哺乳動物體外培養細胞的基因正向突變試驗常用的測試系統有小鼠淋巴瘤L5178Y細胞,中國倉鼠肺V79細胞和卵巢CHO細胞的三個基因位點的突變,即次黃嘌呤磷酸核糖轉移酶(HGPRT)、胸苷激酶(TK)及Na+/K+ATP酶(OUA)位點。HGRPT和Na+/K+ATP酶位點突變可用于上述三種細胞,OUA位點突變僅適用于CHO細胞,HGRPT和TK可分別使6-硫代鳥嘌呤(6-TG)轉移上磷酸核糖及使5-溴脫氧尿苷磷酰化,它們的代謝產物可摻入DNA引起細胞死亡,因此正常細胞在含有這些鹼基類似物的培養基中不能生長,在致突變物作用下此兩個位點發生突變的細胞對這些鹼基類似物具有抗藥性,可以增殖成為克隆(細胞集落)。Na+/K+ATP酶是細胞膜上的Na+/K泵,鳥本苷可抑制此酶活性引起細胞死亡,當致突變物引起該位點突變后,Na+/K+ATP酶對鳥本苷的親和力下降,而酶活性不變,故對培養基中的鳥本苷產生抗藥性,并可增殖為克隆。......閱讀全文
哺乳動物體外培養細胞的基因正向突變試驗常用的測試系統有小鼠淋巴瘤L5178Y細胞,中國倉鼠肺V79細胞和卵巢CHO細胞的三個基因位點的突變,即次黃嘌呤磷酸核糖轉移酶(HGPRT)、胸苷激酶(TK)及Na+/K+ATP酶(OUA)位點。HGRPT和Na+/K+ATP酶位點突變可用于上述三種細胞,O
在加入或不加入代謝活化系統的條件下,使培養的哺乳動物細胞暴露于受試樣品中。用中期分裂象阻斷劑(如秋水仙素)處理,使細胞停止在中期分裂象,隨后收獲細胞、制片、染色、分析染色體畸變。通過檢測受試樣品誘發體外培養的哺乳動物細胞染色體畸變的能力,從而評價受試樣品的致突變性及其強度。?一、材料⒈受試樣品固體受
- 中華倉鼠肺細胞染色體突變實驗藥物毒理體外經典實驗。國家都有標準了就可以想象重要性了。自己做了一個PDF文件,方便大家收藏。中華人民共和國國家標準GB 15193.12一91體外哺乳類細胞(V79/HGPRT)基因突變試驗V79/HGPRT gene mutation test----------
? ? ? ? ? ? 試劑、試劑盒 尤鈣鎂離子磷酸緩沖鹽溶液 EDTA SDS 乙酸鈉 水平衡的苯酚 ?乙醇 Tris-Cl
實驗概要 本實驗介紹了從培養的單層哺乳動物細胞中分離RNA的實驗程序,該程序同樣適用于從懸浮培養的哺乳動物細胞中或從易于分散成單個細胞的哺乳動物組織中分離RNA。但不適用于從固體組織中提取RNA,因為用這種裂解細胞的方法(在SDS存在的條件下用蛋白酶K消化)去消化組織速度很慢,導致內源性RNA酶
試劑、試劑盒 尤鈣鎂離子磷酸緩沖鹽溶液 EDTASDS 乙酸鈉水平衡的苯酚 乙醇 Tris-Cl NaCL 實驗步驟 一 材料與設備 1)尤鈣鎂離子磷酸緩沖鹽溶液 (PBS) ? ?? 2)10 mmol/L ?EDTA (pH8.0 ) ? ?? 3)0.5% SDS ?
哺乳動物細胞總RNA的分離細胞的裂解提取步驟注意事項 這一從培養的單層哺乳動物細胞中分離RNA的實驗程序系為Favaloro 等(1980)所介紹程序的改良。該程序同樣適用于從懸浮培養的哺乳動物細胞中或從易于分散成單個細胞的哺乳動物組織中分離RNA。但不適用于從固體組織中提取RNA,因為用這種裂解
1.培養兩棲動物細胞與哺乳動物細胞區別在培養液上,也就是血漿的不同,其它的一樣;2.培養兩棲動物體細胞比哺乳動物細胞難養,原因在于兩棲動物個體都較小,血漿制備較難;3.原代培養的話,兩棲動物細胞用兩棲動物的血漿,哺乳動物細胞用哺乳動物的血漿,(同物種個體上取下的血漿,最好自體上取下的)和其它營養物質
體外哺乳動物細胞基因突變試驗是利用培養的哺乳動物細胞作指示生物的體外遺傳毒理學試驗,可用于檢測有化學物質誘導的基因突變,適用的細胞系包括小鼠淋巴瘤細胞(L5178Y),中國倉鼠肺細胞(V79),中國倉鼠卵巢細胞(CHO),人類淋巴母細胞(TK6)等。這些細胞系,常用的遺傳學終點是檢測胸苷激酶(TK)
《科學》雜志28日報道,波士頓大學合成生物學家威爾森·黃帶領的團隊提出一種方法,用基因工程方法編輯哺乳動物細胞DNA,從而進行復雜的計算,使這類細胞變成生物計算機。他們希望新的編程技術有助于癌癥治療、按需生長可以替換受損身體部位的組織等。 科學家嘗試將細胞編輯工程從細菌擴展到哺乳動物細胞