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  • 核酸序列擴增法的定義和原理

    中文名稱核酸序列擴增法英文名稱nucleic acid sequence-based amplification;NASBA定 義一種在等溫系統中擴增核酸的方法。即利用T7RNA聚合酶僅在結合核酸上相應位點時才能起作用的特點,將結合位點序列與靶序列相連,然后產生靶分子的RNA拷貝,形成反轉錄和RNA轉錄的連續循環,從而使靶序列擴增。應用學科免疫學(一級學科),應用免疫(二級學科),免疫學檢測和診斷(三級學科)......閱讀全文

    核酸序列擴增法的定義和原理

    中文名稱核酸序列擴增法英文名稱nucleic acid sequence-based amplification;NASBA定  義一種在等溫系統中擴增核酸的方法。即利用T7RNA聚合酶僅在結合核酸上相應位點時才能起作用的特點,將結合位點序列與靶序列相連,然后產生靶分子的RNA拷貝,形成反轉錄和RN

    核酸序列擴增法的定義

    中文名稱核酸序列擴增法英文名稱nucleic acid sequence-based amplification;NASBA定  義一種在等溫系統中擴增核酸的方法。即利用T7RNA聚合酶僅在結合核酸上相應位點時才能起作用的特點,將結合位點序列與靶序列相連,然后產生靶分子的RNA拷貝,形成反轉錄和RN

    依賴核酸序列的擴增技術的定義和原理

    1.概述:依賴核酸序列的擴增(Nucleic acid sequence-based amplification,NASBA),又稱自主序列復制系統(self- sustainedsequence replication,3SR)或再生長序列復制技術。1990年Guatelli等首先報道了這一技術.

    核酸序列擴增法的技術特點

    中文名稱核酸序列擴增法英文名稱nucleic acid sequence-based amplification;NASBA定  義一種在等溫系統中擴增核酸的方法。即利用T7RNA聚合酶僅在結合核酸上相應位點時才能起作用的特點,將結合位點序列與靶序列相連,然后產生靶分子的RNA拷貝,形成反轉錄和RN

    依賴核酸序列的擴增技術敘述

      國內外的研究結果均表明,草莓組織中富含多糖等物質,分離優質核酸較困難,核酸巾的雜質影響taq DNA聚合酶的活性,從而影響PCR技術在草莓病毒檢測中的應用。為了提高利用PCR技術草莓病毒檢測的穩定性,國內外的學者在草莓核酸提取方法做了較多的研究,利用OIAGEN公司生產的植物RNA提取試劑盒(P

    依賴核酸序列的擴增技術檢測

      1 核酸提取  NASBA 方法的核酸提取可按照常規的RNA提取方法進行,根據實際需要可以采取不同的方法。  2 核酸擴增  將純化的RNA 加到標準的NASBA 反應體系中后,先在65 ℃條件下作用5 min 去除RNA 的二級結構,然后在恒溫的42 ℃條件下開始擴增反應。  3 產物的檢測 

    依賴核酸序列的擴增技術簡述

      該技術的檢測反應有賴于AMV逆轉錄酶、噬菌體T7RNA多聚酶、核糖核酸酶H、兩種特別設計的特異性寡核苷酸引物和分子信標探針共同協作而完成。  NASBA全稱是nucleic acid sequence-based amplification,即依賴核酸序列的擴增技術。 依賴核酸序列的擴增技術,是

    依賴核酸序列的擴增技術相關

      NASBA的簡要過程如下:1.RNA模板鏈進入反應混合物后,第一個引物首先與模板鏈的3'端結束。2. 反轉錄酶,合成反義的補償的DNA鏈。3. RNA 酶H(一種核糖核酸內切酶,能夠特異性地水解雜交到DNA鏈上的RNA磷酸二酯鍵,分解RNA/DNA雜交體系中的RNA鏈,但不能消化單鏈或雙

    核酸序列的擴增技術優勢

      相對于免疫學方法或其他基因檢測法,NASBA在試驗的快速、敏感性、特異性方面有更多的優勢。  特異性強:NASBA是一種快速、等溫的RNA擴增技術,通過AMV逆轉錄酶和T7 RNA聚合酶進行的擴增反應,因為反應條件溫和以及比PCR短的反應時間,因此轉錄更加忠實于模板,錯配率很低,因而特異性更強。

    依賴核酸序列的擴增技術解析

    1.概述:依賴核酸序列的擴增(Nucleic acid sequence-basedamplification,NASBA),又稱自主序列復制系統(self-sustainedsequence replication,3SR)或再生長序列復制技術。1990年Guatelli等首先報道了這一技術.NA

    依賴核酸序列的擴增的基本方法

    基本方法為:將引物,標本加入擴增反應液,65℃1min使RNA分子二級結構打開,降溫至37℃加入逆轉錄酶,T7rna聚合酶和RNaseH,并在37℃反應1——1.5小時,其產物經瓊脂 糖電泳,溴乙錠染色即可在紫外儀下看到條帶.NASBA的特點為操作簡便,不需特殊儀器,不需溫度循環.整個反應過程由三種

    核酸擴增—環介導的等溫擴增法

      2000年日本學者Notomi在Nucleic Acids Research(核酸研究)雜志上公開了一種新的適用于基因診斷的恒溫核酸擴增技術,即環介導等溫擴增技術,英文名稱為“Loop-mediated isothermal amplification",受到了世衛組織、各國學者和相關政府部門的

    標準核酸序列的使用和維護

      標準核酸序列的使用  將按DNA測序技術指導原則測定得到的供試品DNA序列與標準核酸序列進行計算比對,進而結合判定標準進行種屬鑒別或鑒定。判定標準的制定應考慮不同物種的變異范圍,并在相應通則或品種項下予以明確。核酸序列比對方法一般建議根據樣品特點從以下三種方法中選擇采用。  1.BLAST法  

    基因擴增的定義和原因

    基因擴增(gene amplification)是指某一個特定基因的拷貝數選擇性地增加而其它基因的拷貝數并未按比例增加的過程?[1]??。基因擴增產生的可能原因:1)由錯誤的DNA復制和修復導致的基因復制;2)自私遺傳元件偶然捕獲而導致的DNA重復;3)人工聚合酶鏈式反應(PCR)擴增。

    停止轉移序列的定義和功能

    停止轉移序列(stop transfer sequence),肽鏈上的一段特殊序列,與內質網膜的親合力很高,能阻止肽鏈繼續進入內質網腔,使其成為跨膜蛋白質。

    核酸序列分析

    【實驗目的】1、?掌握已知或未知序列接受號的核酸序列檢索的基本步驟;2、?掌握使用BioEdit軟件進行核酸序列的基本分析;3、?熟悉基于核酸序列比對分析的真核基因結構分析(內含子/外顯子分析);4、?了解基因的電子表達譜分析。【實驗原理】針對核酸序列的分析就是在核酸序列中尋找基因,找出基因的位置和

    志賀菌屬核酸擴增法的檢測介紹

      核酸擴增技術,即聚合酶鏈式反應(polymerase chainreaction,PCR),其基本原理是設計、合成兩條寡核苷酸,作為引物,對應于待測病原微生物某一段特異性序列的兩端,然后在體外模擬DNA體內復制的過程反復擴增,使靶序列放大上萬倍甚至上百萬倍而被檢測出來。

    核酸疫苗的定義和功能

    核酸疫苗是將編碼某種抗原蛋白的外源基因(DNA或RNA)直接導入動物體細胞內, 并通過宿主細胞的表達系統合成抗原蛋白, 誘導宿主產生對該抗原蛋白的免疫應答, 以達到預防和治療疾病的目的。

    核酸探針的定義和分類

    RNA探針是指帶有標記的能與組織內相對應的核苷酸序列互補結合的一段單鏈cDNA或cRNA分子。根據在RNA雜交中所使用的探針依其來源可分為三種:即特異性cDNA、cRNA探針和人工合成寡核苷酸探針。

    免疫比濁法的定義和原理

    免疫比濁法(Turbidimetric inhibition immuno assay)是抗原抗體結合動態測定方法。免疫比濁法(Turbidimetric inhibition immuno assay)是抗原抗體結合動態測定方法。其基本原理是:當抗原與抗體在特殊稀釋系統中反應而且比例合適(一般規定

    DNA和RNA靶序列的原位PCR擴增實驗

    原位PCR是Hasse等于1990年建立的技術,就是在組織細胞里進行PCR反應,它結合了具有細胞定位能力的原位雜交和高度特異敏感的PCR技術的優點,是細胞學科研與臨床診斷領域里的一項有較大潛力的新技術。實驗材料樣品試劑、試劑盒雙氧水PBS蛋白酶KRNA酶DTTdNTPKClMgCl2Tris·Cl儀

    DNA和RNA靶序列的原位PCR擴增實驗

    實驗材料 樣品試劑、試劑盒 雙氧水PBS蛋白酶KRNA酶DTTdNTPKClMgCl2Tris·Cl儀器、耗材 加濕盒熱循環儀實驗步驟 1. ?將載有固定樣品的載玻片置105℃加熱塊上5~120 s。?2. ?載玻片放入含0.3%H2O2中,于37℃或室溫溫育過夜,以滅活內源性過氧化物酶活性,然后以

    自主復制序列的定義和作用

    ARS(autonomously replicating sequence)。在真核生物中發現的一類能啟動DNA復制的序列,含有一個AT富集區。最早在酵母中分離得到,隨后在其它真核生物中也發現了ARS序列的存在。這些序列是在人工合成的環形質粒中作為復制器起作用的。

    核酸和蛋白質序列分析2

    (2)輸出:除了以文本形式外,還可以通過JalView顯示和編輯結果。此外,還可以另外使用GeneDoc(常見于文獻)及DNAStar軟件等顯示結果。多序列比對的結果還用于進一步繪制進化樹。3、ORF(Open Reading Frame)分析從核酸序列翻譯得到蛋白質序列,需要進行ORF分析,每個生

    核酸和蛋白質序列分析1

    在獲得一個基因序列后,需要對其進行生物信息學分析,從中盡量發掘信息,從而指導進一步的實驗研究。通過染色體定位分析、內含子/外顯子分析、ORF分析、表達譜分析等,能夠闡明基因的基本信息。通過啟動子預測、CpG島分析和轉錄因子分析等,識別調控區的順式作用元件,可以為基因的調控研究提供基礎。通過蛋白質基本

    核酸檢測法的原理

      所有生物都含有核酸,核酸包括脫氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA),新型冠狀病毒是一種僅含有RNA的病毒,病毒中特異性RNA序列是區分該病毒與其它病原體的標志物。新型冠狀病毒出現后,我國科學家在極短的時間里完成了對新型冠狀病毒全基因組序列的解析,并通過與其它物種的基因組序列對比,發現了新型冠

    RGD序列的定義

    RGD序列由精氨酸、甘氨酸和天冬氨酸組成,存在于多種細胞外基質中,可與11種整合素特異性結合,能有效地促進細胞對生物材料的粘附。

    AluI序列的定義

    人基因組約有50萬~70萬份拷貝,AluI序列長282個核苷酸,由兩個同源但略有差別的亞基組成。

    互補序列的定義

    中文名稱互補序列英文名稱complementary sequence定  義在雙鏈核酸中,一條多核苷酸鏈可與另一條多核苷酸鏈互補的那部分序列。應用學科生物化學與分子生物學(一級學科),核酸與基因(二級學科)

    核酸序列的檢索實驗

    實驗方法原理掌握核酸序列檢索的操作方法;熟悉GenBank數據庫序列格式及其主要字段的含義;了解EMBL數據庫序列格式及其主要字段的含義;熟悉GenBank數據庫序列格式的FASTA序列格式顯示與保存;實驗材料電腦儀器、耗材筆記本筆實驗步驟1. ?使用Entrez信息查詢系統檢索核酸序列BC0608

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