基因擴增就是基因拷貝數增加或表達活性增強。 gene amplification 為一特異蛋白質編碼的基因的拷貝數選擇性地增加而其他基因并未按比例增加的過程。在自然條件下,基因擴增是通過從染色體切除基因的重復序列再在質粒中進行染色體外復制或通過將核糖體RNA的全部重復序列生成RNA轉錄物再轉錄生成原來DNA分子的額外拷貝而實現的。在實驗室已建立了不等交換、從裂解細胞提取DNA或經過滾環復制生成染色體外序列進行人工基因擴增。例如在爪蟾卵子發生時,編碼rRNA的基因數增加約4000倍。......閱讀全文
基因擴增就是基因拷貝數增加或表達活性增強。 gene amplification 為一特異蛋白質編碼的基因的拷貝數選擇性地增加而其他基因并未按比例增加的過程。在自然條件下,基因擴增是通過從染色體切除基因的重復序列再在質粒中進行染色體外復制或通過將核糖體RNA的全部重復序列生成RNA轉錄物再轉錄
細胞內選擇性復制DNA,產生大量的拷貝。如 兩棲類 卵母細胞在發育的早期,rRNA基因的數量擴增到1000多倍。基因擴增是通過形成幾千個核進行的,每個核里含有幾百拷貝的編碼28S、18S和5.8S的rRNA基因,最后卵母細胞中的這些rRNA基因的拷貝數幾乎達到50萬個,而在相同 生物的其它類型
1.PCR熱循環儀 2. 移液器(0.1-2.5μL)3.PCR板 實驗 試劑 1.10×緩沖液:500mmol/LKCI、100mmol/LTriS·HCI(pH8.3,室溫)、15mmol/LMgCl2 2.dNTPMix:2.5mmol/LdATP、2.5mmol/LdCTP、2.5
①引物的序列應位于基因組DNA的高度保守區,且與非擴增區無同源序列。這樣可以減少引物與基因組的非特異性結合,提高反應的特異性 ②引物長度:15-40bp為宜。引物過短或過長均可使反應的特異性下降。 ③引物的堿基盡可能隨機發布,避免出現數個嘌呤或嘧啶的連續排列,G+C堿基的含量在40%-75%
PCR基因擴增儀的類型:PCR基因擴增儀的設計均按照DNA變性、復性和延伸三個環節以及溫度均恒、傳導快和升降溫迅速等原則,結合傳感技術、微電子技術和電子計算機等技術發展而成的自動化和智能化的儀器設備,下面僅從保溫和變溫的角度介紹幾類PCR儀的原理。1. 水浴式PCR基因擴增儀 水浴式PCR基因擴增儀
PCR基因擴增儀的類型:PCR基因擴增儀的設計均按照DNA變性、復性和延伸三個環節以及溫度均恒、傳導快和升降溫迅速等原則,結合傳感技術、微電子技術和電子計算機等技術發展而成的自動化和智能化的儀器設備,下面僅從保溫和變溫的角度介紹幾類PCR儀的原理。1.?水浴式PCR基因擴增儀 水浴式PCR基因擴增儀
? PCR基因擴增儀的類型: PCR基因擴增儀的設計均按照DNA變性、復性和延伸三個環節以及溫度均恒、傳導快和升降溫迅速等原則,結合傳感技術、微電子技術和電子計算機等技術發展而成的自動化和智能化的儀器設備,下面僅從保溫和變溫的角度介紹幾類PCR儀的原理。 1.?水浴式PCR
PCR儀(基因擴增儀)的類型:PCR儀(基因擴增儀)的設計均按照DNA變性、復性和延伸三個環節以及溫度均恒、傳導快和升降溫迅速等原則,結合傳感技術、微電子技術和電子計算機等技術發展而成的自動化和智能化的儀器設備,下面僅從保溫和變溫的角度介紹幾類PCR儀的原理。1. 水浴式PCR儀(基因擴增儀) 水浴
以聚合酶鏈式反應(PCR)為基礎的 離體 基因擴增技術對 基因工程的研究和應用產生了革命性影響。提供自動化的PCR專用儀器則是推廣 PCR技術的關鍵。為解決國產PCR裝置的更新換代并替代大量進口,中科院 發育生物學所最近完成了以智能化 儀表控制系統為核心的干式基因擴增PCR裝置,經多種對照引物和
基因載體本身是DNA,除根據其來源分為質粒載體、噬菌體載體、病毒載體等外,還可以根據它們的主要用途分為克隆載體與表達載體。根據它們的性質分為溫度敏感型載體(temperature sensitive vector)、融合型表達載體、非融合型表達載等。 基因載體(vector) 的作用是運載目的