起的炎癥反應。用細胞毒性T淋巴細胞(CTL)測試細胞介導免疫需要成功的抗原呈遞,以及隨之產生的細胞因子、細胞接觸依賴的信號轉導來產生記憶T淋巴細胞,這是T細胞應答的基礎。CTL試驗曾用于小鼠和大鼠,也用于大型動物模型,但標準的臨床
自然殺傷細胞NK細胞的細胞功能
自然殺傷活性由于NK細胞的殺傷活性無MHC限制,不依賴抗體,因此稱為自然殺傷活性。NK細胞胞漿豐富,含有較大的嗜天青顆粒,顆粒的含量與NK細胞的殺傷活性呈正相關。NK細胞作用于靶細胞后殺傷作用出現早,在體外1小時、體內4小時即可見到殺傷效應。NK細胞的靶細胞主要有某些腫瘤細胞(包括部分細胞系)、病毒
稀有細胞和少量細胞的單細胞分離
?對于單細胞轉錄組學,單細胞蛋白組學和單細胞基因組學而言,高效的單細胞獲取方式至關重要。傳統的流式細胞分選儀是一種常用的細胞分離工具,但是在實際操作過程中一些技術壁壘。除了操作難度高之外,細胞在傳統流式中分離時需要經過相當長度的共用管路,從而產生了大量的死體積。為了彌補這些損失,就往往需要用到大量的
《細胞—干細胞》推出“神經干細胞”專題
最新一期《細胞—干細胞》(Cell Stem Cell)雜志推出了神經干細胞專題“Neural Stem Cells”。這一專題收集了神經干細胞研究方面的綜述和最新進展文章,就這一領域的發展進行了探討。 神經干細胞(neuralstemcell,NSCs)是一類具有分裂潛能和自更新能力的
稀有細胞和少量細胞的單細胞分離
? ?? 對于單細胞轉錄組學,單細胞蛋白組學和單細胞基因組學而言,高效的單細胞獲取方式至關重要。傳統的流式細胞分選儀是一種常用的細胞分離工具,但是在實際操作過程中一些技術壁壘。除了操作難度高之外,細胞在傳統流式中分離時需要經過相當長度的共用管路,從而產生了大量的死體積。為了彌補這些損失,就往往需要用
細胞組分和細胞器——細胞膜
Isoelectric Focussing of Membrane Protein by Slab Gel Method?(Hancock Lab)??Isolation of Outer Membrane Protein from P.Aeruginosa with Octyl-Poe?(Hanc
細胞組分和細胞器——細胞骨架
Fixation and Immunofluorescence of the Cytoskeleton?(Mitchison Lab)??Recycling Tubulin?(Mitchison Lab)??Labeling Tubulin and Quantifying Labeling Stoi