膜蛋白是膜功能的主要體現眷。根據與膜脂的結合方式以及在膜中的位置的不同,膜蛋白分為:整合蛋白(integralprotein)、外周蛋白(peripheralprotein)脂錨定蛋白(1ipid—anchoredprotein)。整合蛋白(IntegraIProteins):部分或全部鑲嵌在細胞膜中或內外兩側的蛋白質;根據跨膜次數將跨膜蛋白分為單次跨膜、多次跨膜、多亞單位跨膜等;整合蛋白約占膜蛋白的70一80%。整合蛋白與膜結合非常緊密,只有用去垢劑(detergent)才能從膜上洗滌下來.常用SDS和Triton—X100。外周蛋白又稱為外在蛋白(extrinsicprotein),為水溶性的,分布在細胞膜的表面.靠離子鍵或其他較弱的鍵與膜表面的蛋白質分子或脂分子的親水部分結合,因此只要改變溶液的離子強度甚至提高溫度就可以從膜上分離下來。脂錨定蛋白(Lipid—anchoredproteins):又稱脂連接蛋白(1ipid—......閱讀全文
膜蛋白是膜功能的主要體現眷。根據與膜脂的結合方式以及在膜中的位置的不同,膜蛋白分為:整合蛋白(integralprotein)、外周蛋白(peripheralprotein)脂錨定蛋白(1ipid—anchoredprotein)。整合蛋白(IntegraIProteins):部分或全部鑲嵌在細胞膜
外在膜蛋白分布在膜的內外表面,約占膜蛋白的20%~30%,主要在內表面,為水溶性蛋白,它通過離子鍵、氫鍵與膜脂分子的極性頭部相結合,或通過與內在蛋白的相互作用,間接與膜結合。 膜蛋白(左:外周膜蛋白與內在膜蛋白;右:脂錨定蛋白) 膜蛋白(左:外周膜蛋白與內在膜蛋白;右:脂錨定蛋白) 內在蛋
1、單純擴散:脂溶性物質由膜的高濃度區一側向膜的低濃度區一側順濃度差跨膜的移動過程。順濃度差,不耗能;無需膜蛋白幫助;最終使轉運物質在膜兩側的濃度差消失。2、易化擴散:非脂溶性或脂溶性較小的物質在膜蛋白質的幫助下,由膜的高濃度一側向低濃度一側轉運的過程。載體轉運——小分子親水物質。蛋白質有結構特異性
◆運輸蛋白:膜蛋白中有些是運輸蛋白,轉運特殊的分子和離子進出細胞;◆酶:有些是酶,催化相關的代謝反應;◆連接蛋白:有些是連接蛋白,起連接作用;◆受體:起信號接收和傳遞作用。
實驗步驟一、膜的制備從細胞或組織中分離質膜是純化膜蛋白的第一步。由于缺少能有效分離去污劑增溶的膜蛋白的生化方法,因此在質膜成分純化上投人一些時間會對后續步驟的結果有利。大多數膜蛋白的含量較低, 因此選擇易于大量獲取并能高表達目的膜蛋白的組織或細胞系就很重要。最近,人們對于將細胞表面蛋白質作為鑒定不同
實驗步驟 一、膜的制備 從細胞或組織中分離質膜是純化膜蛋白的第一步。由于缺少能有效分離去污劑增溶的膜蛋白的生化方法,因此在質膜成分純化上投人一些時間會對后續步驟的結果有利。 大多數膜蛋白的含量較低, 因此選擇易于大量獲取并能
生物膜所含的蛋白叫膜蛋白,是生物膜功能的主要承擔者。 根據蛋白分離的難易及在膜中分布的位置,膜蛋白基本可分為三大類:外在膜蛋白或稱外周膜蛋白、內在膜蛋白或稱整合膜蛋白和脂錨定蛋白。膜蛋白包括糖蛋白,載體蛋白和酶等。通常在膜蛋白外會連接著一些糖類,這些糖相當于會通過糖本身分子結構變化將信號傳到細胞
實驗概要本實驗對細菌膜蛋白進行了分離。主要試劑1. Tris-Mg 緩沖液 ?? 10mM Tris-Cl ?? 5mM MgCl2 ?? pH 7.3,4℃保存 2. 2%(w/v)十二烷基肌氨酸鈉 (SLS)實驗步驟1. 于20ml 營養肉湯中過夜培養細菌,37℃,200rpm。 2. 1000
常用于重組膜蛋白的表達系統有真核表達系統、原核表達系統和近些年來發展的無細胞表達系統。其中以大腸桿菌(E.coli)為代表的原核表達系統因為操作簡單、成本相對低廉、遺傳背景清楚、方便同位素標記,以及有大量可利用的表達載體和宿主菌株等原因,是當下獲取重組膜蛋白的最主要途徑。對于一些膜蛋白而言,采用
膜蛋白的功能是多方面的。膜蛋白在生物體的許多生命活動中起著非常重要的作用,如細胞的增殖和分化、能量轉換、信號轉導及物質運輸等。據估計有大約60%的藥物作用靶點是膜蛋白。 膜蛋白可作為“載體”而將物質轉運進出細胞。有些膜蛋白是激素或其他化學物質的專一受體,如甲狀腺細胞上有接受來自腦垂體的促甲狀腺