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    PCR(聚合酶鏈式反應)的反應原理

    【原理】 PCR(polymerase chain reaction)用于在體外將微量的目標DNA大量擴增,以便進行分析。反應體系:①樣品DNA;②引物(primer),是人工合成的一對寡核苷酸鏈(約15-20個核苷酸),用于擴增夾在雙引物與模板DNA互補區之間的區域;③4種dNTP;④Tag DNA聚合酶,是從一種嗜熱水生菌(Thermus aquaticus)中分離出來的。此酶最適作用溫度為75~80℃,但短時間在95℃下不失活。⑤適宜的緩沖體系和適量的Mg2+。反應過程:①變性:將反應液置于PCR儀中,提高溫度(約90-95℃)使DNA雙鏈解離;②復性:降溫(約60℃左右)退火,使引物與模板結合;③延伸:升溫度至70-75℃,在引物的引導下合成模板單鏈的互補鏈,從而形成DNA雙鏈片段;④重復上述“變性——復性——延伸”的過程。最初幾次循環中形成的長鏈DNA較多,但隨著反應的進行,長鏈DNA以算術級數增加,而夾在兩個引......閱讀全文

    聚合酶鏈式反應(PCR)的反應原理

    PCR是利用DNA在體外攝氏95°高溫時變性會變成單鏈,低溫(經常是60°C左右)時引物與單鏈按堿基互補配對的原則結合,再調溫度至DNA聚合酶最適反應溫度(72°C左右),DNA聚合酶沿著磷酸到五碳糖(5'-3')的方向合成互補鏈。基于聚合酶制造的PCR儀實際就是一個溫控設備,能在變

    PCR(聚合酶鏈式反應)的反應原理

      【原理】  PCR(polymerase chain reaction)用于在體外將微量的目標DNA大量擴增,以便進行分析。反應體系:①樣品DNA;②引物(primer),是人工合成的一對寡核苷酸鏈(約15-20個核苷酸),用于擴增夾在雙引物與模板DNA互補區之間的區域;③4種dNTP;④Tag

    聚合酶鏈式反應(PCR)的原理

    PCR技術的基本原理類似于DNA的天然復制過程,其特異性依賴于與靶序列兩端互補的寡核苷酸引物。PCR由變性-退火-延伸三個基本反應步驟構成:①模板DNA的變性:模板DNA經加熱至93℃左右一定時間后,使模板DNA雙鏈或經PCR擴增形成的雙鏈DNA解離,使之成為單鏈,以便它與引物結合,為下輪反應作準備

    聚合酶鏈式反應PCR原理是什么?

    PCR(聚合酶鏈式反應)技術的基本原理類似于DNA的天然復制過程,其特異性依賴于與靶序列兩端互補的寡核苷酸引物。PCR由變性→退火→延伸三個基本反應步驟構成:①模板DNA的變性:模板DNA經加熱至93℃左右一定時間后,使模板DNA雙鏈或經PCR擴增形成的雙鏈DNA解離,使之成為單鏈,以便它與引物結合

    聚合酶鏈式反應(PCR)反應的控制

    反應的控制PCR反應的緩沖液 提供合適的酸堿度與某些離子鎂離子濃度 總量應比dNTPs的濃度高,常用1.5mmol/L底物濃度 dNTP以等摩爾濃度配制,20~200umol/LTaqDNA聚合酶 2.5U(100ul)引物 濃度一般為0.1 ~ 0.5umol/L反應溫度和循環次數變性溫度和時間

    聚合酶鏈式反應(PCR)的原理和具體過程

    原理就是DNA半保留復制吧過程只要記住1.DNA變性(90℃-96℃):雙鏈DNA模板在熱作用下, 氫鍵斷裂,形成單鏈DNA2.退火(25℃-65℃):系統溫度降低,引物與DNA模板結合,形成局部雙鏈。3.延伸(70℃-75℃):在Taq酶(在72℃左右,活性最佳)的作用下,以dNTP為原料,從引物

    聚合酶鏈式反應(PCR)反應特點

    特異性強PCR反應的特異性決定因素為:①引物與模板DNA特異正確的結合;②堿基配對原則;③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性;④靶基因的特異性與保守性。其中引物與模板的正確結合是關鍵。引物與模板的結合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及TaqDNA聚合酶耐高溫性,使反應中模

    聚合酶鏈式反應(PCR)

    聚合酶鏈式反應(Polymerase Chain Reaction,PCR)是體外酶促合成特異DNA片段的一種方法,為最常用的分子生物學技術之一。典型的PCR由(1)高溫變性模板;(2)引物與模板退火;(3)引物沿模板延伸三步反應組成一個循環,通過多次循環反應,使目的DNA得以迅速擴增。其主要步驟是

    聚合酶鏈式反應(PCR)

    聚合酶鏈式反應(Polymerase Chain Reaction,PCR)是體外酶促合成特異DNA片段的一種方法,為最常用的分子生物學技術之一。典型的PCR由(1)高溫變性模板;(2)引物與模板退火;(3)引物沿模板延伸三步反應組成一個循環,通過多次循環反應,使目的DNA得以迅速擴增。其主要步驟是

    PCR)聚合酶鏈式反應

    ?PCR技術可用于:(1)檢驗感染性疾病是否處于隱性或亞臨床狀態;(2)有效檢測癌基因的突變,準確檢測癌基因的表達量;(3)臨床應用于檢測地中海貧血的基因突變。  實驗方法原理 PCR技術的基本原理類似于DNA的天然復制過程,其特異性依賴于與靶序列兩端互補的寡核苷酸引物。  PCR由變性--退火--

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