細胞傳代培養具體的操作步驟和注意事項
懸浮細胞可采用加入等量新鮮培養基后直接吹打分散進行傳代，或用離心法后，加入新培養基后再吹打分散進行傳代貼壁細胞實驗需準備超凈臺噴灑酒精，紫外照射30min。準備好培養瓶/皿，離心管，10%DMEM，0.25%胰酶，D-hanks液等，帶上手套，口罩等，倒去舊培養基，用D-hanks液清洗一遍，去除沉積的死細胞等。加入2ml 0.25％胰蛋白酶消化液，消化2～3min，倒置顯微鏡下觀察，待細胞單層收縮突起出現空隙時，倒去酶液。加入1～2滴管含有血清的培養液，反復吹打細胞，使其成細胞懸液。以1：2或1：3進行分裝，補充新鮮培養基，并在培養瓶上做好標記，注明代號、日期，輕輕搖勻，37℃CO2培養箱培養。細胞培養24h后，即可觀察培養液的顏色及細胞的生長情況。......閱讀全文
western－blot－具體操作步驟
什么是Westernblot?最佳答案Western免疫印跡（Western Blot）是將蛋白質轉移到膜上，然后利用抗體進行檢測。對已知表達蛋白，可用相應抗體作為一抗進行檢測，對新基因的表達產物，可通過融合部分的抗體檢測。一、原理與Southern或Northern雜交方法類似，但Western
細胞爬片免疫熒光實驗具體操作步驟
單位實驗室做過，小編順便推薦一下細胞爬片是從上海晶安生物公司買的，實驗效果不錯.細胞爬片免疫熒光步驟：1.晶安生物細胞爬片；首先是玻片的處理，普通的蓋玻片用砂輪劃成自己要的大小的小方塊，先用洗衣粉洗干凈，用水沖靜烤干，然后泡酸過夜，撈酸后流水洗凈，烤干，置于器皿中高壓滅菌，然后再烤箱中大約8小時烤干
細胞爬片免疫熒光實驗具體操作步驟
1.晶安生物細胞爬片；首先是玻片的處理，普通的蓋玻片用砂輪劃成自己要的大小的小方塊，先用洗衣粉洗干凈，用水沖靜烤干，然后泡酸過夜，撈酸后流水洗凈，烤干，置于器皿中高壓滅菌，然后再烤箱中大約8小時烤干備用。爬片可以在培養皿 六孔板或24孔板中都可，我選擇在培養皿中爬。一為節約經費（培養皿可以重復利用）
細胞爬片免疫熒光實驗具體操作步驟
細胞爬片免疫熒光步驟：1.晶安生物細胞爬片；首先是玻片的處理，普通的蓋玻片用砂輪劃成自己要的大小的小方塊，先用洗衣粉洗干凈，用水沖靜烤干，然后泡酸過夜，撈酸后流水洗凈，烤干，置于器皿中高壓滅菌，然后再烤箱中大約8小時烤干備用。爬片可以在培養皿 六孔板或24孔板中都可，我選擇在培養皿中爬。一為節約經費
細胞培養的具體步驟
一、細胞復蘇將凍存細胞從液氮中取出后，在37℃水浴鍋內不斷搖動促進其融化。移入15ml離心管中，加入10ml預熱的DMEM完全培養基，輕輕吹勻，離心，2000rpmX2min，棄上清液。加入10ml DMEM培養基清洗，棄上清液。加入10ml DMEM完全培養基，輕輕吹打，接種于10cm盤中，在含5
細胞培養的具體步驟
一、細胞復蘇將凍存細胞從液氮中取出后，在37℃水浴鍋內不斷搖動促進其融化。移入15ml離心管中，加入10ml預熱的DMEM完全培養基，輕輕吹勻，離心，2000rpmX2min，棄上清液。加入10ml DMEM培養基清洗，棄上清液。加入10ml DMEM完全培養基，輕輕吹打，接種于10cm盤中，在含5
細胞培養的具體步驟
一、細胞復蘇將凍存細胞從液氮中取出后，在37℃水浴鍋內不斷搖動促進其融化。移人15ml離心管中，加入10ml預熱的DMEM完全培養基，輕輕吹勻，離心，2000rpmX2min，棄上清液。加入10ml DMEM培養基清洗，棄上清液。加入10ml DMEM完全培養基，輕輕吹打，接種于10cm盤中，在含5
流式細胞的具體實驗步驟
一 、細胞表面標記的檢測1.試劑平衡至室溫。準備：消毒臺面；穿戴工作服，帽子，口罩和手套，放置棉簽，草紙和有蓋垃圾桶（內裝有消毒劑）。2.寫編號紙并編號。1----IgG1/ IgG1/ IgG12----CD4/CD8/CD33----CD14/CD454----3.每管加相應的抗體10l/每種和
細胞融合的具體步驟
（1）細胞準備。分貼壁和懸浮細胞兩種，前者可直接將兩親本細胞混合培養，后者需制成一定濃度的細胞懸浮液。（2）細胞融合。加促融因子于將行融合的細胞之中，誘導融合。（3）雜種細胞選擇。利用選擇性培養基等，使親本細胞死亡，而讓雜種細胞存活。（4）雜種細胞克隆。對選出的雜種細胞進行克隆（選擇與純化），經過培
流式細胞的具體實驗步驟
一 、細胞表面標記的檢測1.試劑平衡至室溫。準備：消毒臺面；穿戴工作服，帽子，口罩和手套，放置棉簽，草紙和有蓋垃圾桶（內裝有消毒劑）。2.寫編號紙并編號。1----IgG1/ IgG1/ IgG12----CD4/CD8/CD33----CD14/CD454----3.每管加相應的抗體10l/每種和
流式細胞術做凋亡的操作步驟和注意事項
流式樣品的準備：DNA含量的測定：用本法可以測定細胞周期、細胞倍體和凋亡，在樣品的制備中存在的問題主要是細胞的聚集和碎片，建議在固定細胞時加入3％小牛血清。1 培養或分離的細胞約110 6，離心沉淀后用0.3ml含10％小牛血清的PBS懸浮，移入1.5mlEP管中，加入0.7ml無水乙醇，置－20攝
流式細胞術做凋亡的操作步驟和注意事項
流式樣品的準備：DNA含量的測定：用本法可以測定細胞周期、細胞倍體和凋亡，在樣品的制備中存在的問題主要是細胞的聚集和碎片，建議在固定細胞時加入3％小牛血清。1 培養或分離的細胞約110 6，離心沉淀后用0.3ml含10％小牛血清的PBS懸浮，移入1.5mlEP管中，加入0.7ml無水乙醇，置－20攝
乳腺上皮細胞分離培養操作步驟和注意事項
乳腺主要由腺上皮組成，早期乳汁或斷奶后的乳汁含有上皮細胞團塊，可用離心法收集上皮細胞（混雜有巨噬細胞），培養時常用人胚小腸纖維細胞作飼養層，可抑制間質細胞生長。使用優化培養基可使用上皮細胞傳代，并形成克隆，在膠原底物上要形成三維立體的復層結構。胰島素，氫化可的松，霍亂腸毒素，EGF可促進上皮細胞生長
乳腺上皮細胞分離培養操作步驟和注意事項
乳腺主要由腺上皮組成，早期乳汁或斷奶后的乳汁含有上皮細胞團塊，可用離心法收集上皮細胞（混雜有巨噬細胞），培養時常用人胚小腸纖維細胞作飼養層，可抑制間質細胞生長。使用優化培養基可使用上皮細胞傳代，并形成克隆，在膠原底物上要形成三維立體的復層結構。胰島素，氫化可的松，霍亂腸毒素，EGF可促進上皮細胞生長
細胞的原代和傳代培養
實驗概要初步掌握哺乳動物細胞的原代培養與傳代培養的基本操作過程，為生物工程在醫學上的應用打下基礎。實驗原理1. ?細胞培養(Cell ?culture)是模擬機體內生理條件，將細胞從機體中取出，在人工條件下使其生存、生長、繁殖和傳代，進行細胞生命過程、細胞癌變、細胞工程等問題的研究。近年來，廣泛地應
電導率儀測試具體的操作步驟
電導率儀的使用方法1.未開電源開關前，觀察表針是否指零，可調正表頭上的螺絲，使表針指零。2.將校正測量開關扳在“校正”位置。3.插接電源線，打開電源開關，并預熱數分鐘（待指針完全穩定下來為止）調節“調正”調節器使電表指示滿度。4.當使用（1）-（8）量程來測量電導率低于300μS.cm-1的液體時，
水準儀的具體操作步驟
水準儀的具體操作步驟水準儀的使用包括：水準儀的安置、粗平、瞄準、精平、讀數五個步驟。1. 安置 安置是將儀器安裝在可以伸縮的三腳架上并置于兩觀測點之間。 先打開三腳架并使高度適中，用目估法使架頭大致水平并檢查腳架是否牢固，然后打開儀器箱，用連接螺旋將水準儀器連接在三腳架上。2. 粗平 粗平是使儀器的
橡膠拉伸試驗的具體操作步驟：
橡膠拉伸試驗的具體操作步驟：1、先將橡膠試樣安裝到夾具上，設置好拉伸為速度500mm/min。2、點擊開始試驗，在做拉伸試驗時用標尺跟蹤試樣工作標線。3、根據試驗要求，記錄拉伸至規定伸長率時負荷、橡膠拉斷時的大負荷及拉斷伸長率、拉斷所需時間并記錄伸長率曲線。4、當試件斷裂后計量變形值，精度為0.5m
水準儀的具體操作步驟
水準儀的使用包括：水準儀的安置、粗平、瞄準、精平、讀數五個步驟。1. 安置 安置是將儀器安裝在可以伸縮的三腳架上并置于兩觀測點之間。 先打開三腳架并使高度適中，用目估法使架頭大致水平并檢查腳架是否牢固，然后打開儀器箱，用連接螺旋將水準儀器連接在三腳架上。2. 粗平 粗平是使儀器的視線粗略水平，利用腳
融合蛋白技術的具體操作步驟
1、進行目的基因的克隆：根據基因序列互補原則，設計合適的引物序列，以cDNA為模板，利用PCR技術擴增不同的目的DNA片段。2、在載體中進行重組：通過限制內切酶將兩個DNA片段進行酶切并回收，然后通過連接酶將兩個具有相同末端酶切位點的基因片段進行體外連接，并克隆到高表達質粒載體中，構建重組質粒。3、
熒光定量PCR具體使用操作步驟簡介
操作步驟熒光定量PCR 實驗步驟:折疊樣品RNA的抽提①取凍存已裂解的細胞，室溫放置5分鐘使其完全溶解。②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的，蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層
脫色搖床的操作步驟和注意事項
脫色搖床廣泛應用于電泳凝膠分離譜帶的固定，考馬斯亮藍染色和脫色時的振蕩晃動，硝酸銀染色的固定、染色、顯影等，放射自顯影實驗中X光底片的顯影、定影，電泳轉移后纖維素膜的進一步處理，抗原體的反應和染色，分子雜交，細胞培養等。是生化、生物工程、教學、微生物及醫學等行業研究和生產中樣品試驗的優選設備。?脫色
脫色搖床的操作步驟和注意事項
脫色搖床廣泛應用于電泳凝膠分離譜帶的固定，考馬斯亮藍染色和脫色時的振蕩晃動，硝酸銀染色的固定、染色、顯影等，放射自顯影實驗中X光底片的顯影、定影，電泳轉移后纖維素膜的進一步處理，抗原體的反應和染色，分子雜交，細胞培養等。是生化、生物工程、教學、微生物及醫學等行業研究和生產中樣品試驗的優選設備。?脫色
細胞的原代培養和傳代培養以及器材液體準備和無菌操作
一、原代細胞培養 (一)原理：細胞培養(Cell culture)是模擬機體內生理條件，將細胞從機體中取出，在人工條件下使其生存、生長、繁殖和傳代，進行細胞生命過程、細胞癌變、細胞工程等問題的研究。近年來，廣泛地應用于分子生物學、遺傳學、免疫學、腫瘤學、細胞工程等領域，發展成一種重要生物技術
體外細胞原代培養和傳代培養實驗步驟（1）凍存和復蘇
一、實驗原理細胞培養可分為原代培養和傳代培養。直接從體內獲取的組織細胞進行首次培養為原代培養；當原代培養的細胞增殖達到一定密度后，則需要做再培養， 即將培養的細胞分散后，從一個容器以1：2或其他比率轉移到另一個或幾個容器中擴大培養，為傳代培養，傳代培養的累積次數就是細胞的代數。細胞凍存及復蘇的基
原代細胞轉染小核酸siRNA等操作步驟和注意事項
原代細胞相對普通傳代細胞要難轉染，但用對了試劑一樣可以擁有很高的轉染效率和實驗結果，下面以RFect為例，簡單介紹下原代細胞轉染的操作步驟和注意事項。原代細胞轉染操作步驟（以24孔培養板為例）：A. 細胞接種：轉染前一天接種細胞，每孔500 μl培養基（不可加抗生素），使細胞在轉染時密度在30-50
請教流式細胞的具體實驗步驟
一 、細胞表面標記的檢測1.試劑平衡至室溫。準備：消毒臺面；穿戴工作服，帽子，口罩和手套，放置棉簽，草紙和有蓋垃圾桶（內裝有消毒劑）。2.寫編號紙并編號。1----IgG1/ IgG1/ IgG12----CD4/CD8/CD33----CD14/CD454----3.每管加相應的抗體10l/每種和
細胞培養的具體步驟介紹
一、細胞復蘇 將凍存細胞從液氮中取出后，在37℃水浴鍋內不斷搖動促進其融化。移入15ml離心管中，加入10ml預熱的DMEM完全培養基，輕輕吹勻，離心，2000rpmX2min，棄上清液。加入10ml DMEM培養基清洗，棄上清液。加入10ml DMEM完全培養基，輕輕吹打，接種于10cm盤中
細胞傳代培養的優點和缺點
傳代培養 原代培養形成的單層細胞匯合以后，需要進行分離培養，否則細胞會因生成空間不足或由于細胞密度過大引起營養枯竭，都將影響細胞的生長，這一程序常稱為傳代或傳代培養。原代培養在首次傳代時即為細胞系，能連續培養下去的為連續細胞系；不能連續培養的為有限細胞系。通常，傳代培養是指擴大培養，也就是將一份細胞
傳代培養細胞染色體顯示法步驟
1.培養細胞：取處于指數生長期、用較大瓶皿培養的、80%~90%匯合單層培養細胞。 2.加秋水仙素：使用最終濃度為0.02~0.8微克/毫升營養液，溫箱繼續培養6~10小時；或用低溫封閉法：把培養細胞置于4℃條件下6~12 小時后，再于37℃溫箱繼續培養6~10小時處理（加秋水仙素）。 3.