PCR實驗功能區擴增區的功能及常用儀器
PCR3區功能：cDNA合成、DNA擴增及檢測。常用儀器設備：低溫冰箱，移液器，熒光定量PCR儀，紫外燈及安全防護裝備。......閱讀全文
PCR實驗功能區擴增區的功能及常用儀器
PCR3區功能：cDNA合成、DNA擴增及檢測。常用儀器設備：低溫冰箱，移液器，熒光定量PCR儀，紫外燈及安全防護裝備。
PCR實驗功能區擴增產物分析區的功能及常用儀器
PCR4區功能:擴增片段的進一步分析測定，如雜交、酶切電泳、變性高效液相分析、測序等。(開展項目不同對應不同儀器)常用儀器設備：分子雜交儀，測序儀，電泳儀，移液器及安全防護裝備。
PCR實驗室功能區樣本制備區的功能及常用儀器
PCR2區功能：核酸（RNA、DNA）提取、貯存及其加入至擴增反應管。對于涉及臨床樣本的操作，應符合生物安全二級實驗室防護設備、個人防護和操作規范的要求。常用儀器設備：低溫冰箱，渦旋振蕩器，高速離心機，生物安全柜，金屬浴，核酸提取儀器及相應系統，安全防護裝備。
PCR實驗室功能區試劑儲存和準備區的功能及常用儀器
PCR 1區的功能：貯存試劑的制備、試劑的分裝和擴增反應混合液的準備，以及離心管、吸頭等消耗品的貯存和準備。常用儀器設備有低溫冰箱、渦旋振蕩器、移液器、PCR反應管及反應管架及安全防護裝備。
PCR實驗室功能區試劑儲存和準備區的功能及常用儀器
PCR 1區的功能：貯存試劑的制備、試劑的分裝和擴增反應混合液的準備，以及離心管、吸頭等消耗品的貯存和準備。常用儀器設備有低溫冰箱、渦旋振蕩器、移液器、PCR反應管及反應管架及安全防護裝備。
PCR擴增模板和抗體可變區基因的擴增
PCR?擴增模板和抗體可變區基因的擴增???? 如果構建Fab抗體庫,必需利用RT-PCR獲取抗體基因;構建ScFv抗體庫,既可以DNA作模板,也可以cDNA作模板。本室在構建小鼠ScFv抗體庫過程中,主要采用DNA作為擴增模板。?【材料和試劑】（1）PCR儀（2）Taq酶（3）氯仿（4）瓊脂糖?【
臨床基因擴增檢驗實驗室標本擴增區的污染防治
下述工作在本區內進行:DNA或cDNA擴增。此外,已制備的DNA模板和合成的cDNA(來自樣本制備區)的加入和主反應混合液(來自試劑貯存和制備區)制備成反應混合液等也可在本區內進行。在巢式PCR測定中,通常在第一輪擴增后必須打開反應管,因此巢式擴增有較高的污染危險性,第二次加樣必須在本區內進行。不能
通用實驗區儀器－－空氣泵的介紹
目前市場上為氣相色譜儀配套的空氣泵,其壓縮機主要以冰箱壓縮機為主,另外就是采用擺動活塞式的壓縮機,擺動活塞式壓縮機又分為進口和國產。冰箱壓縮機價格低廉、但是壓縮后的氣體含油,所以需要經過活性炭脫油。另外由于冰箱壓縮機一般需要閉環運行。但是在色譜儀空氣泵上使用時,是開環使用,這樣當空氣輸出流量很大時,
PCR實驗室分區能杜絕污染嗎？分3區還是4區？
目前PCR實驗室建設要求至少應該分為三個區域，即試劑準備區、核酸制備區和PCR擴增區，如果要對擴增產物進行開放性鑒定，如雜交、電泳等操作，原則需要增加第四個區。 實驗室分區的主要目的是避免純化核酸和擴增產物逆向污染前一個區域，但多年的經驗表明，無論是三區還是四區的設置，似乎都沒有完全杜絕實驗室
qpcr擴增曲線基線區不平滑
1、模板量過高導致，建議減小基線的終點值(一般建議設置為Ct值-4)。2、RNA純度低，建議梯度加大模板稀釋倍數看優化效果或重新制備高純度RNA重新實驗。
臨床基因擴增檢驗實驗室標本擴增產物分析區的污染防治
下述操作在本區內進行:擴增片段的測定。 核酸擴增后產物的分析方法多種多樣,如膜上或微孔板上探針雜交方法(同位素標記或非同位素標記)、瓊脂糖凝膠電泳、聚丙烯酰胺凝膠電泳、Southern轉移、核酸測序方法等。目前國內的商品試劑盒絕大部分均采用非同位素標記的微孔板上探針雜交方法,即PCR-ELIS
實驗室儀器PCR擴增儀的工作原理
?PCR基因擴增儀的工作原理: PCR反應一般設置20~40次循環,每一循環包括高溫變性、低溫退火、中溫延伸三步反應。每一循環的產物作為下一個循環的模板。PCR的擴增效率很高,如果循環次數是30次,那么新生DNA片段理論上達到230拷貝(約為109個分子)。?PCR反應每個循環的三個基本反應步驟如下
臨床基因擴增檢驗實驗室標本制備區的污染防治
下述操作在該區進行:臨床標本的保存,核酸(RNA、DNA)提取、貯存及其加入至擴增反應管和測定RNA時cDNA的合成。要正確使用加樣器。由于在加樣操作中可能會發生氣溶膠所致的污染,所以應避免在本區內不必要的走動。可通過在本區內設立正壓條件避免從鄰近區進入本區的氣溶膠污染。為避免樣本間的交叉污染,加入
多重－PCR－擴增實驗
? ? ? ? ? ? 實驗方法原理 多重PCR（multiplex PCR），其反應原理，反應試劑和操作過程與一般PCR相同。一般PCR僅應用一對引物，通過PCR擴增產生一個核酸片段，主要用于單一致病因子等的鑒定。重PCR的特點有：①高效性在同一PCR反應管內同時
多重－PCR－擴增實驗
試劑、試劑盒 Taq 聚合酶溶于水的 DNA引物儀器、耗材 熱循環儀實驗步驟 一、材料1. 酶和酶緩沖液Taq 聚合酶許多 Taq 聚合酶都可以用；作者發現 Roche 公司的 Taq 聚合酶可以滿足大多數需要. 如果需要提高PCR 產物的特異性，應該使用熱啟動聚合酶。使用 Tag 聚合酶本身附帶的
多重－PCR－擴增實驗
多重PCR擴增實驗可以用于：（1）在同一PCR反應管內同時檢出多種病原微生物，或對有多個型別的目的基因進行分型，特別是用一滴血就可檢測多種病原體；（2）多重PCR很適宜于成組病原體的檢測，如肝炎病毒，腸道致病性細菌，性病，無芽胞厭氧菌，戰傷感染細菌及細菌戰劑的同時偵檢；（3）多種病原體在同一反應管內
PCR基因擴增實驗
[實驗目的]通過本實驗學習PCR反應的基本原理與實驗技術。[實驗原理]多聚酶鏈式反應（polymerase chain reaction,PCR）的原理類似于DNA的天然復制過程。在待擴增的DNA片段兩側和與其兩側互補的兩個寡核苷酸引物，經變性、退火和延伸若干個循環后，DNA擴增2n倍。1．變性：加
通用實驗區儀器－氮氣發生器的介紹
氮氣發生器從制氮原理上來分有中空纖維膜分離法、變壓吸附法、電化學分離法三種。1)中空纖維膜分離法直接產生的氮氣純度一般在99%左右,流量范圍為0-10升/min,市場價格大約在幾萬到十萬。2)變壓吸附法直接產生的氮氣流量范圍更寬,純度一般也99%, 市場價格大約在10萬以內。3)電化學分離法直接產生
通用實驗區儀器－臭氧發生器的分類
臭氧發生器的分類： 按臭氧產生的方式劃分，目前的臭氧發生器主要有三種：高壓放電式、紫外線照射式、電解式。 一、高壓放電式發生器 該類臭氧發生器是使用一定頻率的高壓電流制造高壓電暈電場，使電場內或電場周圍的氧分子發生電化學反應，從而制造臭氧。 這種臭氧發生器具有技術成熟、工作穩定、使用壽命
實驗室儀器PCR擴增儀的維護保養原則
1)PCR基因擴增儀需要定期檢測,一般半年至少一次。2)PCR反應的要求溫度與實際分布的反應溫度是不一致的,當檢測發現各孔平均溫度差偏離設置溫度大于1～2℃時,可以運用溫度修正法糾正PCR實際反應溫度差。3)PCR反應過程的關鍵是升、降溫過程的時間控制,要求越短越好,當PCR儀的降溫過程超過60s,
通用實驗區儀器氫氣發生器的工作原理
氫分子和氫原子是所有化學元素中最小的分子和原子,如把鈀的單晶結構考慮成為面心立方體,立方體的八個角為八個鈀原子所占有,六個面的中心部分為六個鈀原子所占有,在這個鈀原子的密集堆積中,只有在鈀管表面能發生離解的氫原子才能通過,而其它元素的原子和分子,其直徑都大于鈀原子密集堆積的間隙,故不能通過。鈀擴散法
差異－DNA－的－PCR－擴增實驗
實驗步驟 一、材料1. 緩沖液、溶液和試劑dNTP 溶液（包含所有 4 種 dNTP，各 10 mmol/L)2. 酶和酶緩沖液PCR 反應緩沖液，10X聚合酶混合液，50X(Advantage2，Clontech，或相當產品）3. 核酸和寡核苷酸DNA 樣品（即方案 2 第 16 步中的各消減樣品
差異－DNA－的－PCR－擴增實驗
實驗步驟 一、材料1. 緩沖液、溶液和試劑dNTP 溶液（包含所有 4 種 dNTP，各 10 mmol/L)2. 酶和酶緩沖液PCR 反應緩沖液，10X聚合酶混合液，50X(Advantage2，Clontech，或相當產品）3. 核酸和寡核苷
差異－DNA－的－PCR－擴增實驗
在本方案所描述的反應中，差異 DNA 被選擇性地擴增。每個實驗至少應該有 4 個反應：①已消減的檢測 DNA;②未消減的檢測者對照（1-c);③反向消減的檢測 DNA;④反向未消減的對照（2-c)。本實驗來源于 PCR 實驗指南（第二版），作者：種康，瞿禮嘉。實驗步驟一、材料1. 緩沖液、溶液和試劑
臨床基因擴增檢驗實驗室試劑貯存和準備區的污染防治
貯存試劑和用于標本制備的材料應直接運送至試劑貯存和準備區,不能經過產物分析區。在打開含有反應混合液的離心管或試管前,應將其快速離心數秒。試劑原材料必須貯存在本區內,并在本區內制備成所需的貯存試劑。當貯存試劑溶液經檢查可用后,應將其分裝貯存備用,避免由于經常打開反應管吸液而造成污染。含反應混合液的離心
關于下丘腦神前區和結節區的分泌功能介紹
下丘腦神前區和結節區（弓狀核等）的一些神經元具有內分泌功能，稱為神經內分泌細胞，細胞的軸突伸至垂體漏斗。細胞合成的多種激素經軸突釋放入漏斗處的第一級毛細血管網內，繼而經垂體門微靜脈輸至遠側部的第二級毛細血管網。這些激素分別調節遠側部各種腺細胞的分泌活動（圖11－12）。其中對腺細胞分泌起促進作用
通用實驗區儀器氫氣發生器的使用方法
開機時,先用原料氫置換系統,從閥3放空,待系統內的高純氮置換干凈后,根據用戶的原料氫內的含氫量和所需高純氫量,參照表一數據,來選定操作溫度、操作壓力和馳放氣量,然后再通電加熱鈀管,從閥2流出高純氫。調溫方法,可根據隨機所帶的說明書進行溫度設定。從鈀擴散制得的高純氫到實際獲得的高純氫,尚需要置換閥2前
通用實驗區儀器－高純氫發生器的介紹
目前市場上為氣相色譜配套的氫氣發生器按電解膜材料分主要有堿石棉膜、離子膜、鈀金屬膜三種。堿石棉膜價格低廉、使用方便、便于維護;離子膜價格稍高、且目前國內此項技術不太成熟、同時離子膜對電解水質要求較高,水的電導率不高時會產生離子膜“中毒”現象,更換離子膜的費用也比較高。鈀管制氫價格高、以300ML/M
通用實驗區儀器－－氣體發生器的干燥過濾裝置
氣體發生器上的干燥過濾器,無論是分體的發生器還是組合的發生器,都需要對輸出的氣體進行干燥凈化,即除濕除烴(或者除油)等。現有的除濕除烴方法基本都采用吸附劑吸附法,吸附劑大體都采用變色硅膠、分子篩和活性炭。由于使用變色硅膠除濕,需要定期觀察硅膠的變色程度,采用透明的有機玻璃材料或者碳酸脂成為首選,不銹
PCR基因擴增儀實驗原理
技術應用實現快速高效均衡擴增檢測由光開關陣列、自聚焦透鏡和尾纖準直器及變增益微光O/E裝置組成的MEMS有機整體，在以16位單片機為核心的電控裝置管理下，能在毫秒級時間內完成多個標本快速均衡掃描檢測，避免了機械掃描方式或CCD掃描方式引起的時間滯后或漸暈誤差。實現標準樣本的PCR熱循環擴增及高通量實