膠體金對蛋白的吸附主要取決于pH值,在接近蛋白質的等電點或偏堿的條件下,二者容易形成牢固的結合物。如果膠體金的pH值低于蛋白質的等電點時,則會聚集而失去結合能力。除此以外膠體金顆粒的大小、離子強度、蛋白質的分子量等都影響膠體金與蛋白質的結合。 1.待標記蛋白溶液的制備 將待標記蛋白預先對0.005Mol/L pH7.0 NaCl溶液中4℃透析過夜,以除去多余的鹽離子,然后100 000g4℃離心1h,去除聚合物。 2.待標膠體金溶液的準備 以0.1Mol/L K2CO3或0.1Mol/L HCl調膠體金液的pH值。標記IgG時,調至9.0;標記McAb時,調至8.2;標記親和層析抗體時,調至7.6;標記SPA時,調至5.9~6.2;標記ConA時,調至8.0;標記親和素時,調至9~10。 由于膠體金溶液可能損壞pH計的電板,因此,在調節pH時,采用精密pH試紙測定為宜。 3.膠體金與標記蛋白用量之比的確定 (1)根......閱讀全文
膠體金標記技術是以膠體金作為示蹤標志物或顯色劑,應用于抗原抗體反應的一種新型免疫標記技術。由于它不存在內源酶干擾及放射性同位素污染等問題,且利用不同顆粒大小的膠體金還可以作雙重甚至多重標記,使定位更加精確。因此已成為繼熒光素、酶、同位素及乳膠標記技術之后的一種新型標記技術。現已廣泛應用于電鏡、流式細
1、側流免疫層析檢測技術 側流免疫層析檢測技術(LFIA) 也稱橫向流動免疫檢測技術,是出現于20世紀60年代初期的一種獨特的免疫分析方式,以條狀纖維層析材料為固相,借助毛細管的吸附作用使樣品在層析材料上移動,其中樣品
摘要免疫膠體金技術是四大免疫標記技術之一,問世二十多年來發展十分迅速,在生物醫學各研究領域特別是在醫學檢驗中得到了日益廣泛的應用。本文從膠體金技術的基本原理、制備方法、標記技術和實際應用等幾個方面對膠體金技術作了較系統介紹。 1971年Faulk 和Taytor將膠體金引人免疫化學,此
1、側流免疫層析檢測技術 側流免疫層析檢測技術(LFIA) 也稱橫向流動免疫檢測技術,是出現于20世紀60年代初期的一種獨特的免疫分析方式,以條狀纖維層析材料為固相,借助毛細管的吸附作用使樣品在層析材料上移動,其中樣品中的待測物與層析材料上一定區域的抗
IVD最具有發展潛力的細分市場—POCT隨著生命科學的發展,實驗室檢驗手段呈現兩極發展:一方面是實驗室全自動化大型檢驗設備另一方面是用于現場檢驗的POCT,實現小型、快速、即時、簡易的檢驗手段。即時檢測(Point-of-careTesting,POCT)寬泛地說是指一種快速檢測分析技術,能在病人床
(一) 原理 免疫膠體金技術是以膠體金作為示蹤標志物應用于抗原抗體的一種新型的免疫標記技術。膠體金是由氯金酸(HAuCl4)在還原劑如白磷、抗壞血酸、枸櫞酸鈉、鞣酸等作用下,聚合成為特定大小的金顆粒,并由于靜電作用成為一種穩定的膠體狀態,稱為膠體金。膠體金在弱堿環境下
繼三大標記技術(熒光素、放射性同位素和酶)之后,一種固相標記免疫測定技術--免疫膠體金技術(Immune colloidal gold technique, ICG)逐漸發展起來。它是以膠體金作為標記物,利用抗原抗體特異性反應,對抗原或抗體物質進行定性乃至定量研究的標記技術。近年來,該技術因其操作簡
一、免疫組化技術的基本原理應用免疫學及組織化學原理,對組織切片或細胞標本中的某些化學成分進行原位的定性、定位或定量研究,這種技術稱為免疫組織化學技術或免疫細胞化學技術。眾所周知,抗體與抗原之間的結合具有高度的特異性。免疫組化正是利用這一特性,即先將組織或細胞中的某些化學物質提取出來,以其作為抗原或半
近年來,感染性疾病的新發突發不斷威脅人類健康,非典型肺炎、中東呼吸綜合征、流感、埃博拉、寨卡病毒、黃熱病、裂谷熱等傳染性疾病的傳播,成為全球公共衛生問題。隨著城市化的發展、全球貿易往來的增加,環境改變加劇自然疫源性傳染病的傳播風險,感染性疾病的預防控制刻不容緩。因此,開展傳染病的即時快速檢測,對于感
近年來,感染性疾病的新發突發不斷威脅人類健康,新型冠狀病毒肺炎、中東呼吸綜合征、流感、埃博拉、寨卡病毒、黃熱病、裂谷熱等傳染性疾病的傳播,成為全球公共衛生問題。隨著城市化的發展、全球貿易往來的增加,環境改變加劇自然疫源性傳染病的傳播風險,感染性疾病的預防控制刻不容緩。因此,開展傳染病的即時快速檢測,
1、免疫學檢測技術 之前提到95%的食品過敏原屬于蛋白質,因此專門針對蛋白檢測的免疫學相關技術是檢測食品中蛋白類過敏原的重要手段。其中免疫學檢測包括免疫吸附技術、免疫層析技術、免疫傳感器技術、免疫擴散技術以及免疫印跡等技術。 免疫吸附技術主要包括酶聯免疫吸附技術和放射/酶聯吸附抑制實驗。酶聯
生產企業必須能夠克服大量的技術難題才能制備出能應用于診斷領域的免疫金復合物。免疫金標記技術是一種將膠體金顆粒與包括抗原、抗體在內的許多蛋白質標記形成免疫金復合物的技術。雖然這種免疫金標記技術呈 現出多種多樣的應用方式,但目前主要應用是以快速檢測試紙盒的形 式使用于疾病的診斷和監測。1在過去的十年里,
(一) 原理免疫膠體金技術是以膠體金作為示蹤標志物應用于抗原 抗體的一種新型的免疫標記技術。膠體金是由氯金酸(HAuCl4)在還原劑如白磷、抗壞血酸、枸櫞酸鈉、鞣酸等作用下,聚合成為特定大小的金顆粒,并由于靜電作用成為一種穩定的膠體狀態,稱為膠體金。膠體金在弱堿環境下帶負電荷,可與蛋白質分
膠體金標記蛋白A技術(Protein A-gold technique, PAg法) PAg復合物制備方法簡便,作為第二抗體,無種屬特異性,可以免去不同種屬動物要制備不同的特異性免疫球蛋白。PAg 復合物與包埋劑和細胞成分都極少發生非特異性的交互作用,蛋白A和金粒間非共價的結
一、免疫組化技術的基本原理應用免疫學及組織化學原理,對組織切片或細胞標本中的某些化學成分進行原位的定性、定位或定量研究,這種技術稱為免疫組織化學技術或免疫細胞化學技術。眾所周知,抗體與抗原之間的結合具有高度的特異性。免疫組化正是利用這一特性,即先將組織或細胞中的某些化學物質提取出來,以其作為抗原或半
免疫組化技術實驗原理: 抗原抗體反應,即抗原與抗體特異性結合的原理,通過化學反應使標記抗體的顯色劑(熒光素、酶、金屬離子、同位素)顯色來確定組織細胞內抗原(多肽和蛋白質),對其進行定位、定性及定量的研究。 眾所周知,抗體與抗原之間的結合具有高度的特異性。免疫組化正是利用這一特性,即先將
免疫膠體金(Immune colloidal gold)基本原理和常用的免疫膠體金膠體金是一種常用的標記技術,是以膠體金作為示蹤標志物應用于抗原抗體的一種新型的免疫標記技術,有其獨特的優點。近年已在各種生物學研究中廣泛使用。在臨床使用的免疫印跡技術幾乎都使用其標記。同時在流式、電鏡、免疫、分子生物學
膠體金標記蛋白A技術(Protein A-gold technique, PAg法) PAg復合物制備方法簡便,作為第二抗體,無種屬特異性,可以免去不同種屬動物要制備不同的特異性免疫球蛋白。PAg 復合物與包埋劑和細胞成分都極少發生非特異性的交互作用,蛋白A和金粒間非共價的結合特性既不影響蛋白A
免疫組化技術實驗原理: 抗原抗體反應,即抗原與抗體特異性結合的原理,通過化學反應使標記抗體的顯色劑(熒光素、酶、金屬離子、同位素)顯色來確定組織細胞內抗原(多肽和蛋白質),對其進行定位、定性及定量的研究。眾所周知,抗體與抗原之間的結合具有高度的特異性。免疫組化正是利用這一特性,即先將組織或細胞中的某
原理 免疫膠體金技術是以膠體金作為示蹤標志物應用于抗原抗體的一種新型的免疫標記技術。膠體金是由氯金酸( HAuCl4 )在還原劑如白磷、抗壞血酸、枸櫞酸鈉、鞣酸等作用下,聚合成為特定大小的金顆粒,并由于靜電作用成為一種穩定的膠體狀態,稱為膠體金。膠體金在弱堿
一、免疫膠體金技術的基本知識1、膠體金的概念氯金酸(HAuCl4)在還原劑作用下,可聚合成一定大小的金顆粒,形成帶負電的疏水膠溶液。由于靜電作用而成為穩定的膠體狀態,故稱膠體金。2、免疫金標記技術膠體金顆粒表面負電荷與蛋白質的正電荷基團因靜電吸附而形成牢固結合。膠體金對蛋白質有很強的吸附功能,蛋白質
一、原理金免疫技術是免疫標記技術之一,金鹽被還原成原子金后形成金顆粒懸浮(膠體金),這種金顆粒呈紅色,并能與蛋白質等大分子物質結合,因此,可用膠體金作為標記物來檢測標本中的抗原或抗體。典型的測定方法有斑點買免疫滲濾試驗和斑點免疫層析試驗等。二、材料1 、HCG金標試紙條2、妊娠尿液 正常尿液三、方法
免疫細胞化學的發展對許多領域的研究起到很大的推動作用,在神經科學的研究中尤為突出。本章 僅就免疫細胞化學在神經科學的基礎研究方面的應用做一簡要介紹。 一、確定神經遞質的性質、定性和分布 早期的神經科學工作者應用傳統的神經解剖學研究方法如甲基藍染色法、鍍銀染色法等對中樞及外周神經系統的結構做了大量
金標法是Faulk和Taylor(1971)提出的,并首先用于免疫電鏡。它是利用膠體金在堿性環境中帶有負電的性質,使其與抗體相吸附,從而將抗體標記。當用金標記的抗體與抗原 反應時,在光鏡水平膠金液呈現鮮艷的櫻紅色,不需加外進行染色。在電鏡水平,金顆粒具有很高的電子密度,清晰可辨。因此,免疫
摘 要: 目的 建立一種快速、簡易的檢測血清中抗幽門螺桿菌(Hp)細胞毒素相關蛋白A(CagA)抗體的膠體金免疫層析法(GICA)。 方法 采用檸檬酸三鈉還原法制備膠體金顆粒,標記葡萄球菌A蛋白(SPA),將重組 的CagA抗原劃線固定于硝酸纖維素膜上,制成免疫層析檢測試條。 血清中IgG
一、膠體金的穩定性及免疫膠體金的貯存膠體金具有很高的動力學穩定性,在穩定因素不受破壞時自身凝聚極慢,可放置數年不發生凝聚。影響穩定的因素主要有電解質、溶膠濃度、溫度、非電解質等。 金溶膠必須有少量電解質作穩定劑,但濃度不宜過高。高濃度親水性非電解質能剝去膠粒外面的水化膜使其凝聚。少量的高分子物質
第一節 化學發光免疫分析技術概述免疫學是生命科學和醫學中一門重要的基礎和前沿學科,以免疫學理論和原理為基礎的免疫學檢驗在臨床疾病的預防、診斷、治療及預后評估中發揮重要作用。免疫學檢驗是依據抗原與抗體特異性反應原理,借助于各種敏感的標記、示蹤(放射性核素、熒光素、酶、鑭系元素、發光物質、膠體金等)技術
二、 免疫細胞化學技術 免疫細胞化學技術(immunocytochemistry)是根據免疫學原理,利用抗原抗體特異結合的特性定位組織和細胞中特異大分子的一類技術。它包括光鏡水平(簡稱免疫組化)和電鏡水平(簡稱免疫電鏡)的免疫細胞化學技術。應用免疫細胞化學技術可在原位檢測細胞的各種大分子,
免疫膠體金技術(Immune colloidal gold technique) 是以膠體金作為示蹤標志物應用于抗原抗體的一種新型的免疫標記技術。膠體金是由氯金酸(HAuCl4)在還原劑如白磷、抗壞血酸、枸櫞酸鈉、鞣酸等作用下,聚合成為特定大小的金顆粒,并由于靜電作用成為一種穩定的膠體狀態
膠體金是氯金酸在還原劑的作用下,聚合成特定大小的金顆粒,并由于靜電作用形成一種穩定的膠體狀態,故稱之為膠體金。膠體金溶液的常見制備方法大致分為白磷還原法、硼氫化鈉還原法、抗壞血酸鹽還原法、檸檬酸三鈉還原法和鞣酸檸檬酸三鈉還原法。其基本原理是向一定濃度的金溶液內加入適量還原劑,使金離子還原為金原子。通