分子生物學實驗常用試劑配置
常用貯液與溶液1mol/L亞精胺（Spermidine）: 溶解2.55g亞精胺于足量的水中，使終體積為10ml。分裝成小份貯存于-20℃。1mol/L精胺（Spermine）：溶解3.48g精胺于足量的水中，使終體積為10ml。分裝成小份貯存于-20℃。10mol/L乙酸胺（ammonium acetate）：將77.1g乙酸胺溶解于水中，加水定容至1L后，用0.22um孔徑的濾膜過濾除菌。10mg/ml牛血清蛋白（BSA）：加100mg的牛血清蛋白（組分V或分子生物學試劑級，無DNA酶）于9.5ml水中（為減少變性， 須將蛋白加入水中，而不是將水加入蛋白），蓋好蓋后，輕輕搖動，直至牛血清蛋白完全溶解為止。不要渦旋混合。加水定容到10ml，然后分裝成小份貯存于-20℃。1mol/L二硫蘇糖醇（DTT）：在二硫蘇糖醇5g的原裝瓶中加32.4ml水，分成小份貯存于-20℃。或轉移100mg的二硫蘇糖醇 至微量離心管，加0.65ml......閱讀全文
分子生物學實驗的品質選擇——分子生物學實驗用水
?Merck Millipore 是世界*超純水生產品牌，生產產品具有始終如一的高品質，實驗重復性優異。純水是一種生化試劑，為了給廣大實驗者在日常實驗中提供便利，保證無意外發生，Millipore推出了分子生物學瓶裝水。該瓶裝水具有以下特點可以保證您的分子生物學實驗順利進行：????????????
分子生物學概念的發展與檢驗診斷—分子生物學到生物...
分子生物學概念的發展與檢驗診斷—分子生物學到生物... 經過了免疫學的熱潮，20世紀中葉開始興起了又一門新的學科“分子生物學”。人們懷著滿腔熱忱，期待這一學科能夠對那些機理不清的疾病予以新的認識。眾多科學家經過了半個世紀的努力，終于用分子生物學方法整理出一批單基因病等和基因相關的疾病。隨著基因基礎
分子生物學緒論（一）
? 一、分子生物學的基本含義 分子生物學是從分子水平研究生命本質為目的的一門新興邊緣學科，它以核酸和蛋白質等生物大分子的結構及其在遺傳信息和細胞信息傳遞中的作用為研究對象，是當前生命科學中發展最快并正與其它學科廣泛交叉與滲透的重要前沿領域。分子生物學的發展為人類認識生命現象帶來了前所未有的機會，也
分子生物學緒論（二）
? （二)現代分子生物學的建立和發展階段 這一階段是從50年代初到70年代初，以1953年Watson和Crick提出的DNA雙螺旋結構模型作為現代分子生物學誕生的里程碑開創了分子遺傳學基本理論建立和發展的黃金。DNA雙螺旋發現的最深刻意義在于：確立了核酸作為信息分子的結構基礎；提出堿基配對是核酸
分子生物學實驗設備
分子生物學實驗設備 1) 溫度控制系統：冰箱：4 ℃、-20℃、-70 ℃--樣品、 試劑 和材料等的保存 2)?恒溫培養箱：細菌平板的培養 3) 恒溫空氣搖床；菌體的培養 4) 滅菌器:?培養基、 試劑 、耗材等的滅菌 5)?PCR儀：PCR 擴增、保溫實驗等 6) 恒溫水浴及微量加熱器：保證實驗
分子生物學緒論（三）
? 2 基因組研究的發展 目前分子生物學已經從研究單個基因發展到研究生物整個基因組的結構與功能。1977年Sanger測定了ΦX174-DNA全部5375個核苷酸的序列；1978年fiers等測出SV-40DNA全部5224對堿基序列；80年代λ噬菌體DNA合部48502堿基對的序列全部測出；一些
分子生物學的概念
分子生物學是對生物在分子層次上的研究。這是一門生物學和化學之間跨學科的研究，其研究領域涵蓋了遺傳學、生物化學和生物物理學等學科。分子生物學主要致力于對細胞中不同系統之間相互作用的理解，包括DNA，RNA和蛋白質生物合成之間的關系以及了解它們之間的相互作用是如何被調控的。
補體的分子生物學
??補體的分子生物學?補體系統由30多種蛋白分子所組成，是迄今所知機體中zui復雜的一個限制性蛋白水解系統（limited proteolysis system）,根據各成分功能不同，將它們分為三組。*組為補體系統的固有成分共14個蛋白分子。即C1（含三個亞組分：C1q、Clr和Cls）、C4、C2
分子生物學先驅逝世
近日，分子生物學先驅Sydney Brenner去世，享年92歲。Brenner最著名的成就之一是在20世紀六七十年代將秀麗隱桿線蟲轉變為人類疾病研究的模型系統，這帶來了一個新的研究領域。 為此，他與生物學家John Sulston及Robert Horvitz分享了2002年諾貝爾生理學或
胃動素分子生物學特性
1 分子生物學特性 1.1 MTL分子結構及分布 MTL是由22個氨基酸組成的單鏈多肽，由Brown等于1966年在研究十二指腸pH變化和胃動力間關系過程中發現的，并于1972年將其分離并提純，因能刺激胃小體運動而得名。MTL的化學結構為苯丙-纈-脯-異亮-苯丙-蘇-酪-甘-谷-亮-谷酰-精-
分子生物學實驗診斷技術
一、酸雜交技術檢驗方法建立的基本要素是特異性和靈敏度，在復雜的物體中，使無法感覺的特定物質進入人類的觀察范圍。核酸雜交檢測技術就是利用核酸堿基嚴格配對的特異性，核酸標記物的靈敏度而建立的檢測核酸結構與功能的方法。該法建立以來已有二十年，目前研究實驗室用得多，臨床實驗室用得較少，除成本高外，關鍵是操作
制備分子生物學級的糖原
Glycogen??can conveniently substitute for tRNA as a carrier for nucleic acid precipitation. Although Molecular Biology grade glycogen can be purchased
分子生物學常用溶液配制
分子生物學常用溶液配制一、分子生物學常用貯存液的配制1．30%丙烯酰胺溶液【配制方法】將29g丙烯酰胺和1g N，N’-亞甲雙丙烯酰胺溶于總體積為60ml的水中。加熱至37℃溶解之，補加水至終體積為100ml。用濾器（0.45μm孔徑）過濾除菌，查證該溶液的pH值應不大于7.0，置棕色瓶中保存于室溫
口蹄疫分子生物學診斷技術
近年來，由于分子生物學技術的迅速發展及其在FMD診斷中的應用，建立了各種FMD的分子生物學診斷技術，主要包括以下幾種方法，核酸雜交、等電點聚焦電泳、寡核苷酸指紋圖譜分析、聚丙烯酰胺凝膠電泳、聚合酶鏈式反應、單克隆抗體技術等。（1）核酸探針 核酸探針即應用FMD的cDNA克隆片段，用32P或生物素等標
分子生物學實驗診斷技術
一、酸雜交技術檢驗方法建立的基本要素是特異性和靈敏度，在復雜的物體中，使無法感覺的特定物質進入人類的觀察范圍。核酸雜交檢測技術就是利用核酸堿基嚴格配對的特異性，核酸標記物的靈敏度而建立的檢測核酸結構與功能的方法。該法建立以來已有二十年，目前研究實驗室用得多，臨床實驗室用得較少，除成本高外，關鍵是操作
分子生物學技術的應用
分子生物學技術：可應用于遺傳性疾病的研究和病原體的檢測及腫瘤的病因學、發病學、診斷和治療等方面的研究提高到了基因分子水平。 生物學定義：生物學是研究生命現象和生物活動規律的科學。 據研究對象分為動物學、植物學、微生物學、古生物學等；依研究內容，分為分類學、解剖學、生理學、細胞學、分子生物學、
分子生物學指的是什么
分子生物學是指在分子水平上研究生命現象的科學，從生物大分子(核酸、蛋白質)的結構、功能和生物合成等方面來闡明各種生命現象的本質。研究內容包括各種生命過程，如光合作用、發育的分子機制、神經活動的機理、癌的發生等。生物大分子，特別是蛋白質和核酸結構功能的研究，是分子生物學的基礎。
分子生物學技術的分類
目前，常用的分子生物學技術有如下幾種 ： PCR- 單鏈構象多態性分析(PCR- single strand conformation analysis,PCR- SSCP) 是近年來在基因突變檢測中運用最廣泛的方法之一。PCR- SSCP 技術憑借突變可引起單鏈DNA三級構象改變,通過觀察單鏈DN
分子生物學的應用范圍
現代生物學研究的目標是要在分子水平上闡明細胞活動的規律，揭示生命的本質。分子水平的生物學研究已經廣泛的應用于組織學、細胞學、解剖學、胚胎學、遺傳學、生理學和進化論等各個傳統的生物科學領域。
土壤的分子生物學特性
在我們的實驗室里，最難搞的樣品類型之一就是土壤。在開發提取土壤中微生物DNA、RNA的試劑盒和構思提取方法的過程中，我們需要收集記錄大量各種類型土壤的有機物含量、質地、pH以及采集地。這些因素與土壤微生物含量息息相關，同樣地也影響著提取DNA、RNA的得率。下文，我將介紹一些影響土壤DNA、RNA提
分子生物學實驗小技術
當找到可能的重組質粒且條帶清晰時可直接切下含DNA 的凝膠條帶，用膠回收DNA 的方法回收質粒并進行酶切鑒定，如果DNA 量太少則需重提質粒。 用QIAprep Miniprep Spin 小量提質粒注意以下事項可提高得率A．用含抗生素的培養基培養細菌會有較高的得率。B．收菌時用tips吸干凈殘余的
分子生物學技術的分類
目前，常用的分子生物學技術有如下幾種[1]： PCR單鏈構象多態性分析 PCR-單鏈構象多態性分析(PCR -single strand conformation analysis,PCR -SSCP) 是近年來在基因突變檢測中運用最廣泛的方法之一。PCR -SSCP 技術憑借突變可引起單鏈
分子生物學常用試劑配置
一、分子生物學常用貯存液的配制1、30%丙烯酰胺溶液【配制方法】將29g丙烯酰胺和1g N,N'-亞甲雙丙烯酰胺溶于總體積為60ml的水中。加熱至37℃溶解之，補加水至終體積為100ml.用濾器（0.45μm孔徑）過濾除菌，查證該溶液的pH值應不大于7.0,置棕色瓶中保存于室溫。【注意】丙烯
國際分子生物學公司簡介
Promega: Promega公司是分子生物學研究工具的經典品牌，已有接近30年的歷史，是生命科學這個朝陽產業中的"老字號"。該公司所特有的螢光素酶生物發光技術，靈敏度高，信號/背景比率低，在基礎研究和藥物篩選領域內得到廣泛的應用和認可。應用范圍涉及報告基因檢測；細胞學活力、細胞毒作用、細胞凋亡檢
分子生物學常用實驗技術（一）
第一章質粒DNA 的分離、純化和鑒定第二章DNA 酶切及凝膠電泳第三章大腸桿菌感受態細胞的制備和轉化第四章RNA 的提取和cDNA 合成第五章重組質粒的連接、轉化及篩選第六章基因組DNA 的提取第七章RFLP 和RAPD 技術第八章聚合酶鏈式反應(PCR)擴增和擴增產物克隆第九章分子雜交技術第十章測
分子生物學常用實驗技術（三）
第二章DNA 酶切及凝膠電泳第一節概述一. DNA 的限制性內切酶酶切分析 限制性內切酶能特異地結合于一段被稱為限制性酶識別序列的DNA 序列之內或其附近的特異位點上,并切割雙鏈DNA。它可分為三類:Ⅰ類和Ⅲ類酶在同一蛋白質分子中兼有切割和修飾(甲基化)作用且依賴于ATP 的存在。Ⅰ類酶結
分子生物學常用實驗技術（五）
第四章RNA 的提取和cDNA 合成 第一節概述 從真核生物的組織或細胞中提取mRNA,通過酶促反應逆轉錄合成cDNA 的第一鏈和第二鏈,將雙鏈cDNA 和載體連接,然后轉化擴增, 即可獲得cDNA 文庫,構建的cDNA 文庫可用于真核生物基因的結構、表達和調控的分析;比較cDNA 和相
分子生物學常用實驗技術（六）
一、材料 提純TMV 病毒液（10mg/ml）。二、設備 冷凍臺式離心機，低溫真空干燥儀，電泳儀，電泳槽。三、試劑 TE-飽和酚:氯仿（1:1），氯仿，3M NaAc(pH5.2)，乙醇(100%和70%)，TE 緩沖液，無RNA 酶的雙菌水。四、操作步驟1、取一eppendorf 管加入提純
分子生物學常用實驗技術（七）
（四） 電泳分析 通常合成的cDNA 第一鏈和第二鏈長度為350-6000 堿基,需進行1.4%堿性瓊脂糖電泳。將第一鏈和第二鏈摻入測定管中的反應液先用酚抽提,乙醇沉淀，方法見本章（二）第二鏈合成中的9-12 步，一般第一鏈和第二鏈上樣量相同。1. 標準分子量DNA 參照物的同位素標記(1) 通常
分子生物學常用實驗技術（八）
第五章重組質粒的連接、轉化及篩選第一節概述 質粒具有穩定可靠和操作簡便的優點。如果要克隆較小的DNA 片段(＜10kb)且結構簡單,質粒要比其它任何載體都要好。在質粒載體上進行克隆,從原理上說是很簡單的，先用限制性內切酶切割質粒DNA 和目的DNA 片段, 然后體外使兩者相連接, 再用所得