高效液相色譜的流動相要點
流動相溶劑的選擇1)所選用的流動相溶劑要有一定的化學穩定性,不與固定相和樣品組分起反應,其純度和化學特性必須滿足色譜過程的穩定性和重復性的要求。2)溶劑應當不干擾檢測器的工作,溶劑應與檢測器匹配,選擇不影響檢測器正常工作應選擇在測定波長范圍內無吸收的流動相。3)在制備分離中,溶劑應當易于除去,不干擾對分離組分的回收。4)溶劑的粘度要小,保證合適的柱壓降。5)從實用角度考慮,溶劑應當價格低廉,容易購得,使用安全,純度要高。......閱讀全文
高效液相色譜的流動相要點
流動相溶劑的選擇1)所選用的流動相溶劑要有一定的化學穩定性,不與固定相和樣品組分起反應,其純度和化學特性必須滿足色譜過程的穩定性和重復性的要求。2)溶劑應當不干擾檢測器的工作,溶劑應與檢測器匹配,選擇不影響檢測器正常工作應選擇在測定波長范圍內無吸收的流動相。3)在制備分離中,溶劑應當易于除去,不干擾
高效液相色譜流動相選擇
流動相選擇1)由強到弱:一般先用90%的乙腈(或甲醇)/水(或緩沖溶液)進行試驗,這樣可以很快地得到分離結果,然后根據出峰情況調整有機溶劑(乙腈或甲醇)的比例。2)三倍規則:每減少10%的有機溶劑(甲醇或乙腈)的量,保留因子約增加3倍,此為三倍規則。這是一個聰明而又省力的辦法。調整的過程中,注意觀察
高效液相色譜流動相選擇
?????? 流動相的性質要求 ?????? 一個理想的液相色譜流動相溶劑應具有低粘度、與檢測器兼容性好、易于得到純品和低毒性等特征。?????? 流動相選擇 ?????? 1:由強到弱:一般先用90%的乙腈(或甲醇)/水(或緩沖溶液)進行試驗,這樣可以很快地得到分離結果,然后根據出峰情況
液相色譜流動相選擇要點
1)流動相應不改變填料的任何性質。低交聯度的離子交換樹脂和排阻色譜填料有時遇到某些有機相會溶脹或收縮,從而改變色譜柱填床的性質。堿性流動相不能用于硅膠柱系統。酸性流動相不能用于氧化鋁、氧化鎂等吸附劑的柱系統。2)純度。色譜柱的壽命與大量流動相通過有關,特別是當溶劑所含雜質在柱上積累時。3)必須與檢測
高效液相色譜流動相如何脫氣
高效液相色譜儀(HPLC)現已成為有機化學分析的重要手段之一。同樣,在食品分析中,無論是殘留分析還是成分分析,HPLC也已成為不可或缺的分析儀器。和其它分析儀器一樣,你若想讓HPLC很好地為你工作、得到可靠的數據,首先你要保養好它,使它處于一個良好的待機狀態,這樣你操作它進行分析時就可以比較順利地獲
高效液相色譜的流動相選擇方法
流動相溶劑的選擇1)所選用的流動相溶劑要有一定的化學穩定性,不與固定相和樣品組分起反應,其純度和化學特性必須滿足色譜過程的穩定性和重復性的要求。2)溶劑應當不干擾檢測器的工作,溶劑應與檢測器匹配,選擇不影響檢測器正常工作應選擇在測定波長范圍內無吸收的流動相。3)在制備分離中,溶劑應當易于除去,不干擾
高效液相色譜的流動相如何選擇
由于高效液相色譜中流動相是液體,它對組分有親和力,并參與固定相對組分的競爭。因此,正確選擇流動相直接影響組分的分離度。對流動相溶劑的要求是:(1)溶劑對于待測樣品,必須具有合適的極性和良好的選擇性。(2)溶劑要與檢測器匹配。對于紫外吸收檢測器,應注意選用檢測器波長比溶劑的紫外截止波長要長。所謂溶劑的
高效液相色譜對流動相的脫氣
高效液相色譜對流動相的脫氣脫氣方式:在線脫氣機脫氣,前期流動超聲波超聲脫氣; 系統中氣泡的產生:流動相本身存在,梯度淋洗混合后放出氣泡; 氣泡的影響:存在于管路中,系統壓力不穩定,實驗結果有偏差;存在于單向閥中,易造成液體回流,流量不準確,甚至是不吸液;存在于檢測器中,出現鬼峰,影響檢測準確性。
高效液相色譜流動相的選擇原則
高效液相色譜儀分析時流動相的選擇原則:1 選擇色譜醇的溶劑作為流動相不要隨意加滿溶劑瓶。作為分析流動相,應避免不必要的浪費,防止污染環境,危害身體健康。應該根據樣哦數量,計算需要使用的溶劑體積,添加適量流動相到試劑瓶中作為流動相。因為有些有機溶劑長期放置易變質,比如四氫呋喃在光照下就容易變質,甲醇或
高效液相色譜流動相和固定相
液相色譜有正反之說,所以流動相和固定相也有類似的分類。1.先說流動相:a.反相流動相:有機相甲醇、有機相乙腈、水相緩沖鹽。緩沖鹽的范圍實在是太廣了,磷酸鹽緩沖液,醋酸鹽緩沖液等等b.正相流動相:乙醇、四氫呋喃、氯仿等等2.固定相a.反相:碳十八柱(C18)、碳八柱(C8)、苯基柱b.正相:氨基柱、氰
高效液相色譜流動相的性質要求
流動相的性質要求一個理想的液相色譜流動相溶劑應具有低粘度、與檢測器兼容性好、易于得到純品和低毒性等特征。
高效液相色譜流動相的注意事項
一、普通C8及C18反相色譜柱當色譜柱使用較長時間之后,就可能發生柱壓升高、分離度不好、柱效降低、峰形不好等情況,這時就需要根據故障原因對色譜柱進行清堵與再生,以延長色譜柱的使用壽命。具體原因及處理方法如下:1)篩板堵塞與柱頭塌陷主要現象有柱壓嚴重升高或不穩定、色譜峰拖尾、色譜峰變寬、色譜峰分叉、禿
高效液相色譜流動相ph有何影響
如果是中性物質,水相pH值的酸堿性對它沒什么影響。不過酸性物質和堿性物質的影響就比較大。比如,堿性物質在pH值6.8的緩沖液里保留時間就會比較靠后,如果pH值變成4.5,那么保留時間肯定會前移。另外水相pH值對于峰型也會有影響。所以水相pH值通常是根據被測物質的PKa值來確定的。
高效液相色譜(HPLC)流動相的性質要求
高效液相色譜(HPLC)流動相溶劑具有粘度低、與檢測器相容性好、產品易得、毒性低等特點。選擇填料(固定相)后,強溶劑對填料表面溶質的吸附降低,相應的容量因子K降低。然而,較弱的溶劑增加了溶質在填料表面的吸附,相應的容量因子k也增加了? 因此,k值是流動相組成的函數? 塔板數n通常與流動相的粘度成反比
高效液相色譜流動相的幾點注意事項
高效液相色譜的流動相通常是各種低沸點溶劑和水溶液。它是影響分離的一個非常重要因素。在實際工作中,流動相的選擇和優化是確定色譜分析的主要工作。 一、 流動相溶劑的選擇 1.所選用的流動相溶劑要有一定的化學穩定性,不與固定相和樣品組分起反應,其純度和化學特性必須滿足色譜過程的穩定性和重復性的要求
高效液相色譜色譜柱的填料和流動相的組分
應按各品種項下的規定,常用的色譜柱填料有硅膠和化學鍵合硅膠。后者以十八烷基硅烷鍵合硅膠最為常用辛基鍵合硅膠次之,氰基或氨基鍵合硅膠也有使用;離子交換填料用于離子交換色譜;凝膠或玻璃微球等,用于分子排阻色譜等。注樣量一般為數微升。除另有規定外,柱溫為室溫,檢測器為紫外吸收檢測器。 在用紫外吸收檢
高效液相色譜流動相和固定相都有哪些
1、反相固定相:C18、C82、正相固定相:硅膠、氨基鍵合、氰基鍵合3、流動相:甲醇、乙腈、水一、固定相的形狀1、全多孔型最初由氧化硅、氧化鋁、硅藻土等制成的多孔球體 ?100μm的大顆粒,表面涂漬固定液。傳質速度慢,柱效低。?現采用10μm以下的小顆粒。2、表面多孔型(薄殼型微珠)?30~40μm
高效液相色譜日常簡易保養及維護——流動相
流動相的操作要求: 高效液相級色譜醇,二次蒸餾水,緩沖鹽一定要過濾; 流動相脫氣至關重要(可采用抽濾,超聲波脫氣等方法)
高效液相色譜流動相和固定相都有哪些
高效液相色譜儀流動相和固定相都有哪些?1、反相固定相:C18、C82、正相固定相:硅膠、氨基鍵合、氰基鍵合3、流動相:甲醇、乙腈、水一、固定相的形狀1、全多孔型最初由氧化硅、氧化鋁、硅藻土等制成的多孔球體? 100μm的大顆粒,表面涂漬固定液傳質速度慢,柱效低 現采用10μm以下的小顆粒。向左轉|向
高效液相色譜流動相和固定相都有哪些
液相色譜有正反之說,所以流動相和固定相也有類似的分類。1.先說流動相:a.反相流動相:有機相甲醇、有機相乙腈、水相緩沖鹽。緩沖鹽的范圍實在是太廣了,磷酸鹽緩沖液,醋酸鹽緩沖液等等b.正相流動相:乙醇、四氫呋喃、氯仿等等2.固定相a.反相:碳十八柱(C18)、碳八柱(C8)、苯基柱b.正相:氨基柱、氰
高效液相色譜流動相和固定相都有哪些
1、反相固定相:C18、C82、正相固定相:硅膠、氨基鍵合、氰基鍵合3、流動相:甲醇、乙腈、水一、固定相的形狀1、全多孔型最初由氧化硅、氧化鋁、硅藻土等制成的多孔球體 ?100μm的大顆粒,表面涂漬固定液。傳質速度慢,柱效低。?現采用10μm以下的小顆粒。2、表面多孔型(薄殼型微珠)?30~40μm
高效液相色譜流動相和固定相都有哪些
1、反相固定相:C18、C82、正相固定相:硅膠、氨基鍵合、氰基鍵合3、流動相:甲醇、乙腈、水一、固定相的形狀1、全多孔型最初由氧化硅、氧化鋁、硅藻土等制成的多孔球體 ?100μm的大顆粒,表面涂漬固定液。傳質速度慢,柱效低。?現采用10μm以下的小顆粒。2、表面多孔型(薄殼型微珠)?30~40μm
高效液相色譜流動相和固定相都有哪些
1、反相固定相:C18、C82、正相固定相:硅膠、氨基鍵合、氰基鍵合3、流動相:甲醇、乙腈、水一、固定相的形狀1、全多孔型最初由氧化硅、氧化鋁、硅藻土等制成的多孔球體 ?100μm的大顆粒,表面涂漬固定液。傳質速度慢,柱效低。?現采用10μm以下的小顆粒。2、表面多孔型(薄殼型微珠)?30~40μm
液相色譜流動相小議
一、液相色譜流動相的性質要求一個理想的液相色譜流動相溶劑應具有低粘度、與檢測器兼容性好、易于得到純品和低毒性等特征。選好填料(固定相)后,強溶劑使溶質在填料表面的吸附減少,相應的容量因子k降低;而較弱的溶劑使溶質在填料表面吸附增加,相應的容量因子k升高。因此,k值是流動相組成的函數。塔板數N一般與流
液相色譜流動相脫氣
流動相的脫氣HPLC所用流動相必須預先脫氣,否則容易在系統內逸出氣泡,影響泵的工作。氣泡還會影響柱的分離效率,影響檢測器的靈敏度、基線穩定性,甚至使無法檢測。(噪聲增大,基線不穩,突然跳動)。此外,溶解在流動相中的氧還可能與樣品、流動相甚至固定相(如烷基胺)反應。溶解氣體還會引起溶劑PH的變化,對分
高效液相色譜儀正確配置流動相的要點
1.高效液相色譜儀的分離原理主要取決于流動相和固定相的吸附和解吸。流動相的正確配置對實驗數據和分離效果至關重要。首先,流動相構型中應注意的問題-一般情況下,溶劑的混合是根據體積比(V≤V)或重量比(W≤W)進行的。溶液的體積隨溫度的變化而變化,因此根據重量比混合流動相。樣品測定的重復性好,但操作繁瑣
簡介高效液相色譜(HPLC)流動相的性質要求
(1)流動不會相應地改變填料的任何性質 低交聯度離子交換樹脂和排斥色譜填料有時會遇到一些有機相的膨脹或收縮,從而改變色譜柱填料床的性能。堿性流動相不能用于硅膠柱體系中,酸性流動相不能用于氧化鋁、氧化鎂等吸附柱體系中。 (3)必須與探測器配套。當使用紫外檢測器時,所用的流動相在檢測波長上不應吸收
高效液相色譜色譜柱的填料和流動相的組分介紹
應按各品種項下的規定,常用的色譜柱填料有硅膠和化學鍵合硅膠。后者以十八烷基硅烷鍵合硅膠最為常用辛基鍵合硅膠次之,氰基或氨基鍵合硅膠也有使用;離子交換填料用于離子交換色譜;凝膠或玻璃微球等,用于分子排阻色譜等。注樣量一般為數微升。除另有規定外,柱溫為室溫,檢測器為紫外吸收檢測器。 在用紫外吸收檢
液相色譜流動相的特點
液相色譜是樣品組分在柱填料與流動相之間質量交換而達到分離的目的,因此要求流動相具備以下的特點: (1)流動相對樣品具有一定的溶解能力,保證樣品組分不會沉淀在柱中(或長時間保留在柱中)。 (2)流動相與樣品不產生化學反應 (3)流動相的黏度要盡量小,以便得到好的分離效果;降低柱壓降,延長泵的
液相色譜流動相的貯存
液相色譜流動相的貯存流動相一般貯存于玻璃、聚四氟乙烯或不銹鋼容器內,不能貯存在塑料容器中。因許多有機溶劑如甲醇、乙酸等可浸出塑料表面的增塑劑,導致溶劑受污染。這種被污染的溶劑如用于HPLC系統,可能造成柱效降低。貯存容器一定要蓋嚴,防止溶劑揮發引起組成變化,也防止氧和二氧化碳溶入流動相。磷酸鹽、乙酸