腺相關病毒載體的簡介
腺病毒相關病毒(adeno-associated virus,AAV)是一類單鏈線狀DNA缺陷型病毒。其基因組DNA小于5 kb,無包膜,外形為裸露的20面體顆粒。AAV不能獨立復制,只有在輔助病毒(如腺病毒、單純皰疹病毒、痘苗病毒)存在時,才能進行復制和溶細胞性感染,否則只能建立溶源性潛伏感染。 腺相關病毒載體:現在最常用的腺相關病毒載體是 AAV Helper-Free System,即不需要腺病毒輔助載體的包裝系統。......閱讀全文
重組腺相關病毒載體的生產實驗
瞬時轉染 293 細胞制備無腺病毒重組腺相關病毒載體實驗材料293組織培養細胞系pSub201質粒pXX2質粒pXX6質粒試劑、試劑盒完全DMEM 10%FBS培養基完全IMDM 10%FBS培養基CaCl2純DMEM 2%FBS 培養基干冰 乙醇浴硫酸銨飽和硫酸銨乙醇PBS儀器、耗材組織培養板—次
SIRION將為Denali開發腺相關病毒載體
近日,SIRION Biotech與Denali Therapeutics宣布,兩家公司簽訂了一項研發許可和合作協議,SIRION將為Denali開發腺相關病毒載體(AAV),讓基因療法可以跨越血腦屏障,應用于治療帕金森病(PD)、阿茲海默病(AD)、肌萎縮性側索硬化癥(ALS)、及其它神經退行
腺相關病毒AAV簡介及應用
一、腺相關病毒簡介腺相關病毒(Adreno-Associated Virus, AAV)是微小病毒科(Parvoviridae)家族的成員之一。這一家族成員是一類微小、無被膜及具有二十面體結構的病毒。病毒顆粒的直徑在20~26nm之間,含有大小在4.7~6kb之間的線狀單鏈DNA基因組。它的復制和增
腺相關病毒包裝(AAV)介紹
腺相關病毒(AAV)是最初發現的作為腺病毒載體污染物的小型病毒。利用AAV進行研究的一個主要優勢是它的復制能力有限,并且通常不會導致人類疾病。由于這些原因,AAV通常被包含在較低的生物安全水平,并引發相對較低的免疫效應在活生物體內。雖然AAV可以在BSL-1處理,但表達癌基因或毒素的AAV應該在BS
病毒包裝技術——腺相關病毒(AAV)包裝(一)
摘要:腺相關病毒(AAV)是一種人細小病毒,?因為能作為一種基因治療載體而受到廣泛關注。目前大多數生成rAAV的實驗方案需要共轉染一個載體質粒和一個表達病毒復制和結構基因的包裝質粒到腺病毒(Ad)感染的培養細胞中。但是也可以通過新的輔助質粒(pH3和pH5),排除了Ad共轉染的需求。輔助質粒表達AA
病毒包裝技術——腺相關病毒(AAV)包裝(二)
2.3?蛋白質分析?為了分析AAV Rep和Cap蛋白質表達,按照2.2部分所述進行質粒轉染。轉染后48小時,將培養物刮到冷PBS/Mg(PBS含有5mM MgCl2),細胞低速離心沉淀收獲。細胞沉淀在冰上用200ml STM-NP緩沖液(25mM蔗糖,10mM Tris-HCl,pH8
重組系統腺相關病毒產品說明
一.Cre-loxP重組系統作用原理Cre重組酶和loxP位點Cre重組酶(Cyclization Recombination Enzyme)由大腸桿菌噬菌體P1的Cre基因編碼,是由343個氨基酸組成的38kD的蛋白質。它不僅具有催化活性,而且與限制酶相似,能夠特異性識別loxP位點。LoxP(l
病毒包裝技術7——腺相關病毒(AAV)包裝介紹
銳賽小課堂技術篇0702-113 摘要: 腺相關病毒(AAV)是一種人細小病毒, 因為能作為一種基因治療載體而受到廣泛關注。目前大多數生成rAAV的實驗方案需要共轉染一個載體質粒和一個表達病毒復制和結構基因的包裝質粒到腺病毒(Ad)感染的培養細胞中。但是也可以通過新的輔助質粒(pH
慢病毒載體相關知識問答大總結
慢病毒包裝技術專題Q:什么是慢病毒 ?A: 慢病毒載體 (Lenti vector)是用于感染細胞以實現穩定導入基因或siRNA的病毒載體系統,其感染效率可以達到100%。慢病毒和細胞結合后通過包裝蛋白將含有目的基因或者干擾序列釋放到細胞內。慢病毒RNA通過逆轉錄酶轉錄為DNA。DNA整合前復合
腺相關病毒(AAV)在動物實驗中的應用
腺相關病毒屬于微小病毒科 (parvovirus),為無包膜的單鏈線狀 DNA 病毒,基因組大小約 4.7 kb。利用腺相關病毒可以將外源基因轉入動物組織和細胞中,具有安全性高、免疫原性低、宿主范圍廣、表達穩定等多種優點,廣泛應用于動物體內研究。 腺相關病毒血清型眾多(12種),不同血清型