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(1) 甲基化特異性的PCR（Methylation-specific PCR，MSP）用亞硫酸氫鹽處理基因組DNA，所有未發生甲基化的胞嘧啶被轉化為尿嘧啶，而甲基化的胞嘧啶不變；隨后設計針對甲基化和非甲基化序列的引物進行PCR。通過電泳檢測MSP擴增產物，如果用針對處理后甲基化DNA鏈的引物能得到擴增片段，則說明該位點存在甲基化；反之，說明被檢測的位點不存在甲基化。(2)亞硫酸氫鹽測序法（Bisulfite sequencing PCR，BSP）用亞硫酸氫鹽處理基因組DNA，則未發生甲基化的胞嘧啶被轉化為尿嘧啶，而甲基化的胞嘧啶不變。隨后設計BSP引物進行PCR，在擴增過程中尿嘧啶全部轉化為胸腺嘧啶，最后對PCR產物進行測序就可以判斷CpG位點是否發生甲基化稱為BSP-直接測序方法。將PCR產物克隆至載體后進行測序，可以提高測序成功率，這種方法稱為BSP-克隆測序法。(3) 高分辨率熔解曲線法（High Resolution ......閱讀全文
(1) 甲基化特異性的PCR（Methylation-specific PCR，MSP）用亞硫酸氫鹽處理基因組DNA，所有未發生甲基化的胞嘧啶被轉化為尿嘧啶，而甲基化的胞嘧啶不變；隨后設計針對甲基化和非甲基化序列的引物進行PCR。通過電泳檢測MSP擴增產物，如果用針對處理后甲基化DNA鏈的引物能得到
相關專題1 甲基化敏感性限制性內切酶 (methylation-sensitive restriction Endonuclease，MS-RE)-PCR/Southern法這種方法利用甲基化敏感性限制性內切酶 對甲基化區的不切割的特性，將DNA消化為不同大小的片段后再進行分析。常使用的甲基化敏感的
?甲基化熒光檢測(methylight)是利用熒光定量性PCR檢測亞硫酸氫鈉處理后的序列改變。在TaqManR技術中，可以使用3種不同的單核苷酸(正義引物、反義引物和熒光雜交探針)，進行不同序列的檢測。與已存在的技術相比，甲基化熒光檢測最明顯的優點就是能同時對幾百甚至幾千例樣品迅速檢測。???? 高
?????? 甲基化熒光檢測（methylight）是利用熒光定量性PCR檢測亞硫酸氫鈉處理后的序列改變。在TaqManR技術中，可以使用3種不同的單核苷酸（正義引物、反義引物和熒光雜交探針），進行不同序列的檢測。與已存在的技術相比，甲基化熒光檢測zui明顯的優點就是能同時對幾百甚至幾千例樣品迅速檢
實驗材料 細胞 試劑、試劑盒 甲基甲硫氨酸 儀器、耗材 SDS-PAGE 實驗步驟 1. 用 100 μCi/ml 的 [3H] 甲基甲硫氨酸標記細胞（約 1X107）。 2. 用放射免疫沉淀和 SDS-PAGE 分離目的蛋白。 3. 熒光光譜法觀
自2004年美國批準Vidaza (azacitidine)可用于血液疾病( 如MDS)的治療以來，通過改變致病基因的表觀遺傳學特征進行疾病治療的方法，為人們帶來了疾病的新治療策略。然而，由于表觀遺傳檢測方法的局限，要確定基因的堿基在何處以何種程度被甲基化一直以來困擾著研究者，從而難以確定基
隨著高通量測序技術（NGS）技術的發展，使我們能夠從全基因組水平來分析 5’甲基胞嘧啶及組蛋白修飾等事件，由此能夠發現很多傳統的基因組學研究所不能發現的東西，這就是所謂的“DNA 甲基化測序”！DNA 甲基化測序方法按原理可以分成三大類：?1、重亞硫酸鹽測序；?2、基于限制性內切酶的測序；?3、靶向
3月8日，中國科學院生物物理研究所研究員朱冰課題組在Nature Protocols上，在線發表了以Simultaneously measuring the methylation of parent and daughter strands of replicated DNA at the s
表觀組學研究滯后于基因組學是可以理解的。一方面，在分析堿基修飾或染色體活性之前，我們需要知道基因組的確切序列，即得到基因組的參考序列，在這個基礎之上基因組的表觀調控研究才能得以進行；另一方面，造成表觀組學研究發展相對緩慢的一個重要原因，是目前支撐表觀組學研究的技術手段都或多或少存在一定的局限性，限制
甲基化是目前的研究熱點，就我所做的一點工作并其中一點心得，與大家分享。希望能夠對大家有所幫助。 第一部分 基因組DNA的提取。 這一步沒有懸念，完全可以購買供細胞或組織使用的DNA提取試劑盒，如果實驗室條件成熟，自己配試劑提取完全可以。DNA比較穩定，只要在操作中不要使用暴力，提出的基因組DNA應