熒光原位雜交的發展
熒光原位雜交技術問世于20世紀70年代后期。1977年,熒光標記的抗體被應用于識別特異性DNA—RNA雜交I I。1980年,J.G.Baunlan等將應用化學偶聯的方法將熒光素結合到RNA探針上用于直接快速的特異性靶序列檢測。......閱讀全文
熒光原位雜交的發展
熒光原位雜交技術問世于20世紀70年代后期。1977年,熒光標記的抗體被應用于識別特異性DNA—RNA雜交I I。1980年,J.G.Baunlan等將應用化學偶聯的方法將熒光素結合到RNA探針上用于直接快速的特異性靶序列檢測。
熒光原位雜交的發展歷程
位點數目及檢測目標 在FISH 技術基本確立之后,FISH 不僅用于單基因或核酸檢測,FISH 技術的進一步發展擴展到多色FISH 多基因位點同時檢測,從基因檢測發展到基因組、染色體、活細胞中轉錄產物mRNAs 原位檢測以及組織水平的核酸檢測,并且在今后的研究中還有可能應用到整個生物體的檢測。
熒光原位雜交檢測領域發展
鑒于FISH 起始階段的發展主要是探針類型和檢測位點的擴展,熒光檢測技術將來的發展可能包括檢測領域的擴展。熒光圖像臨床診斷應用需要在檢測體系上進一步提高,如探針的結合,照相和分析的自動化,因此避免了不同操作間的誤差。樣品厚度是熒光顯微鏡檢測樣品類型的一個限制因素。近來的激光共聚焦顯微鏡和光學X射
熒光原位雜交的技術發展
熒光原位雜交技術問世于20世紀70年代后期。1977年,熒光標記的抗體被應用于識別特異性DNA—RNA雜交I I。1980年,J.G.Baunlan等將應用化學偶聯的方法將熒光素結合到RNA探針上用于直接快速的特異性靶序列檢測。
?-熒光原位雜交的技術發展
熒光原位雜交技術問世于20世紀70年代后期。1977年,熒光標記的抗體被應用于識別特異性DNA—RNA雜交I I。1980年,J.G.Baunlan等將應用化學偶聯的方法將熒光素結合到RNA探針上用于直接快速的特異性靶序列檢測。
熒光原位雜交的技術發展
熒光原位雜交技術問世于20世紀70年代后期。1977年,熒光標記的抗體被應用于識別特異性DNA—RNA雜交I I。1980年,J.G.Baunlan等將應用化學偶聯的方法將熒光素結合到RNA探針上用于直接快速的特異性靶序列檢測。
?-熒光原位雜交的技術發展
(一)多彩色熒光原位雜交(multicolor fluorescence in situ hybridization,mFISH)mFISH是在熒光原位雜交基礎上發展起來的新技術,它不僅具有FISH的優點,而且克服了FISH的許多局限,其最大特點是可將多次繁頊的FISH實驗和多種不同的基因定位在一次
熒光原位雜交技術的發展歷程
1969年,Pardue和John等兩個研究小組開始采用放射性標記DNA或28S RNA發明了原位雜交技術(ISH)。盡管當時原位雜交技術已經具有較高的特異性和靈敏度,但鑒于放射性同位素自身特性的局限,如安全性、空間分辨率低、不穩定性等問題,這項技術僅限于實驗室研究方面的應用。 1986年科研
概述熒光原位雜交的技術發展
(一)多彩色熒光原位雜交(multicolor fluorescence in situ hybridization,mFISH) mFISH是在熒光原位雜交基礎上發展起來的新技術,它不僅具有FISH的優點,而且克服了FISH的許多局限,其最大特點是可將多次繁頊的FISH實驗和多種不同的基因定
簡述熒光原位雜交的技術發展
熒光原位雜交技術問世于20世紀70年代后期。 1977年,熒光標記的抗體被應用于識別特異性DNA—RNA雜交I I。 1980年,J.G.Baunlan等將應用化學偶聯的方法將熒光素結合到RNA探針上用于直接快速的特異性靶序列檢測。
熒光原位雜交的熒光原位雜交
熒光原位雜交(fluorescence in situ hybridization,FISH)是在20世紀80年代末在放射性原位雜交技術的基礎上發展起來的一種非放射性分子細胞遺傳技術,以熒光標記取代同位素標記而形成的一種新的原位雜交方法。探針首先與某種介導分子(reporter molecule)結
關于熒光原位雜交的檢測領域發展的介紹
鑒于FISH 起始階段的發展主要是探針類型和檢測位點的擴展,熒光檢測技術將來的發展可能包括檢測領域的擴展。熒光圖像臨床診斷應用需要在檢測體系上進一步提高,如探針的結合,照相和分析的自動化,因此避免了不同操作間的誤差。樣品厚度是熒光顯微鏡檢測樣品類型的一個限制因素。近來的激光共聚焦顯微鏡和光學X射
熒光原位雜交實驗——熒光原位雜交技術
熒光原位雜交可應用于:(1)動植物基因組結構研究;(2)染色體精細結構變異分析;(3)病毒感染分析;(4)腫瘤遺傳學和基因組進化研究。實驗方法原理用已知的標記單鏈核酸為探針,按照堿基互補的原則,與待檢材料中未知的單鏈核酸進行異性結合,形成可被檢測的雜交雙鏈核酸。由于DNA分子在染色體上是沿著染色體縱
原位雜交與熒光原位雜交
?一、原位雜交( In Situ Hybridization,ISH)?是用標記的核酸探針,使用非放射檢測系統或放射自顯影系統,在組織切片、細胞涂片及染色體制片上等對核酸進行定性、定位和相對定量研究的一種分子生物學方法,具有靈敏、特異、直觀等優點。已逐漸成為分子生物學和分子病理學的常見技術之一,廣泛
原位雜交與熒光原位雜交
?一、原位雜交( In Situ Hybridization,ISH)?是用標記的核酸探針,使用非放射檢測系統或放射自顯影系統,在組織切片、細胞涂片及染色體制片上等對核酸進行定性、定位和相對定量研究的一種分子生物學方法,具有靈敏、特異、直觀等優點。已逐漸成為分子生物學和分子病理學的常見技術之一,廣泛
原位雜交與熒光原位雜交
一、原位雜交( In Situ Hybridization,ISH) 是用標記的核酸探針,使用非放射檢測系統或放射自顯影系統,在組織切片、細胞涂片及染色體制片上等對核酸進行定性、定位和相對定量研究的一種分子生物學方法,具有靈敏、特異、直觀等優點。已逐漸成為分子生物學和分子病理學的常見技術之一,廣泛應
熒光原位雜交的簡介
熒光原位雜交(fluorescence in situ hybridization, FISH)是在20世紀80年代末在放射性原位雜交技術的基礎上發展起來的一種非放射性分子細胞遺傳技術,以熒光標記取代同位素標記而形成的一種新的原位雜交方法,探針首先與某種介導分子(reporter molecul
熒光原位雜交的原理
熒光原位雜交(Fluorescence in situ hybridization,FISH)是20世紀80年代末在放射性原位雜交技術基礎上發展起來的一種非放射性分子生物學和細胞遺傳學結合的新技術,是以熒光標記取代同位素標記而形成的一種新的原位雜交方法。
熒光原位雜交的概念
熒光原位雜交(Fluorescence in situ hybridization,FISH)是20世紀80年代末在放射性原位雜交技術基礎上發展起來的一種非放射性分子生物學和細胞遺傳學結合的新技術,是以熒光標記取代同位素標記而形成的一種新的原位雜交方法。
熒光原位雜交的應用
該技術不但可用于已知基因或序列的染色體定位,而且也可用于未克隆基因或遺傳標記及染色體畸變的研究。在基因定性、定量、整合、表達等方面的研究中頗具優勢。 FISH最初用于中期染色體。從正在分化的細胞核中制備的這種染色體是高度凝縮的,每條染色體都具有可識別的形態,它們染色后將顯現出特征性的著絲粒位置
熒光原位雜交的背景
對于利用rRNA的熒光原位雜交來說,如下原因可導致較低的熒光信號強度: 較低的細胞核糖體含量 較低的細胞周邊的通透性 較低的目標序列可接觸性(由于rRNA的折疊產生的構象,有些位置與rRNA分子內其他鏈或其他rRNA或蛋白緊密接觸,從而使探針無法和目標序列雜交) 為檢驗細胞中的目標序列是
熒光原位雜交的特點
原位雜交的探針按標記分子類型分為放射性標記和非放射性標記。用同位素標記的放射性探針優勢在于對制備樣品的要求不高,可以通過延長曝光時間加強信號強度,故較靈敏。缺點是探針不穩定、自顯影時間長、放射線的散射使得空間分辨率不高、及同位素操作較繁瑣等。采用熒光標記系統則可克服這些不足,這就是FISH技術。
熒光原位雜交介紹
熒光原位雜交(fluorescence in situ hybridization,FISH)是在20世紀80年代末在放射性原位雜交技術的基礎上發展起來的一種非放射性分子細胞遺傳技術,以熒光標記取代同位素標記而形成的一種新的原位雜交方法,探針首先與某種介導分子(reporter molecule)結
熒光原位雜交實驗
?實驗原理熒光原位雜交(Fluorescence in situ hybridization FISH)是一門新興的分子細胞遺傳學技術,是20世紀80年代末期在原有的放射性原位雜交技術的基礎上發展起來的一種非放射性原位雜交技術。目前這項技術已經廣泛應用于動植物基因組結構研究、染色體精細結構變異分析、
熒光原位雜交實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 用已知的標記單鏈核酸為探針,按照堿基互補的原則,與待檢材料中未知的單鏈核酸進行異性結合,形成可被檢測的雜交雙鏈核酸。由于DNA分子在染色體上是沿著染色體縱軸呈線性排列,因而可以探針直接與染色體進行雜交從而將特定的基因在染色體上
RNA熒光原位雜交
原位雜交:在研究DNA分子復制原理的基礎上發展起來的一種技術。其基本原理是兩條核苷酸單鏈片段,在適宜的條件下,能過氫鍵結合,形成DNA-DNA、DNA-RNA或 RNA-RNA 雙鍵分子的特點,應帶有標記的(有放射性同位素,如3H、35S、32P、熒光素生物素、地高辛等非放射性物質)DAN或 RNA
熒光原位雜交實驗
實驗方法原理 熒光原位雜交(Fluorescence in situ hybridization FISH)是一門新興的分子細胞遺傳學技術,是20世紀80年代末期在原有的放射性原位雜交技術的基礎上發展起來的一種非放射性原位雜交技術。目前這項技術已經廣泛應用于動植物基因組結構研究、染色體精細結構變
FISH熒光原位雜交實驗(原位雜交)
1. 實驗目的??????? 通過實驗了解熒光原位雜交技術的基本原理和在生物學、醫學領域的應用。掌握原位雜交技術的操作方法,熟練掌握熒光顯微鏡的使用方法。2. 實驗原理??????? 熒光原位雜交(Fluorescence in situ hybridization FISH)是一門新興的分子細胞遺
熒光原位雜交的方法介紹
熒光原位雜交(Fluorescence in situ hybridization,FISH)是20世紀80年代末在放射性原位雜交技術基礎上發展起來的一種非放射性分子生物學和細胞遺傳學結合的新技術,是以熒光標記取代同位素標記而形成的一種新的原位雜交方法。
熒光原位雜交的技術應用
(一)基因(或DNA片段)染色體定位和基因圖譜繪制目前應用的基因定位的主要方法是FISH。分離到的DNA序列直接通過FISH,同時采用多種顏色熒光素的標記探針,結合中期染色體和間期細胞方面的信息,可快速確定一-系列DNA序列之間的相互次序和距離,完成基因制圖。用不同顏色炎光索標記2個不同的DNA鏈,