實驗概要初步掌握哺乳動物細胞的原代培養與傳代培養的基本操作過程,為生物工程在醫學上的應用打下基礎。實驗原理1. 細胞培養(Cell culture)是模擬機體內生理條件,將細胞從機體中取出,在人工條件下使其生存、生長、繁殖和傳代,進行細胞生命過程、細胞癌變、細胞工程等問題的研究。近年來,廣泛地應用于分子生物學、遺傳學、免疫學、腫瘤學、細胞工程等領域,發展成一種重要生物技術,并取得顯著成就。由體內直接取出組織或細胞進行培養叫原代培養。原代培養細胞離體時間短,性狀與體內相似,適用于研究。一般說來,幼稚狀態的組織和細胞,如:動物的胚胎、幼仔的臟器等更容易進行原代培養。2. 體外培養的原代細胞或細胞株要在體外持續地培養就必須傳代,以便獲得穩定的細胞株或得到大量的同種細胞,并維持細胞種的延續。培養的細胞形成單層匯合以后,由于密度過大生存空間不足而引起營養枯竭,將培養的細胞分散,從容器中取出,以1:2 &......閱讀全文
實驗方法原理將組織切碎并浸洗,組織塊接種于培養瓶或皮氏培養皿的表面,加入少量含高濃度血清(40 %~50 % ) 的培養基,表面張力使標本保持原位,直到它們自發地貼附于表面,隨后細胞開始生長。試劑、試劑盒生長培養基皮氏平皿儀器、耗材鑷子手術刀移液器離心管容器實驗步驟1. 將組織移入新鮮、無菌 BSS
實驗方法原理 將組織切碎并浸洗,組織塊接種于培養瓶或皮氏培養皿的表面,加入少量含高濃度血清(40 %~50 % ) 的培養基,表面張力使標本保持原位,直到它們自發地貼附于表面,隨后細
實驗方法原理將組織切碎并浸洗,組織塊接種于培養瓶或皮氏培養皿的表面,加入少量含高濃度血清(40 %~50 % ) 的培養基,表面張力使標本保持原位,直到它們自發地貼附于表面,隨后細胞開始生長。試劑、試劑盒生長培養基  
實驗概要本文介紹了原代細胞分離技術,包括懸浮細胞的分離方法和實體組織材料的分離方法。實體組織材料的分離方法有機械分散和消化分離兩種。實驗步驟1. 懸浮細胞的分離方法 1) 將血液、羊水、胸水或腹水等懸液直接轉至離心管中,1000rpm/分鐘離心5分鐘。
一、原理將動物機體的各種組織從機體中取出,經各種酶(常用胰蛋白酶)、螯合劑(常用EDTA)或機械方法處理,分散成單細胞,置合適的培養基中培養,使細胞得以生存、生長和繁殖,這一過程稱原代培養。二、儀器、材料及試劑儀器:培養箱(調整至37℃),培養瓶、青霉素瓶、小玻璃漏斗、平皿、吸管、移液管、紗布、手術
PriCells-原代細胞鑒定技術 一、形態學鑒定1. 在倒置顯微鏡中直接觀察活細胞的形態學特征2. 細胞染色檢查 :a) 將無菌玻片置于細胞培養皿中,加細胞懸液后培養;b) 待細胞長滿玻片后取出,用PBS清洗,之后放于載玻片上,待其自然干燥;c)
一、貼壁細胞的消化法傳代1、吸除或倒掉瓶內舊培養液。2、加入1ml左右消化液(胰蛋白酶或與EDTA混合液)輕輕搖動培養瓶,使瓶底細胞都浸入溶液中。3、消化2-5分鐘后把培養瓶放置在顯微鏡下進行觀察,發現原貼壁的細胞逐漸趨于圓形,在還未漂起時,棄去消化液,加入培養液終止消化。4、用吸管將貼壁的細胞吹打
原代細胞(primary culture cell)是指從機體取出后立即培養的細胞。有人把培養的第1代細胞與傳10代以內的細胞統稱為原代細胞培養。原代細胞不僅廣泛應用于分子、細胞生物學和生物醫學基礎研究,如蛋白質組學、基因組學、細胞株(系)研究、DNA,RNA和遺傳學研究等,還可應用于當今熱門的
1. 懸浮細胞的分離方法 1) 將血液、羊水、胸水或腹水等懸液直接轉至離心管中,1000rpm/分鐘離心5分鐘。 2) 去掉上清,離心沉淀用無鈣、鎂的PBS清洗后1000rpm/分鐘離心5分鐘。此步重復兩次。 3) 用培養基重懸,調整適當細胞濃度后分瓶培養。 4) 如選用懸液中某種細胞,
原代細胞可用來轉染 siRNA、antisense RNA、microRNA 等 200bp 以內的小分子 RNA 和 DNA,可轉染絕大多數原代細胞。目前,無論國外還是國內,原代細胞的核酸轉染都是個熱點難題,市場還缺乏真正有效的商品化的原代細胞核酸轉染試劑。原代細胞能夠高效轉染絕大多數原代細胞