膠原酶的制備方法
膠原酶(collagenase)是從溶組織梭狀細胞芽孢桿菌提取制備的,主要水解結締組織中膠原蛋白成分。當擬消化的組織較硬,內含較多結締組織或膠原成分時,用胰蛋白酶解離細胞的效果較差,這時可采用膠原酶解離細胞法。 膠原酶僅對細胞間質有消化作用而對上皮細胞影響不大。因此適于消化分離纖維性組織、上皮及癌組織,可使上皮細胞與膠原成分分離而不受損害。常用劑量為最終濃度200U/ml(約為1mg/mL)或0.03%~0.3%。......閱讀全文
膠原酶的制備方法
膠原酶(collagenase)是從溶組織梭狀細胞芽孢桿菌提取制備的,主要水解結締組織中膠原蛋白成分。當擬消化的組織較硬,內含較多結締組織或膠原成分時,用胰蛋白酶解離細胞的效果較差,這時可采用膠原酶解離細胞法。 膠原酶僅對細胞間質有消化作用而對上皮細胞影響不大。因此適于消化分離纖維性組織、上皮及癌組
膠原酶的使用方法
1.將漂洗、修剪干凈的組織剪成1~2mm3左右小塊2.將組織塊放入離心管(三角燒瓶)中加入30~50倍體積的膠原酶溶液,旋緊蓋子(密封燒瓶)。3.將燒瓶放入37℃水浴或者37℃孵箱內,每隔3min振搖一次,如能放在37℃的恒溫震蕩水浴箱中則更好。消化時間與組織的類別有關,對于某些腫瘤組織或其他較致密
膠原酶的簡介
膠原酶按其存在的方式不同可分為人體內源性膠原酶和藥用膠原酶兩種。人體內源性膠原酶是指人體內部本身所具有的膠原酶,如牙齦、觸膜等上皮組織和關節滑膜、椎間盤內都不同程度的存在著這種膠原酶,它在體內膠原蛋白的分解過程中發揮著不可或缺的作用。藥用膠原酶是指利用生物制藥的高科技手段從溶組織梭狀芽孢桿菌的發
膠原酶的使用
1.將漂洗、修剪干凈的組織剪成1~2mm3左右小塊2.將組織塊放入離心管(三角燒瓶)中加入30~50倍體積的膠原酶溶液,旋緊蓋子(密封燒瓶)。3.將燒瓶放入37℃水浴或者37℃孵箱內,每隔3min振搖一次,如能放在37℃的恒溫震蕩水浴箱中則更好。消化時間與組織的類別很有關系,對于某些腫瘤組織或其他較
膠原酶的使用
1.將漂洗、修剪干凈的組織剪成1~2mm3左右小塊2.將組織塊放入離心管(三角燒瓶)中加入30~50倍體積的膠原酶溶液,旋緊蓋子(密封燒瓶)。3.將燒瓶放入37℃水浴或者37℃孵箱內,每隔3min振搖一次,如能放在37℃的恒溫震蕩水浴箱中則更好。消化時間與組織的類別有關,對于某些腫瘤組織或其他較致密
膠原酶的分類
膠原酶按其存在的方式不同可分為人體內源性膠原酶和藥用膠原酶兩種。
Ⅰ型膠原酶和Ⅱ型膠原酶有什么區別
Ⅰ型膠原酶和Ⅱ型膠原酶在來源和底物特異性方面存在差異。1. 來源:Ⅰ型膠原酶來源于動物成纖維細胞,而Ⅱ型膠原酶來源于哺乳動物胚胎組織。2. 底物特異性:Ⅰ型膠原酶可以降解所有的Ⅰ型膠原,并且對其他的蛋白質沒有降解作用。然而,Ⅱ型膠原酶可以特異性的降解Ⅱ型膠原,并且只能微弱的降解Ⅰ型膠原。總結來說,Ⅰ
Ⅰ型膠原酶和Ⅱ型膠原酶有什么區別
Ⅰ型膠原酶和Ⅱ型膠原酶在來源和底物特異性方面存在差異。1. 來源:Ⅰ型膠原酶來源于動物成纖維細胞,而Ⅱ型膠原酶來源于哺乳動物胚胎組織。2. 底物特異性:Ⅰ型膠原酶可以降解所有的Ⅰ型膠原,并且對其他的蛋白質沒有降解作用。然而,Ⅱ型膠原酶可以特異性的降解Ⅱ型膠原,并且只能微弱的降解Ⅰ型膠原。總結來說,Ⅰ
Ⅰ型膠原酶和Ⅱ型膠原酶有什么區別
Ⅰ型膠原酶和Ⅱ型膠原酶在來源和底物特異性方面存在差異。1. 來源:Ⅰ型膠原酶來源于動物成纖維細胞,而Ⅱ型膠原酶來源于哺乳動物胚胎組織。2. 底物特異性:Ⅰ型膠原酶可以降解所有的Ⅰ型膠原,并且對其他的蛋白質沒有降解作用。然而,Ⅱ型膠原酶可以特異性的降解Ⅱ型膠原,并且只能微弱的降解Ⅰ型膠原。總結來說,Ⅰ
膠原酶解離組織
實驗方法原理切碎的組織放于含有膠原酶的完全培養基中孵育,組織分解后,通過離心去除膠原酶,高濃度接種、培養。實驗材料膠原酶DBSS儀器、耗材培養基移液器皮氏平皿培養瓶離心管手術刀離心機實驗步驟1. 將組織移人新鮮、無菌的 DBSS 中,淸洗。2. 轉入另一培養皿(9 cm 皮氏平皿,非組織培養級別),
膠原酶解離組織
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 切碎的組織放于含有膠原酶的完全培養基中孵育,組織分解后,通過離心去除膠原酶,高濃度接種、培養。 實驗材料 膠原酶 DBSS
膠原酶的基本信息
膠原酶的化學名為膠原蛋白水解酶(Collagenase),它能在生理PH和溫度條件下特異性地水解天然膠原蛋白的三維螺旋結構,而不損傷其它蛋白質和組織。膠原酶的化學本質是一種蛋白質,因此,它對溫度、PH和導致蛋白質變性的各種因素均非常敏感,極易受到外界條件的影響而改變其本身的構象和性質。
膠原酶解離組織實驗
實驗方法原理 切碎的組織放于含有膠原酶的完全培養基中孵育,組織分解后,通過離心去除膠原酶,高濃度接種、培養。實驗材料 膠原酶DBSS儀器、耗材 培養基移液器皮氏平皿培養瓶離心管手術刀離心機實驗步驟 1. 將組織移人新鮮、無菌的 DBSS 中,淸洗2. 轉入另一培養皿(9 cm 皮氏平皿,非組織培養級
人體內源性膠原酶和藥用膠原酶的功能對比
人體內源性膠原酶是指人體內部本身所具有的膠原酶,如牙齦、觸膜等上皮組織和關節滑膜、椎間盤內都不同程度的存在著這種膠原酶,它在體內膠原蛋白的分解過程中發揮著不可或缺的作用。藥用膠原酶是指利用生物制藥的高科技手段從溶組織梭狀芽孢桿菌的發酵液中提取、純化并精制而得的白色或類白色無菌凍干粉針生物制劑。
膠原酶的基本內容介紹
膠原酶的化學名為膠原蛋白水解酶(Collagenase),它能在生理PH和溫度條件下特異性地水解天然膠原蛋白的三維螺旋結構,而不損傷其它蛋白質和組織。膠原酶的化學本質是一種蛋白質,因此,它對溫度、PH和導致蛋白質變性的各種因素均非常敏感,極易受到外界條件的影響而改變其本身的構象和性質。
膠原酶的作用和化學本質
膠原酶的化學名為膠原蛋白水解酶(Collagenase),它能在生理PH和溫度條件下特異性地水解天然膠原蛋白的三維螺旋結構,而不損傷其它蛋白質和組織。膠原酶的化學本質是一種蛋白質,因此,它對溫度、PH和導致蛋白質變性的各種因素均非常敏感,極易受到外界條件的影響而改變其本身的構象和性質。
膠原酶的類型及消化類型
膠原酶分為Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ型以及肝細胞專用膠原酶,要根據所要分離消化的組織類型選擇膠原酶類型。1、膠原酶Ⅰ用于上皮、肺,脂肪和腎上腺組織細胞的分離。用于消化組織中連接部分使其成為單個細 胞,用于哺乳動細胞的分離。2、膠原酶Ⅳ包含至少7種蛋白酶成分,分子量從68-130KD不等。它能消化多種組織。3
什么是膠原酶消化法
就是用膠原酶處理消化組織達到分離細胞的目的,所用膠原酶有不同類型:1、膠原酶Ⅰ用于上皮、肺,脂肪和腎上腺組織細胞的分離。用于消化組織中連接部分使其成為單個細胞,用于哺乳動細胞的分離。2、膠原酶Ⅳ包含至少7種蛋白酶成分,分子量從68-130KD不等。它能消化多種組織。3、膠原酶Ⅴ包含至少7種蛋白酶成分
什么是膠原酶消化法
就是用膠原酶處理消化組織達到分離細胞的目的,所用膠原酶有不同類型:1、膠原酶Ⅰ用于上皮、肺,脂肪和腎上腺組織細胞的分離。用于消化組織中連接部分使其成為單個細胞,用于哺乳動細胞的分離。2、膠原酶Ⅳ包含至少7種蛋白酶成分,分子量從68-130KD不等。它能消化多種組織。3、膠原酶Ⅴ包含至少7種蛋白酶成分
地塞米松的制備方法
一種新的地塞米松21-羥基物的生產工藝方法,以中間體21-醋酸酯為底物,以含0~10%氯仿的適量甲醇作為溶劑對底物進行半溶,用堿作為催化劑進行水解反應,反應完全后用醋酸中和,將反應液減壓濃縮至適量體積,降溫,過濾,用水沖洗濾餅,干燥得21-羥基物。該工藝可縮短生產周期,提高21-羥基物的質量和收率,
涂片的制備方法
(1)推片法:用于稀薄的標本,如血液,胸、腹水等。取離心后標本一小滴滴在玻片偏右側端,用推片用30度夾角將玻片上檢液輕輕向左推。(2)涂抹法:適用于稍稠的檢液,如鼻咽部標本。用竹棉簽在玻片上涂布,由玻片中心經順時針方向外轉圈淫抹;或從玻片一端開始平行涂抹,涂抹要均勻,不宜重復。(3)壓拉涂片法:將標
糊精的制備方法
淀粉預處理→干燥→熱處理→冷卻→成品(糊精)其中白糊精的反應溫度較低,PH值較低,有色產物較少。黃糊精是低PH值及高溫下高度轉化產品。
尿素的制備方法
方法一用二氧化碳和氨在高溫、高壓下合成氨基甲酸銨,經分解、吸收轉化后,結晶,分離、干燥而成。方法二其制備方法是將經過凈化的氨與二氧化碳按摩爾比2.8~4.5混合進入合成塔,塔內壓力為13.8~24.6 MPa,溫度為180~200 ℃,反應物料停留時間為25~40 min,得到含過剩氨和氨基甲酸銨的
乙烯的制備方法
自然形成乙烯是一種氣體激素。成熟的組織釋放乙烯較少,而在分生組織,萌發的種子、凋謝的花朵和成熟過程中的果實乙烯的產量較大。它存在于成熟的果實;莖的節;衰老的葉子中。乙烯的產生具有“自促作用”(即乙烯的積累可以刺激更多的乙烯產生)。植物在干旱、大氣污染、機械刺激、化學脅迫、病害等逆境下,體內乙烯成幾倍
抗原的制備方法
實驗概要除完整的細胞可作為抗原外,各種不同的細胞內存在的各種分子量不同的物質,也都具有全抗原或半抗原的性質,某種抗原物質可能是某一類細胞所特有的,可作為這種細胞的一個標志。由于細胞存在著許多性質不同的抗原物質,有時要從這眾多的物質中提取、純化某種抗原物質,以供科學研究之用。實驗步驟一、抗原的提取
抗原的制備方法
抗原的制備 除完整的細胞可作為抗原外,各種不同的細胞內存在的各種分子量不同的物質,也都具有全抗原或半抗原的性質,某種抗原物質可能是某一類細胞所特有的,可作為這種細胞的一個標志。由于細胞存在著許多性質不同的抗原物質,有時要從這眾多的物質中提取、純化某種抗原物質,以供科學研究之用。 一、抗原的提取
溶菌酶的制備方法
溶菌酶是采用生物工程技術進行克隆、提取而制取,它是一種天然酶,安全綠色的添加劑,無抗藥性。 該酶廣泛存在于人體多種組織中,鳥類和家禽的蛋清、哺乳動物的淚、唾液、血漿、尿、乳汁等體液以及微生物中也含此酶,其中以蛋清含量最為豐富。從雞蛋清中提取分離的溶菌酶是由18種129個氨基酸殘基構成的單一肽鏈。
抗原的制備方法
實驗步驟一、抗原的提取抗原的制備是一件十分細致的工作,要制備一個高純度的抗原,需要付出艱巨的努力,制備工作涉及物理學、化學和生理學等許多領域的知識。根據物理或化學特性建立起來的分離、純化方法的主要原理不外乎科二個方面:①利用混合物中幾個組分分配率的差別將他們分配到可用機械方法分離的兩或幾個物相中,如
溶菌酶的制備方法
目前溶菌酶可以以雞蛋清和蛋殼膜為材料提取制得,常用的方法有親和層析法、離子交換樹脂法、直接結晶法和聚丙烯酸沉淀法等。親和層析法親和層析法是利用蛋白質和酶的生物學特異性,即蛋白質或酶與其配體之間所具有的專一性親和力而設計的色譜技術。酶一底物復合物形成之后,在一定的條件下分離復合物便得到純凈的酶。常常使
乙炔的制備方法
電石法由電石(碳化鈣)與水作用制得。實驗室中常用電石跟水反應制取乙炔。與水的反應是相當激烈的,可用分液漏斗控制加水量以調節出氣速度。也可以用飽和食鹽水。原理:電石發生水解反應,生成乙炔。裝置:燒瓶和分液漏斗(不能使用啟普發生器)。燒瓶口要放棉花,以防止泡沫溢出。試劑:電石(CaC?)和水。反應方程式