1、壓力 液相色譜柱(尤其是分析性高效液相色譜):壓力較高,一般為10-20Mpa 層析柱:一般為常壓,或使用真空泵(0.1Mpa左右) 2、填料 液相色譜柱:粒徑較小(常規5-20um) 層析柱:粒徑較大 3、分離度 由第二項決定,粒徑越小,單位長度下理論塔板數越高 液相色譜柱:分離度比層析柱好 4、效率 液相色譜柱:分離速度快,一般在一小時內 層析柱:分離時間長,一小時以上......閱讀全文
層析柱是凝膠層析技術中的主體,一般用玻璃管或有機玻璃管。根據樣品混合物中各組分在固定相和流動相中分配系數不同,從而分離的一種層析法。
層析柱是凝膠層析技術中的主體,一般用玻璃管或有機玻璃管。根據樣品混合物中各組分在固定相和流動相中分配系數不同,從而分離的一種層析法。
層析柱的直徑大小不影響分離度,樣品用量大,可加大柱的直徑,一般制備用凝膠柱,直徑大于2厘米,但在加樣時應將樣品均勻分布于凝膠柱床面上。此外, 直徑加大,洗脫液體體積增大,樣品稀釋度大。分離度取決于柱高,為分離不同組分,凝膠柱床必須有適宜的高度,分離度與柱高的平方根相關,但由于軟凝膠柱過高擠壓變形
層析柱是凝膠層析技術中的主體,一般用玻璃管或有機玻璃管。根據樣品混合物中各組分在固定相和流動相中分配系數不同,從而分離的一種層析法。
層析柱的質量關鍵要考慮以下幾點: 兩端的4F塞是否密封質量好,中間的玻璃管的透明度以及耐壓度, 是否有相應的轉換接頭來控制進料高度,
以中壓柱層析法提取分離冬凌草甲素為例: 1.吸附劑的處理及柱子裝填 將一定量薄層層析硅膠裝入搪瓷盤置于烘箱中,于105。C活化2H后,取出放置室溫即可裝柱。柱子采用干法填充,填滿整個柱體,不留死體積,密封后用柱塞式計量溶劑泵按丙酮一石油醚(5:95)比例泵入溶劑,至溶劑流出止。 2.上樣
1、壓力 液相色譜柱(尤其是分析性高效液相色譜):壓力較高,一般為10-20Mpa 層析柱:一般為常壓,或使用真空泵(0.1Mpa左右) 2、填料 液相色譜柱:粒徑較小(常規5-20um) 層析柱:粒徑較大 3、分離度 由第二項決定,粒徑越小,單位長度下理論塔板數越高 液相色譜柱
規格 層析柱的直徑大小不影響分離度,樣品用量大,可加大柱的直徑,一般制備用凝膠柱,直徑大于2厘米,但在加樣時應將樣品均勻分布于凝膠柱床面上。此外, 直徑加大,洗脫液體體積增大,樣品稀釋度大。分離度取決于柱高,為分離不同組分,凝膠柱床必須有適宜的高度,分離度與柱高的平方根相關,但由于軟凝膠柱過高
實驗材料 用于質譜分析的蛋白質或多肽樣品 試劑、試劑盒 乙腈(HPLC級)甲醇基質溶液三氟乙酸 儀器、耗材 平頭鑷子GELoader 移液吸頭MALDI-MS板移液吸頭Poros R1、Poros R2 或 Oligo R3 層析樹脂注射器 實驗步驟
介質: Q-HP,體積為2L, 緩沖液1為0.4M/L NaCl, 緩沖液2為0.8M/L NaCl 柱子:SAC200*500(利穗) 設備為 AKTA Polit(GE)