基因擴增的概念
基因擴增是指某一個特定基因的拷貝數選擇性地增加而其它基因的拷貝數并未按比例增加的過程。......閱讀全文
基因擴增的概念
基因擴增是指某一個特定基因的拷貝數選擇性地增加而其它基因的拷貝數并未按比例增加的過程。
基因擴增的概念
基因擴增是指某一個特定基因的拷貝數選擇性地增加而其它基因的拷貝數并未按比例增加的過程。
天然基因擴增的概念
天然基因擴增,也稱為染色體復制,或基因復制,是生物分子進化過程中產生新遺傳物質的主要機制。它指的是任何含有基因的DNA片段的復制。
基因擴增的概念和原因
基因擴增(gene amplification)是指某一個特定基因的拷貝數選擇性地增加而其它基因的拷貝數并未按比例增加的過程?[1]??。基因擴增產生的可能原因:1)由錯誤的DNA復制和修復導致的基因復制;2)自私遺傳元件偶然捕獲而導致的DNA重復;3)人工聚合酶鏈式反應(PCR)擴增。
擴增物的概念
中文名稱擴增物英文名稱amplimer定 義通常僅指聚合酶鏈反應所產生的DNA片段。用復數(amplimers)時,系指PCR反應所用的那對引物。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),方法與技術(二級學科)
PCR基因擴增
實驗概要PCR擴增目標DNA片段。實驗原理多聚酶鏈式反應(polymerase chain reaction, PCR)基本原理類似于DNA的天然復制過程,其特異性依賴于與靶序列兩端互補的寡核苷酸引物。PCR由變性、退火、延伸三個基本反應步驟構成。? 1. 模板DNA的變性:模板DNA經加熱至93℃
擴增子的概念和用途
擴增子(amplicon)為DNA或RNA擴增后的一段核苷酸序列。比如通過PCR擴增得到的某個基因的擴增片段。更簡單地說,擴增子是經過人工擴增的DNA片段或RNA片段的擴增產物。
什么是基因擴增?基因擴增的應用和技術優勢
又稱無細胞分子克隆系統或特異性DNA序列體外引物定向酶促擴增法,是基因擴增技術的一次重大革新。可將極微量的靶DNA特異地擴增上百萬倍,從而大大提高對DNA分子的分析和檢測能力,能檢測單分子DNA或對每10萬個細胞中僅含1個靶DNA分子的樣品,因而此方法立即在分子生物學、微生物學、醫學及遺傳學等多領域
基因擴增PCR的擴增與克隆方法介紹
①引物的序列應位于基因組DNA的高度保守區,且與非擴增區無同源序列。這樣可以減少引物與基因組的非特異性結合,提高反應的特異性 ②引物長度:15-40bp為宜。引物過短或過長均可使反應的特異性下降。 ③引物的堿基盡可能隨機發布,避免出現數個嘌呤或嘧啶的連續排列,G+C堿基的含量在40%-75%
基因擴增技術的原理
PCR擴增DNA的原理是:先將含有所需擴增分析序列的靶DNA雙鏈經熱變性處理解開為兩個寡聚核苷酸單鏈,然后加入一對根據已知DNA序列由人工合成的與所擴增的DNA兩端鄰近序列互補的寡聚核苷酸片段作為引物,即左右引物。此引物范圍就在包括所欲擴增的DNA片段,一般需20-30個堿基對,過少則難保持與DNA
基因擴增儀的用途
用于科研及臨床的基因擴增 定性PCR基因擴增 熒光/酶免終點定量DNA基因擴增 基因芯片等其他基因分析應用的基因擴增 適合國內外各種PCR試劑盒傳染病類(各型肝炎病毒、結核桿菌、STD性傳播疾病、優生優育、支原體、衣原體、寄生蟲等)、腫瘤類(P53、幽門螺桿菌等)、科研類(遺傳鑒定、細菌
基因擴增技術的優點
特異性高首次報導的PCR所用的DNA聚合酶是大腸桿菌的DNAPolymerase I的Klenow大片段,其酶活性在90℃會變性失活,需每次PCR循環都要重新加入Klenow大片段,同時引物是在37℃延伸(聚合)易產生模板—引物之間的堿基錯配、致特異性較差,1988年Saiki等從溫泉水中分離到的水
基因擴增的相關介紹
基因擴增就是基因拷貝數增加或表達活性增強。 gene amplification 為一特異蛋白質編碼的基因的拷貝數選擇性地增加而其他基因并未按比例增加的過程。在自然條件下,基因擴增是通過從染色體切除基因的重復序列再在質粒中進行染色體外復制或通過將核糖體RNA的全部重復序列生成RNA轉錄物再轉錄
基因擴增技術的定義
又稱無細胞分子克隆系統或特異性DNA序列體外引物定向酶促擴增法,是基因擴增技術的一次重大革新。可將極微量的靶DNA特異地擴增上百萬倍,從而大大提高對DNA分子的分析和檢測能力,能檢測單分子DNA或對每10萬個細胞中僅含1個靶DNA分子的樣品,因而此方法立即在分子生物學、微生物學、醫學及遺傳學等多領域
目的基因的PCR擴增
實驗概要進行目的基因的PCR擴增實驗原理PCR(聚合酶鏈式反應)是一種選擇性體外擴增DNA或RNA的方法。它包括3個基本步驟:⑴變性:目的雙鏈DNA片段在94℃下解鏈;⑵退火:兩種寡核苷酸引物在適當溫度(50℃左右)下與模板上的目的序列通過氫鍵配對;⑶延伸:在Taq ? DNA聚合酶合成DNA的最適
基因擴增PCR的擴增結果假陽性的原因
出現的PCR擴增條帶與目的靶序列條帶一致,有時其條帶更整齊,亮度更高。?引物設計不合適:選擇的擴增序列與非目的擴增序列有同源性,因而在進行PCR擴增時,擴增出的PCR產物為非目的性的序列。靶序列太短或引物太短,容易出現假陽性。需重新設計引物。?靶序列或擴增產物的交叉污染:這種污染有兩種原因:一是整個
PCR基因擴增2
(4)引物的熔點溫度(Tm值)要適當。Tm值與引物的堿基組成和長度有關;PCR引物的GC/AT應與要擴增的模板DNA相當或略高些。一般熔點溫度以大于55℃為宜。(5)引物的3,末端必須與模板嚴格互補,而5,末端的要求可靈活些。(6)目前在引物選擇中已廣泛應用計算機軟件,從EMBL或Genebank中
梯度基因擴增儀
梯度PCR儀是由普通PCR儀衍生出的帶梯度PCR功能的基因擴增儀。PCR反應能否成功,退火溫度是關鍵,梯度PCR儀每個孔的溫度可以在指定范圍內按照梯度設置。
基因擴增儀用途
基因擴增儀主要用于用于科研及臨床的基因擴增、定性PCR基因擴增、熒光/酶免終點定量DNA基因擴增、基因芯片等其他基因分析應用的基因擴增等。用于科研及臨床的基因擴增 定性PCR基因擴增 熒光/酶免終點定量DNA基因擴增 基因芯片等其他基因分析應用的基因擴增 適合國內外各種PCR試劑盒傳染病
PCR基因擴增實驗
[實驗目的]通過本實驗學習PCR反應的基本原理與實驗技術。[實驗原理]多聚酶鏈式反應(polymerase chain reaction,PCR)的原理類似于DNA的天然復制過程。在待擴增的DNA片段兩側和與其兩側互補的兩個寡核苷酸引物,經變性、退火和延伸若干個循環后,DNA擴增2n倍。1.變性:加
癌基因擴增概述
原癌基因還可因某種原因自身擴增而過度表達。在腫瘤細胞尤其是胚胎神經組織腫瘤細胞中有時見到的雙微體和染色體上的均染區就是原癌基因DNA片段擴增的表現例如,在腫瘤細胞中c-myc癌基因可擴增數百到數千倍。
PCR基因擴增1
一、實驗原理 聚合酶鏈式反應(Polymerase Chain Reaction,PCR)是一種體外核酸擴增系統,其原理類似DNA分子的天然復制過程,是將在待擴增的DNA片段和與其兩側互補的兩個寡聚核苷酸引物,經變性、退火和延伸若干個循環后,DNA擴增 2n 倍。該技術已成為分子生物學中
PCR基因擴增原理
基因擴增技術(PCR)聚合酶鏈反應(polymerase chain reaction簡稱PCR)又稱無細胞分子克隆系統或特異性DNA序列體外引物定向酶促擴增法,是基因擴增技術的一次重大革新。可將極微量的靶DNA特異地擴增上百萬倍,從而大大提高對DNA分子的分析和檢測能力,能檢測單分子DNA或對每1
基因擴增的含義和擴增方式有哪些
基因芯片(genechip)(又稱DNA芯片、生物芯片)的原型是80年代中期提出的。基因芯片的測序原理是雜交測序方法,即通過與一組已知序列的核酸探針雜交進行核酸序列測定的方法,在一塊基片表面固定了序列已知的靶核苷酸的探針。當溶液中帶有熒光標記的核酸序列TATGCAATCTAG,與基因芯片上對應位置的
PCR擴增模板和抗體可變區基因的擴增
PCR?擴增模板和抗體可變區基因的擴增???? 如果構建Fab抗體庫,必需利用RT-PCR獲取抗體基因;構建ScFv抗體庫,既可以DNA作模板,也可以cDNA作模板。本室在構建小鼠ScFv抗體庫過程中,主要采用DNA作為擴增模板。?【材料和試劑】(1)PCR儀(2)Taq酶(3)氯仿(4)瓊脂糖?【
基因擴增的含義和擴增方式有哪些
基因芯片(genechip)(又稱DNA芯片、生物芯片)的原型是80年代中期提出的。基因芯片的測序原理是雜交測序方法,即通過與一組已知序列的核酸探針雜交進行核酸序列測定的方法,在一塊基片表面固定了序列已知的靶核苷酸的探針。當溶液中帶有熒光標記的核酸序列TATGCAATCTAG,與基因芯片上對應位置的
基因擴增PCR的擴增方法的注意事項
?1、使用本制品時務必將Buffer反復混勻后再加,避免因組分不一導致結果差異;?2、配置和分裝反應液時請一定使用新的(無污染的)噴頭以避免污染;?3、如擴增條帶多,可適當添加酶和dNTPs;?4、當多重PCR擴增產物的長度均在1kb以內時,使用3%~4%濃度的Agarosegel進行電泳分離效果。
基因的概念
?? 基因(gene)的概念隨著遺傳學、分子生物學、生物化學等領域的發展而不斷完善。從遺傳學的角度看,基因是生物的遺傳物質,是遺傳的基本單位——突變單位、重組單位和功能單位;從分子生物學的角度看,基因是負載特定遺傳信息的DNA分子片段,在一定條件下能夠表達這種遺傳信息,變成特定的生理功能。有的生物基
基因的概念
基因(遺傳因子)是產生一條多肽鏈或功能RNA所需的全部核苷酸序列。基因支持著生命的基本構造和性能。儲存著生命的種族、血型、孕育、生長、凋亡等過程的全部信息。環境和遺傳的互相依賴,演繹著生命的繁衍、細胞分裂和蛋白質合成等重要生理過程。生物體的生、長、衰、病、老、死等一切生命現象都與基因有關。它也是決定
基因擴增儀的技術原理
技術原理:標記有熒光素的Taqman探針與模板DNA混合后,完成高溫變性,低溫復性,適溫延伸的熱循環,并遵守聚合酶鏈反應規律,與模板DNA互補配對的Taqman探針被切斷,熒光素游離于反應體系中,在特定光激發下發出熒光,隨著循環次數的增加,被擴增的目的基因片段呈指數規律增長,通過實時檢測與之對應的隨