用單克隆抗體KM2287包被ELISA反應板小孔,用生物素標記單克隆抗體KM2275,用HRP標記鏈霉親和索,采用生物素一親和素夾心酶免疫測定辦法;lshiharaR等測定了該方法的最適工作條件:尿液標本測定前需經凝膠過濾;尿液過濾后需用含1g/LSDS的PBS稀釋10倍;最適pH為6.0-8.0。當尿液貯存于-60℃、-30℃、或4℃30天,酶蛋白含量均未下降。可能影響的物質如維生素C(10g/L)、葡萄糖(100g/L)、白蛋白(10g/L)或肌酐(1g/L)均不影響該ELISA方法。......閱讀全文
用單克隆抗體KM2287包被ELISA反應板小孔,用生物素標記單克隆抗體KM2275,用HRP標記鏈霉親和索,采用生物素一親和素夾心酶免疫測定辦法;lshiharaR等測定了該方法的最適工作條件:尿液標本測定前需經凝膠過濾;尿液過濾后需用含1g/LSDS的PBS稀釋10倍;最適pH為6.0-8.0。
Enzyme-linked Immunosorbent Assays (ELISAs) combine the specificity of antibodies with the sensitivity of simple enzyme assays, by using antibodies o
General?Protocol for the Sandwich ELISA method: Before the assay, both antibody preparations should be purified and one must be labeled. For mo
實驗概要夾心 ?ELISA 法是應用兩種抗體協同測定抗原含量的方法(即:捕獲抗體和檢測抗體)。因此抗原必須包含至少 2 個能被抗體識別的抗原位點。在夾心 ?ELISA ?中,單克隆抗體和多克隆抗體都可以被用作捕獲抗體和檢測抗體。單抗識別單一的抗原表位,可以區別抗原的微小差別,使抗原得到更精確地檢測和
實驗概要夾心 ?ELISA 法是應用兩種抗體協同測定抗原含量的方法(即:捕獲抗體和檢測抗體)。因此抗原必須包含至少 2 個能被抗體識別的抗原位點。在夾心 ?ELISA ?中,單克隆抗體和多克隆抗體都可以被用作捕獲抗體和檢測抗體。單抗識別單一的抗原表位,可以區別抗原的微小差別,使抗原得到更精確地檢測和
定性測定的效果判別是對受檢標本中是否含有待測抗原或抗體作出"有"或"無"的簡略答復,ELISA試劑盒分別用"陽性"、"陰性"標明。"陽性"標明該標本在該測定系統中有反應。"陰性"則為無反應。用定性判別法也可得到半定量效果,即用滴度來標明反應的強度,其實質仍是一個定性實驗。在這種半定量測定中,將標本作
① 加抗體(Ab-1)包被 → 4℃過夜,洗滌三次、拋干 ② 加待檢抗原(Ag) → 37℃ 60分鐘,洗滌三次、拋干 ③ 加用非同種動物生產的特異性抗體(Ab-2)→ 37℃ 60分鐘,洗滌三次、拋干 ④ 加入酶標抗Ab-2抗體(AB-3)→ 37℃ 60分鐘,洗滌三次、拋干 ⑤ 加底物
實驗概要夾心 ELISA 的一般程序。實驗原理夾心 ELISA 測定兩層抗體(即捕獲抗體和檢測抗體)間的抗原數。要測定的抗原必須包含至少兩個能夠結合到抗體的抗原位點,因為至少兩個抗體在夾心中起作用。單克隆或多克隆抗體均可在夾心 ELISA 系統中用作捕獲抗體和檢測抗體。單克隆抗體識別單一表位,可對抗
操作步驟?1.包被:用0.05M PH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質含量為1~10μg/ml。在每個聚苯乙烯板的反應孔中加0.1ml,4℃過夜。次日,棄去孔內溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡稱洗滌,下同)。2.加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵
實驗概要夾心 ELISA 的一般程序。實驗原理夾心 ELISA 測定兩層抗體(即捕獲抗體和檢測抗體)間的抗原數。要測定的抗原必須包含至少兩個能夠結合到抗體的抗原位點,因為至少兩個抗體在夾心中起作用。單克隆或多克隆抗體均可在夾心 ELISA 系統中用作捕獲抗體和檢測抗體。單克隆抗體識別單一表位,可對抗