RNA聚合酶催化RNA的合成,其與DNA聚合酶有許多相同的催化特點: ①以DNA為模板; ②催化核苷酸通過聚合反應合成核酸; ③聚合反應是核苷酸形成3’,5’一磷酸二酯鍵的反應; ④以3’→5’方向閱讀模板,5’→3’方向合成核酸; ⑤按照堿基配對原則忠實轉錄模板序列。......閱讀全文
RNA聚合酶催化RNA的合成,其與DNA聚合酶有許多相同的催化特點: ①以DNA為模板; ②催化核苷酸通過聚合反應合成核酸; ③聚合反應是核苷酸形成3’,5’一磷酸二酯鍵的反應; ④以3’→5’方向閱讀模板,5’→3’方向合成核酸; ⑤按照堿基配對原則忠實轉錄模板序列。
通常可根據生物的類別,將RNA聚合酶分為原核生物RNA聚合酶、真核生物RNA聚合酶。 原核生物和真核生物的RNA聚合酶有共同特點,但在結構、組成和性質等方面又不盡相同。 (1)原核生物RNA聚合酶 研究得最清楚的是大腸桿菌RNA聚合酶。該酶是由五種亞基組成的六聚體(α2ββ'ωσ)分
特異性強 PCR反應的特異性決定因素為: ①引物與模板DNA特異正確的結合; ②堿基配對原則; ③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性; ④靶基因的特異性與保守性。 其中引物與模板的正確結合是關鍵。引物與模板的結合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及TaqDN
該酶需要四種核糖核苷酸三磷酸(NTP:ATP、GTP、CTP、UTP)作為RNA聚合酶的底物,DNA為模板,二價金屬離子Mg2+、Mn2+是該酶的必需輔因子。其催化的反應表示為:(NMP)n+NTP→(NMP)n+1+PPi。RNA鏈的合成方向也是5’→3',第一個核苷酸帶有3個磷酸基。
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試劑、試劑盒 聚乙烯亞胺 儀器、耗材 SDS-PAGE 電泳裝置聚丙烯酰胺小膠 實驗步驟 材料與設備 SDS-PAGE 電泳裝置 聚丙烯酰胺小膠(10%) 試劑 聚乙烯亞胺(PEI)(6% 儲液,pH7.9) (配方,見“試劑的配制”,pp.184~18
試劑、試劑盒 聚乙烯亞胺 儀器、耗材 SDS-PAGE 電泳裝置聚丙烯酰胺小膠 實驗步驟 材料與設備 SDS-PAGE 電泳裝置 聚丙烯酰胺小膠(10%) 試劑 聚乙烯亞胺(PEI)(6% 儲液,pH7.9) (配方,見“試劑的配制”,pp.184~
科學家們通過記錄RNA聚合酶在何時何地通過與DNA序列結合啟動轉錄,觀察了早期RNA轉錄動力學。 生命的活動是通過蛋白質的制造而發生的,蛋白質賦予我們的細胞結構和功能。細胞蛋白質從DNA編碼的基因指令中獲得行進順序,他們的序列首先被復制并在一個叫做轉錄的多步驟過程中被制造成RNA。 科羅拉多
可分為以下幾個類群: (1)依賴DNA的DNA聚合酶; (2)依賴RNA的DNA聚合酶; (3)依賴DNA的RNA聚合酶; (4)依賴RNA的RNA聚合酶。 前兩者是DNA聚合酶,它使DNA復制鏈按模板順序延長。如在原核生物中僅就大腸桿菌中已被發現的就有三種(分別簡稱為P01Ⅰ,P01
實驗方法原理因為哺乳動物細胞不具備低等真核生物細胞所具有的擴增 RNAi 信號的機制,因此人工合成或體外轉錄的 siRNA 分子在細胞內的作用是瞬時性的,不適合用于進行靶基因的表達受到抑制后細胞表型的長期變化觀察,也不適于進行文庫的篩選。此外,體外制備 siRNA 分子的成本比較高,而且 siRNA