程序外DNA合成試驗
基本方法是測定S期以外3H-胸苷摻入胞核的量，這一摻入量可反映DNA損傷后修復合成的量。由于此種合成發生在DNA正常復制合成主要時期以外，故稱為程序外DNA合成(unschedule DNA synthesis UDS)試驗或DNA修復合成試驗。一般使用人淋巴細胞或嚙齒動物肝細胞等不處于正在增殖的細胞較為方便，否則就需要人為地將細胞阻斷于G1期，使增殖同步化。然后在藥物的抑制下使殘存的半保留DNA復制降低到最低限度，才能避免摻入水平很高的半保留復制對摻入水平很低的程序外DNA合成的觀察。......閱讀全文
打破合成生物學瓶頸的新程序
最近，研究人員創建了一種計算機程序，將向全世界打開合成生物學的一個挑戰性領域。 在過去的十年中，研究人員為了開發一種技術，快速、廉價地讀寫DNA，以合成和操縱多肽和蛋白質，已經花費了數十億美元的成本。 但是，當這種技術遇到重復的基因譜時會出錯。這包括許多天然和合成的材料，適用范圍很廣，從從生
溫度沖擊試驗箱的試驗程序
溫度沖擊試驗箱的試驗程序??????? 一、預處理??????? 將試驗樣品放置在正常的試驗大氣條件下，直至達到溫度穩定。??????? 二、初始檢測??????? 按GJB 150.1-89中3.5.2款的要求進行。??????? 三、試驗??????? 1.試驗樣品應按GJB 150.1-86中
外媒：DNA檢測技術頻頻制造冤案
在不少人眼中,脫氧核糖核酸（ＤＮＡ）檢測技術簡直就是破案終極神器。案件每到山窮水盡之際,一根毛發、一滴血、一點體液……但凡可能帶上案犯一丁點生物信息,這些看似不起眼的證據都能化腐朽為神奇,撥開茫茫人群、直指兇手。 但問題是：ＤＮＡ檢測技術到底能有多靠譜？它難道不會犯錯嗎？ 【“鐵證”下的
外源質粒DNA轉化大腸桿菌
摘要： 轉化是將外源DNA分子通過物理或化學的方法導入基因工程細菌中的過程,是基因工程等研究領域的基本實驗技術之一. 外源質粒 DNA 轉化 大腸桿菌 1 實驗簡介 轉化是將外源DNA分子通過物理或化學的方法導入基因工程
DNA重組（DNA－recombination）技術：外源基因的蛋白表達4
（3）CHO細胞穩定表達系統：動物細胞瞬時表達系統中外源基因沒有穩定地整合到宿主細胞染色體中，一染色體外DNA的形式存在。因而只能瞬時表達。要使外源基因在宿主細胞中高效、穩定地表達，必須建立一個穩定表達系統，包括適宜的表達載體、有效的基因轉染、標記基因和目標基因的選擇與共擴增、受體適當的受體細胞和培
DNA重組（DNA－recombination）技術：外源基因的蛋白表達3
（6）遺傳標記： 從成千上萬個哺乳細胞中，檢測出極少數的含DNA重組體的轉染細胞，并鑒定已導入外源DNA是哺乳動物細胞基因表達系統的一個關鍵內容。因此，在真核生物表達載體上必須附有標記基因，才能進行篩選。常用的標記基因有：胸苷激酶基因（thymidine kinase，TK）、二氫葉酸還原酶
DNA重組（DNA－recombination）技術：外源基因的蛋白表達1
通過外源DNA的重組、克隆、以及鑒定，可以獲得所需的特異DNA克隆。外源克隆基因在某種表達載體及適宜的宿主細胞中可表達為相應的蛋白質，這就組成了外源基因的蛋白表達系統。表達后的蛋白質必須具有原來的生物學活性，這是基于正確的基因轉錄、轉錄后加工、mRNA翻譯及翻譯后修飾，同時與表達載體的結構和表達體系
DNA重組（DNA－recombination）技術：外源基因的蛋白表達2
2.包涵體的分離與純化細胞破碎時提取細胞內產物的關鍵。對于細菌的裂解常用的有酶溶法、超聲破碎法、化學滲透法、玻璃珠研磨等。包涵體可通過超聲波、勻漿等常規的方法是菌體破碎后，離心就可得到。密度梯度離心后可得到高純度的包涵體。包涵體一般不溶于水，為了獲得可溶性的蛋白質可加入強蛋白質變性劑后使其溶解。一般
DNA合成儀的日常維護
DNA合成儀 -日常維護 1．瓶塞“O”形環 一月檢查一次“O”形環，zui少1年更換1次。將新的備用“O”形環與儀器上的相比較，如果在“O”形環上出現白色沉淀，用棉花蘸取乙腈，進行清洗。更換“O”形環的步驟如下：用止血鉗夾住“O”形環，從槽中取下(或用牙簽鉤下)，注意不要損壞托住“O”形
DNA合成儀的日常維護
1．瓶塞“O”形環 一月檢查一次“O”形環，最少1年更換1次。將新的備用“O”形環與儀器上的相比較，如果在“O”形環上出現白色沉淀，用棉花蘸取乙腈，進行清洗。更換“O”形環的步驟如下：用止血鉗夾住“O”形環，從槽中取下(或用牙簽鉤下)，注意不要損壞托住“O”形環的白色聚氟乙烯插塞(teflon
DNA合成儀結構和性能
(一)壓力管路及輸送管路每個瓶子都有一個氬氣壓力管道及輸送管道進入瓶蓋插塞，對于亞磷酰胺，1—8號瓶其壓力管道也作為排氣管。氬氣管要保持在液體水平以上，而輸送管卻伸到瓶的底部。當閥門正確設置打開時，儲液瓶上部空間由氬氣加壓，液體被推進輸送管，流到其目的地。(二)壓力系統 系統壓力由超純氬(99．
DNA化學合成的應用
??? 隨著DNA合成技術的發展，特別是自動化合成技術的引入，人們能簡便、快速、高效地合成其感興趣的DN**段。目前，DNA合成技術已成為分子生物學研究必不可少的手段，并且已在基因工程、臨床診斷和治療、法醫學等各個領域中日益發揮重要的作用。?1. DNA合成在基因工程和分子生物學研究中的應用1.1合
DNA化學合成的應用
?隨著DNA合成技術的發展，特別是自動化合成技術的引入，人們能簡便、快速、高效地合成其感興趣的DNA片段。目前，DNA合成技術已成為分子生物學研究必不可少的手段，并且已在基因工程、臨床診斷和治療、法醫學等各個領域中日益發揮重要的作用。1. DNA合成在基因工程和分子生物學研究中的應用1.1合成基因
互補DNA的合成方法
（1）取第一鏈反應液20uL，再依次加入：10X第二鏈緩沖液20uLDNA聚合酶123ul。RNaseH0.8ulH2O加至終體積為100/uL（2）輕輕混勻，如需進行第二鏈同位素摻入放射性活性測定，可取出10uL至另一eppendorf管，加入2～5uLCi[α一32P]dCTP。（3）14℃溫浴
DNA合成儀的操作步驟
以亞磷酰胺寡核苷酸合成為例介紹該類儀器的一般操作步驟。亞磷酰胺DNA合成的試劑有：保護堿基的5/—DMT，A、G、C、T亞磷酰胺單體，四唑偶聯催化劑，乙酐，N—甲基咪唑封閉試劑，三氯乙酸(TCA)脫保護溶液，12氧化混合物，乙腈清洗溶劑，氨水切除溶液。使用步驟如下： 1)仔細檢查合成儀上所有試
DNA化學合成的應用
隨著DNA合成技術的發展，特別是自動化合成技術的引入，人們能簡便、快速、高效地合成其感興趣的DNA片段。目前，DNA合成技術已成為分子生物學研究必不可少的手段，并且已在基因工程、臨床診斷和治療、法醫學等各個領域中日益發揮重要的作用。 1. DNA合成在基因工程和分子生物學研究中的應用1.1合成基因目
DNA合成儀操作方法
以亞磷酰胺寡核苷酸合成為例介紹該類儀器的一般操作步驟。亞磷酰胺DNA合成的試劑有：保護堿基的5/—DMT，A、G、C、T亞磷酰胺單體，四唑偶聯催化劑，乙酐，N—甲基咪唑封閉試劑，三氯乙酸(TCA)脫保護溶液，12氧化混合物，乙腈清洗溶劑，氨水切除溶液。使用步驟如下：1)仔細檢查合成儀上所有試劑瓶中的
DNA合成儀結構和性能
試劑驅動系統一般地，DNA 合成儀采用一定壓力的惰性氣體（氬氣）或氮氣及電磁閥組驅動液體試劑，也可采用氦氣驅動試劑。某些合成儀采用slider block滑塊系統及精密蠕動泵，可不采用氣體為驅動系統。采用氣體及電磁閥驅動液體試劑時，需首先將管路系統電磁閥前段，含試劑瓶組中壓力加壓到規定氣壓，通過合成
DNA化學合成的應用
隨著DNA合成技術的發展，特別是自動化合成技術的引入，人們能簡便、快速、高效地合成其感興趣的DNA片段。目前，DNA合成技術已成為分子生物學研究必不可少的手段，并且已在基因工程、臨床診斷和治療、法醫學等各個領域中日益發揮重要的作用。 1. DNA合成在基因工程和分子生物學研究中的應用
DNA化學合成的應用
隨著DNA合成技術的發展，特別是自動化合成技術的引入，人們能簡便、快速、高效地合成其感興趣的DNA片段。目前，DNA合成技術已成為分子生物學研究必不可少的手段，并且已在基因工程、臨床診斷和治療、法醫學等各個領域中日益發揮重要的作用。 1. DNA合成在基因工程和分子生物學研究中的應用
細胞中的DNA合成途徑
細胞中的DNA合成有兩條途徑：一條途徑是生物合成途徑（“D途徑”），即由氨基酸及其他小分子化合物合成核苷酸，為DNA分子的合成提供原料。在此合成過程中，葉酸作為重要的輔酶參與這一過程，而HAT培養液中氨基蝶呤是一種葉酸的拮抗物，可以阻斷DNA合成的“D途徑”。另一條途徑是應急途徑或補救途徑（“S途徑
沖擊電壓試驗原理及程序
沖擊電壓是單次瞬態過程，因此沖擊電壓試驗對電壓幅值、電壓波形及電壓次數三個試驗量有不同的要求。 1、電壓幅值： 對于不同的試品和不同的試驗要求，應該施加相應的沖擊電壓幅值。通過控制沖擊電壓發生器的充電電壓可以調節沖擊電壓的幅值，這是容易理解的。需要注意的是，沖擊電壓幅值與充電電壓之間
肩外展擺動試驗介紹
肩外展擺動試驗是對肩部的外展擺動進行觀察,檢查肩部的活動程度,是否存在異常,用于診斷肩部疾病.
改變DNA合成儀合成方法后清洗試劑管道
當從一種類型的化學合成方法改變為另一種類型后，清洗自動DNA合成儀上的所有管道是非常重要的。否則就會導致DNA合成失敗。具體方法如下：1）按照正常方法更換所有必要的試劑。2）將用過的合成柱裝在合成儀上每個柱的位置。3）在每一柱位置都輸入合成片段AGCTT序列。4）根據合成方法按照TritylOnMa
DNA酶試驗
DNA酶試驗是檢驗技師考試的內容，醫學教育網搜集整理相關內容供大家參考。（1）原理：某些細菌產生DNA酶，可使長鏈DNA水解成寡核苷酸鏈。因為長鏈DNA可被酸沉淀，寡核苷酸鏈則溶于酸，所以當在菌落平板上加入酸后，會在菌落周圍出現透明環。（2）培養基：0.2%DNA瓊脂平板。（3）方法：將被檢菌點種于
DNA酶試驗
(1)原理：某些細菌能產生DNA酶，可使長鏈DNA水解成為寡核苷酸鏈。因為長鏈DNA可被酸沉淀，而寡核苷酸則溶于酸。故在DNA瓊脂平板上加鹽酸后，可在菌落周圍形成透明環。 (2)培養基：0.2%DNA瓊脂平板。 (3)方法：在DNA瓊脂平板上點種待檢菌，35℃孵育18~24h，用1mol/L鹽
DNA連接試驗
當我們已經獲得目的基因片段，選擇好適當的克隆（或表達，轉化）質粒載體， 并確定重組方案后，下面要進行的就是ＤＮＡ片段之間的體外連接，從而獲得重組子。 此重組子可轉入相應的宿主菌中用于對目的基因的擴增以及目的基因表達（如現代基因工程藥物的生產），還可用于序列分析和轉基因等重要生物技術的研究中。?DNA
DNA合成儀的試劑驅動系統
一般地，DNA 合成儀采用一定壓力的惰性氣體（氬氣）或氮氣及電磁閥組驅動液體試劑，也可采用氦氣驅動試劑。某些合成儀采用slider block滑塊系統及精密蠕動泵，可不采用氣體為驅動系統。采用氣體及電磁閥驅動液體試劑時，需首先將管路系統電磁閥前段，含試劑瓶組中壓力加壓到規定氣壓，通過合成管理軟件
DNA合成儀的使用方法
亞磷酰胺寡核苷酸合成為例介紹該類儀器的一般操作步驟。亞磷酰胺DNA合成的試劑有：保護堿基的5／—DMT，A、G、C、T亞磷酰胺單體，四唑偶聯催化劑，乙酐，N—甲基咪唑封閉試劑，三氯乙酸（TCA）脫保護溶液，12氧化混合物，乙腈清洗溶劑，氨水切除溶液。使用步驟如下： 1）仔細檢查合成儀上所
自動DNA合成儀的日常維護
1．瓶塞“O”形環一月檢查一次“O”形環，zui少1年更換1次。將新的備用“O”形環與儀器上的相比較，如果在“O”形環上出現白色沉淀，用棉花蘸取乙腈，進行清洗。更換“O”形環的步驟如下：用止血鉗夾住“O”形環，從槽中取下（或用牙簽鉤下），注意不要損壞托住“O”形環的白色聚氟乙烯插塞（teflonin